• Santé - Protocole, Préparation, Sondes

[Microbiologie] PCR-Sondes

svp qui peut me donner une idée sur un protocole de PCR pour la préparation des sondes (spécifique pour un gène de résistance ).  [...]

[Biochimie] (licence/master) Question sur la pcr pour un rapport de stage, merci

Pour la Multiplex, un des avantages est également de pouvoir quantifier (car en temps réel). Mais cela demande beaucoup de préparation pour le protocole. Après, au niveau du désavantage, vous avez toute à fait raison. il est cependant possible de diminuer, voir de supprimer cet inconvénient de compétition à l'aide d'optimisation des sondes et du protocole.  [...] La plus pratique et la plus utilisée. Généralement, une ou deux personnes développent LE protocole optimal utile pour le labo, puis pas touche. Et cela fonctionne généralement très bien.  [...]

[Biochimie] élaboration de sondes!

SVp j'arrive pas à comprendre les 4 premiéres cases à partir du haut dece schéma.. il s'agit du protocole d'élaboration de sondes ARN pour une hybridation in situ.  [...]

La récupération rapide après chirurgie : sitôt opéré, sitôt debout

Fini le jeûne de 24 heures avant l'opération. Dans le protocole de la récupération rapide, le patient peut manger six heures avant et boire deux heures auparavant. L' anesthésie est plus légère. Perfusions et sondes sont évitées au maximum. Le patient remange rapidement.  [...] La Haute autorité de santé (HAS) réalise actuellement un état des lieux de la réhabilitation rapide, en France et à l'étranger, attendu au printemps 2016. Dans sa note préparatoire, elle qualifie de prometteurs les résultats de cette méthode, tout en soulignant l'hétérogénéité des pratiques, d'où la nécessité d'évaluation.  [...]

Hybridation in Situ

- L'appariement plus ou moins spécifiques entre acides nucléiques (ici, entre la sonde et l'ARN) dépend de plusieurs conditions (pH, sels, température), le tout est appelé stringence. Le SSC permet de jouer sur la stringence (en jouant sur le pH / concentration en sels) qui ne doit pas être trop forte (laison trop difficile, manque de signal), ni trop faible (trop de liaison, signal aspécifique).  [...] - Les sondes s'hybrident mieux et plus rapidement à température élevée (55, 60°C, ça dépend du protocole). Cf la relation entre température et stringence d'hybridation.  [...]

[Biochimie] Analyse de l'expression du gène fos

Si j'ai bien compris, l'étape de PCR vous sert à produire les sondes. Donc le gel est un contrôle de la qualité de vos sondes. Reste à comprendre pourquoi il y aurait plusieurs fois la même à des tailles différentes. Mais peut être que je me trompe sur le rôle de la PCR dans votre protocole.  [...] Pour l'instant, je ne peux être certain de rien sur la base de vos seules explications. Vous n'avez pas un protocole à scanner.  [...]

PCR en temps réel

Maintenant pour les protocoles de qPCR, il n'en existe pas un. La qPCR est un méthode qui s'adapte aux procédures que vous souhaitez mettre en place. Préparation des cDNA, calibration, réalisation, analyse. Si vous n'êtes pas plus précis(e) dans votre demande, personne ne pourra vous aider.  [...] d' apres votre experience proffessinelle, j' aimerai azvoir tous les conseils pour ne pas retomber dans les erreurs. et c est vraiment possible de m' envoyer votre protocole adopté par vous.c est vrai je suis debutante dans le domaine et j' aimerai avoir des collégues tres performants.  [...]

variabilité microarray

D'une façon générale, les protocoles comportent un nombre d'étape assez important, donc les facteurs sont multiples (synthèse des sondes, type de lamelle, préhybridation, hybridation, lavage, séchage etc...).  [...] Bah le truc, c'est qu'à partir du moment ou les conditions ne sont pas optimisées, la variance peut être telle que tu peux te retrouver avec des résultats opposés simplement à cause de la marge d'erreur.   [...]

[Biologie Moléculaire] RT-qrt-PCR : courbe de fusion et autres contrôles

Tu comprendras que pour utiliser plusieurs sondes, il faut pouvoir les distinguer. On est donc limités par le pouvoir de détection de l'appareil (nombre de canaux sélectifs d'une longueur d'onde d'émission du fluorophore).  [...] En fait pour les sondes, plus on met de sondes, plus ça demande des conditions spécifiques et de travail en aval pour que ça fonctionne. Dans l'absolu, c'est mieux, en pratique.  [...]

[Biologie Cellulaire] Hybridation in situ

je dois faire de l'hybridation in situ et je cherche un lien qui m'informe sur les protocoles et sur le nombre de sondes différentes que l'on peut utiliser sur une coupe de cerveau et quel type d'hybridation est préférable (sonde chaude ou froide).  [...] Vous avez oublié une chose essentielle lorsque l'on ouvre une discussion sur le forum. la politesse (voir Charte).   [...]