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Microscopie à force atomique : les membranes cellulaires se réorganisent

Les chercheurs ont ainsi observé le relief de multiples protéines membranaires qui travaillent ensemble dans les membranes natives - c'est-à-dire très proches de leur état naturel - et ainsi accéder à leur organisation. Ils montrent que l'organisation de la membrane des bactéries photosynthétiques changent en fonction de la quantité de lumière disponible.  [...] Les membranes sont donc totalement réactives à l'environnement et se réorganisent en fonction des besoins. Ces résutats semblent par ailleurs confirmer que les membranes ne sont pas homogènes mais qu'il existe au sein d'une même membrane plusieurs compositions possibles (la localisation et la quantité de lipides et de protéines membranaires varient dans une même membrane).  [...]

[Microbiologie] western blotting

j'ai fait migrer mes protéines par sds page en puits confondus, sur le gel les bandes sont nettes, en faisant le transfert sur membrane de nitrocellulose et après révélation par le 4 chloro1 naphtol je n'ai pas obtenu des bandes pourquoi à votre avis sachant que le transfert s'est bien passé j'ai dilué les anticorps primaires 1/100 et les anticorps secondaires 1/2000 je doute par rapport au titre des anticorps que j'ai utilisé sachant qu'ils proviennent des patients atteints de Mycoplasma pneumoniae qu'est ce que je dois faire.  [...] Pour avoir une idée de la quantité de protéines sur la membrane vous pourriez la passer au bleu colloidal (ou bleu de coomassie). Vous pouvez essayer aussi l'amidoblack si vous ne souhaitez plus utiliser la membrane ensuite.  [...]

[Biochimie] Western blot

oui effectivement je pense que tu peux jouer sur le temps et tenter un transfert sur toute une nuit. Les grosses protéines transfèrent mal.  [...] Un facteur qui peut également jouer est la balance éthanol/SDS. Le SDS aide tes protéines à sortir du gel mais diminue leur fixation à la membrane. à l'inverse l'éthanol aide à la fixation mais empêche les protéines de sortir du gel. Tu peux donc essayer peut être d'augmenter la quantité de SDS et de baisser un peu l'éthanol.  [...]

extraction et séparations des composants d'une membrane

Si ton but est de faire une membrane artificielle (sans protéines) le mieux est de partir de faire des phospholipides (glycérol + acide gras en quantité en défaut puis phosphorylation via kinase = ATP... = p-t un peu compliqué) ou une molécules apparentées (amphiphiles).  [...] Enfin si tu veux extraire les prtotéines membranaires, si tu précipites... les protéines, je crois que tu précipites aussi les lipides...puisque en fait les protéines membranaires sont toujours (à ce stade) accompagnées de lipides et de détergents dans des structures de type micelle... donc pas facile.  [...]

[Biologie Cellulaire] positions des protéines

Les membranes diffèrent beaucoup entre elles quant à leur composition en protéines, et celle-ci reflète l'activité biochimique membranaire. Ce sont soit des protéines intrinsèques (intégrées dans la membrane plasmique), soit des protéines extrinsèques (sur une face ou l'autre de la membrane).  [...] Les liaisons entre protéines intrinsèques et membranes sont de type hydrophobe. les protéines intrinsèques sont essentiellement constituées d'a-hélices hydrophobes.  [...]

[Biologie Cellulaire] membrane cellulaire banalité

oui biensure il s'agit de l'absorption des médicaments où on me parle de la structure des membranes cellulaires et donc on me dit de quoi elle est constitué. proteines / lipides/glucides.  [...] si on parle de membrane lipo-proteique c'est que la quantite de proteine est plus grande que la normale ou encore pour mettre en evidence le role des proteines membranaire dans la reconnaissance des molecules auquels ils s'attachent.  [...]

Le cholestérol détruit les neurones ?

On retrouve ensuite le cholestérol, en quantité variable et qui joue un rôle important dans la perméabilité membranaire de cette bicouche, et de nombreuses protéines associées. La membrane plasmique est asymétrique dans sa composition.  [...] Le cholestérol est en quantité régulée au sein du cerveau, et joue un rôle très important à la perméabilité membranaire (qui elle, joue un rôle tout à fait crucial pour permettre la signalisation nerveuse), aussi bien dans l'axoplasme des neurones que dans les cellules gliales.  [...]

[Biologie Cellulaire] encore ces protéines !!!

Quant aux protéines périphériques, elles ne sont pas intrinsèques mais extrinsèques. elles ne traversent jamais la membrane, elles sont liées aux phospholipides ou aux protéines intrinsèques (qui traversent la membrane) par des liaisons covalentes.  [...] Attention, toutes les protéines intrinsèques ne sont pas transmembranaires. certaines ne traversent pas complètement la membrane.  [...]

[Biologie Cellulaire] Protéines et membrane plasmique

Les protéines périphériques peuvent en effet être reliées covalemment à des AG comme le palmitate (palmitoylation) ou le myristate (myristoylation), pour améliorer leur fixation à la surface de la membrane. D'autres modifications post-traductionnelles comme la géranylgéranylation, la farnésylation, ou la glypiation peuvent avoir lieu dans le même but.  [...] Oui ta prof a raison et c'est bien pour se fixer à la membrane. Les phospholipides qui constituent la membrane ont une partie hydrophobe et une partie hydrophile (et pas hydroph y le rowing91 ) exposée à la surface qui peut interagir avec les protéines par des liaisons hydrogènes ou ioniques.  [...]

western-blot

Je fais également des western blot et j'ai le même problème que toi. je resuspend mes protéines directement dans le tampon de charge donc je ne peux pas quantifier la quantité de protéines que je dépose sur gel.  [...] tu peux couper ton gel en deux. Une partie de ton gel va être colorée au bleu de Coomassie et l'autre partie va être transférée sur membrane. tu peux grâce à la coloration au bleu déterminer si tu as déposé une quantité équivalente de protéines sur gel.  [...]