• Santé - Quantité, Protéines, Membrane

[Microbiologie] western blotting

j'ai fait migrer mes protéines par sds page en puits confondus, sur le gel les bandes sont nettes, en faisant le transfert sur membrane de nitrocellulose et après révélation par le 4 chloro1 naphtol je n'ai pas obtenu des bandes pourquoi à votre avis sachant que le transfert s'est bien passé j'ai dilué les anticorps primaires 1/100 et les anticorps secondaires 1/2000 je doute par rapport au titre des anticorps que j'ai utilisé sachant qu'ils proviennent des patients atteints de Mycoplasma pneumoniae qu'est ce que je dois faire.  [...] Pour avoir une idée de la quantité de protéines sur la membrane vous pourriez la passer au bleu colloidal (ou bleu de coomassie). Vous pouvez essayer aussi l'amidoblack si vous ne souhaitez plus utiliser la membrane ensuite.  [...]

Microscopie à force atomique : les membranes cellulaires se réorganisent

Les chercheurs ont ainsi observé le relief de multiples protéines membranaires qui travaillent ensemble dans les membranes natives - c'est-à-dire très proches de leur état naturel - et ainsi accéder à leur organisation. Ils montrent que l'organisation de la membrane des bactéries photosynthétiques changent en fonction de la quantité de lumière disponible.  [...] Les membranes sont donc totalement réactives à l'environnement et se réorganisent en fonction des besoins. Ces résutats semblent par ailleurs confirmer que les membranes ne sont pas homogènes mais qu'il existe au sein d'une même membrane plusieurs compositions possibles (la localisation et la quantité de lipides et de protéines membranaires varient dans une même membrane).  [...]

[Biologie Moléculaire] Récepteurs NMDA

Ce sont des organismes vivants posseddant leur propre proteines, donc cela peut gener les observation, ensuite la proteine que l'on etudie peut etre toxique pour al cellule, auquel cas elle va mourrir empechant toute observation.  [...] Les protéines de la membrane, elles, sont conductrices et présentent une résistance. La capacité totale de la membrane peut donc varier selon la quantité de protéines présentent dans cette membrane. Dans ce cas, si la sphère est en fait une bicouche lipidique sans protéines, elle peut avoir une capacité membranaire parce qu'elle n'a pas de protéines membranaires alors que l'ovocyte en a. (Ca j'en suis pas sûre).  [...]

[Biochimie] Western blot

oui effectivement je pense que tu peux jouer sur le temps et tenter un transfert sur toute une nuit. Les grosses protéines transfèrent mal.  [...] Un facteur qui peut également jouer est la balance éthanol/SDS. Le SDS aide tes protéines à sortir du gel mais diminue leur fixation à la membrane. à l'inverse l'éthanol aide à la fixation mais empêche les protéines de sortir du gel. Tu peux donc essayer peut être d'augmenter la quantité de SDS et de baisser un peu l'éthanol.  [...]

extraction et séparations des composants d'une membrane

Si ton but est de faire une membrane artificielle (sans protéines) le mieux est de partir de faire des phospholipides (glycérol + acide gras en quantité en défaut puis phosphorylation via kinase = ATP... = p-t un peu compliqué) ou une molécules apparentées (amphiphiles).  [...] Enfin si tu veux extraire les prtotéines membranaires, si tu précipites... les protéines, je crois que tu précipites aussi les lipides...puisque en fait les protéines membranaires sont toujours (à ce stade) accompagnées de lipides et de détergents dans des structures de type micelle... donc pas facile.  [...]

[Biologie Cellulaire] membrane cellulaire banalité

oui biensure il s'agit de l'absorption des médicaments où on me parle de la structure des membranes cellulaires et donc on me dit de quoi elle est constitué. proteines / lipides/glucides.  [...] si on parle de membrane lipo-proteique c'est que la quantite de proteine est plus grande que la normale ou encore pour mettre en evidence le role des proteines membranaire dans la reconnaissance des molecules auquels ils s'attachent.  [...]

[Biologie Cellulaire] le cholesterol et les lipides dans la membrane plasmique...

*** on surfant sur net j'ai trouvée plusieurs sites...alors il ya des uns qui disent que la quantité des lipides dans la M.plasmique est tres importants par rapport a celle des proteines ( 40 % de la masse membranaire est formé de lipides ) et il ya des sites qui disent que c'est 60 % de la masse membranaire.  [...] En général le pourcentage massique de proteines est plus élevé que celui des lipides dans les membranes PLASMIQUES ( de l'ordre de 40-60 ou 30-70). Cela s'explique par le fait que les proteines sont de masse beaucoup plus importante que les lipides... ca n'a rien à voir avec leur quantité.  [...]

western-blot

Je fais également des western blot et j'ai le même problème que toi. je resuspend mes protéines directement dans le tampon de charge donc je ne peux pas quantifier la quantité de protéines que je dépose sur gel.  [...] tu peux couper ton gel en deux. Une partie de ton gel va être colorée au bleu de Coomassie et l'autre partie va être transférée sur membrane. tu peux grâce à la coloration au bleu déterminer si tu as déposé une quantité équivalente de protéines sur gel.  [...]

[Biochimie] Quantite de proteine dans les membranes.

Aussi on remarque aussi que la quantité de protéine de la membrane des organites d'une cellule est plus élevée que dans sur sa membrane plasmique.  [...] Et pour ta dernière question, je suppose que ce soit pour que la membrane garde tout ça fluidité qu'il y a plus de phospholipides que de protéines.  [...]

relation entre nombre de cellules \quantité de protéines

est ce qu'il y a un ratio relation entre le nombre de cellules et la quantité de protéines ie pour n cellules combien de protéines on aura.  [...] Maintenant vous ne parlez sans doute pas de nombre de cellules à densité égale, mais sans doute de la quantité de protéines en fonction de la confluence. N'est ce pas.  [...]