• Santé - Protocole, Dosage, Enzyme

[Biochimie] Protocole de dosage de l'enzyme glycosyltransférase

[Biochimie] Protocole de dosage de l'enzyme glycosyltransférase.  [...] j'ai besoin énormément d'un protocole de dosage de l'enzyme glycosyltrasferase.  [...]

[Biochimie] probleme volume cuve spectrophotometre

J'ai trouvé un protocole de dosage d'une enzyme à l'aide de lecteur microplaque.  [...] Le volume total dans la cuve est 500 µl est ce que j'ai le droit de multiplier le volume de tous les composants afin d'avoir au final 1 ml dans la cuve.   [...]

Dosage de la catalase

je suis toute nouvelle sur ce forum et j'ai besoin d'aide, je travaille sur le dosage d 'une enzyme la catalase théoriquement cette enzyme est sensée décliner au fur et à mesure durant 3 minutes alors j'ai essayé un protocole pas de diminution, j'ai ensuite testé un autre protocole ça a marché une fois et ensuite plus du tout.  [...] Est ce que vous auriez une idée pourquoi ça coince éclairez moi s'il vous plait.   [...]

[Biologie Moléculaire] RT-PCR à partir d'ARNtot possible ?

2) Des test préliminaires de purification d'ARNm (utilisation des billes magnétiques invitrogen) me donnent un profil moyen sur gel d'acrylamyde 1% (présence de bandes et non de smear.). De plus, l'ARNm semble très variable (et difficile à quantifier). Avez vous un protocole de purification d'ARNm à conseiller (je démarre l'extraction ARNtot au trizol reagent).  [...] Pouvez-vous me faire part d'un protocole pour le dosage et le temps d'incubation de l'échantillon avec l'enzyme. Faut-il dégrader/inactiver l'RNase après dégradation.  [...]

[Biochimie] Purification de la catalase du foie de rat.

On réalise une dénaturation des protéines pour les détruire sauf la catalase. On réalise des fractionnements sur une colonne d'hydroxylapatite et on mesure l'activité catalasique et l'absorbance pour vérifier la pureté. Je n'ai pas vraiment saisi l'intérêt de cette purification et du TP.   [...] Je pense que le but était tout simplement de vous montrer comment on procède pour l'étude d'une protéine (purification, dosage, test d'activité...). Et la catalase a dû être choisie parce que les personnes qui vous font ce TP ont un protocole déjà préparé pour cette enzyme.  [...]

[Biochimie] Extraction d'enzymes musculaires

J'aimerais solliciter votre aide car j'essaye de mettre au point un protocole de dosage enzymatique. Pour celà, j'ai besoin d'extraire l'enzyme d'intérêt de muscles de souris.  [...] La semaine prochaine, je vais tester un protocole bien expliqué et réalisé sur la meme enzyme mais provenant de végétaux (mais, pomme de terre..) j'espère obtenir des résultats car c'est une manip proposée pour des travaux pratiques d'étudiants.  [...]

[Biochimie] Sollution tampon votre avis

Est-ce que les composantes de ce tampon ne risque pas de réagir avec celle du tampon que je vais utiliser pour le dosage de l'enzyme (le tampon que dicte le protocole du dosage de l'acétylcholéstérase, destiné à offrir un pH idéal pour la réaction). Ne risque t'il pas de réagir aussi avec la acétylcholine que je vais préparer et le DTNB (l'enzyme doit dégrader l'acétylcholine pour donne du thiocholine qui va ce lier au DTNB et le spectrophotometre va mesurer l'absorpition du produit thicholine-DTNB).  [...] Par contre j'ai une question pour toi. Lorsque tu auras extrait tes protéines, comment comptes tu procéder, tu vas immédiatement faire ton dosage enzymatique ou vas tu conserver ta protéine à -20°c Car si tu choisis la seconde option, il faudra que tu tiennent comptes de d'autres paramètres absoluement important.  [...]

[Biochimie] Cinetique enzymatique

j'ai fait des dosage enzymatique pendant 10 jours selon un protocole fourni par le laboratoire.  [...] Je me retrouve avec des valeurs de Au/sec/ml, j'ai des courbes d'activité pendant toute la DLC de mon produit mais je ne sais pas si je peux considérer cette activité comme impactant. Ces sont des valeur de PPO et POD dans les jus de fruits crus.   [...]

[Biochimie] dosage enzyme pour quoi utiliser le bain-marie ?

Je pense que pour la préparation du tissu dans le tampon, on dit qu'il faut travailler dans la glace 4C°,c'est pour inactiver l'enzyme(par le froid) et éviter l'augmentation de la température du tissu lors du broyage et de ce fait éviter la dénaturation de l'enzyme, car une enzyme soumise a basse température est inactivé mais elle n'est pas dénaturée (et qui est donc de ce fait détruite comme dans le cas d'une haute température).  [...] On met les solutions préparées au bain-marie (25 C°) certainement pour réactiver l'enzyme inactivé par le froid et de ce fait elle redevient active, ce qui permet d'effectué le dosage.  [...]

[Microbiologie] Production ethanol avec Saccharomyces cerevisiae

-Trouvez le milieu apte à la culture de SC et dans lequel le sucre peut être remplacé. -Protocole de dosage de l'éthanol produit par SC.  [...] le dosage est basé sur la réaction catalysée par l'alcool déshydrogénase (dernière enzyme intervenant dans la fermentation alcoolique), oxydo-réductase à NAD qui utilise, ici, l'éthanol comme substrat.  [...]