• Santé - Protéines, Poids, Cellule

extraction et dosage des protéines totales

J'ai ensuite trouvé que 40% d'une cellule est constituée de protéines. Mais bon il me manque encore le poids d'une cellule et le rendement d'un extraction... hin hin... je sais pas si c'est la bonne direction pour répondre à ma question.  [...] Je crains que ca depende énormément du type cellulaire utilisé et des techniques d'extraction. Le plus simple me semble de faire toi meme l'essai pour voir.  [...]

La cryogénisation : une utopie ?

Par contre un organe ou même un corps entier, pour l'instant on est loin des romans SF où les gens resteraient vivants... Pour les lésions, je pense notamment au système vasculaire et aux cellules sanguines comme les hématies - ça fait partie des cellules et tissus ne sait pas congeler, d'où besoin en continu de dons du sang (à moins d'arriver à faire pousser des hématies en tube).  [...] Pour une de nos cellules, seules les protéines sont encodées. et encore il n'est marqué nulle part quand ni où les utiliser. Ces protéines représentent peut-être 40% du poids sec de la cellule, c'est encore pire si on compare à la masse totale humidifiée.  [...]

Lecture graphique éléctrophorèse

- D'après les expériences (protocole) 1 et 2, le noyau est plus riche en protéine de faible poids moléculaire que la cellule considéré globalement. Faux pour la correction, vrai pour moi, le graphique de droite sur le noyau possède une radioactivité plus faible ( de 0 à 600) que celle du graphique de gauche sur la cellule (0 à 3000) donc logiquement.  [...] Pour la seconde question. moi je l'ai comprise ainsi comparativement au total des protéines de chaque compartiment, le noyau est plus riche en protéines de faible poids moléculaire que pour la cellule totale et là c'est faux.  [...]

[Biochimie] Comment optimiser le transfert (en western blot) des protéines de haut poids moléculaire ?

Je cherche le moyen d'optimiser le transfert (en western blot) des protéines de haut poids moléculaire. Je travaille sur FAS (274kDa) et je n'arrive pas à la transférer.  [...] C'est ce qu'on veut d'ailleurs montrer en traitant les cellules différemment). J'ai alors acheté des gels commerciaux de chez BioRad ( 10%). J'ai suivi leur protocole de migration (200V pendant 45 min), j'ai fais le semi dry transfert à 25V pendant 2h. Le transfert a été parfait car mon marqueur de poids moléculaire de 300kda a été bien transféré.  [...]

problème de western blot

j'ai depuis peu un problème dans mes western blot, mes échantillons (protéines extraites de culots cellulaires) migrent en vague alors que mon poids moléculaire est normal. Rien n'a changé par rapport à d'habitude à part les échantillons eux mêmes.  [...] Au moins tu as appris une belle leçon, refaire toutes les solutions quand quelque chose ne fonctionne pas... et surtout ne pas chercher à savoir pourquoi soudainement ça ne marche plus... c'est souvent une perte de temps.   [...]

[Biochimie] Marqueur de poids moléculaire-protéines

je n ai pas de marqueur de poids mléculaires pour protéines pour le déposer sur gel d'acrylamide afin de situer la taille de ma protéine, que pourrais je utiliser comme indicateur de poid (et si possible chaque produit avec son poids correspondant).  [...] Et bien fait un tour dans ton labo et trouve des protéines pures dont tu connais la masse moléculaire et dépose les sur gels.  [...]

Rôle de SDS dans la séparation des protéines par électrophorèse

Le SDS est un détergent qui va supprimer les liaisons non-covalentes ce qui va avoir pour effet de dénaturer toutes les protéines présentes. Il y a donc perte de conformation, ce qui fait que ces protéines ne seront différenciées que par leur taille (ou poids) et non par la conformation.  [...] + Le SDS va donner une charge négative à toutes les protéines, donc elles vont migrer du pôle négatif vers le pôle positif en fonction de leurs poids moléculaire dans le gel d'électrophorèse.  [...]

[Biologie Moléculaire] kinase

). Si tu ne peux pas utiliser ce genre de technique, tu peux juste utiliser un lysat cellulaire total et analyser les proteines d'un certain poids moleculaire apres migration sur gel ou meme (plus delicat quand meme) utiliser le lysat lui meme pour ne rien perdre.  [...] - solubilité. in cellulo il en résulte la formation de corps d'inclusions (cristaux de protéines à l'intérieur des bactéries) qui sont très difficiles à récupérer. Même dans des systèmes de traduction in vitro les kinases peuvent précipiter et devenir insolubles.  [...]

[Physiologie] Hématie et liquide de Ringer-albumine ?

Pour la 1ère expérience c'est normale car le plasma est riche en protéine comme les globulines alpha,globuline béta, globuline gamma et fibrinogène tous produit par le foie et qui on cette particularité d'avoir un poids moléculaire très élevés ainsi que la capacité de formé des ponts entre protéine et cellule. donc augmentation de la viscosité.  [...] Pour la 2 ème je comprends pas trop le liquide de ringer est un liquide physiologique pourquoi il n'y a pas eu d'agrégation des globules rouges en rouleaux.   [...]

[Biochimie] Plusieurs questions sur les chromatographies échangeuses d'ions et d'affinité

..cependant,je ne comprends pas pourquoi utiliserions-nous du NaCl comme cela est expliqué dans la correction d'un exercice. le prof de TD nous a expliqué que pour détacher les protéines chargées fixées aux billes,nous pouvions utiliser du NaCl or,le NaCl est neutre. comment peut-il être compétitif.  [...] A la question Les protéines de l'échantillon P3 ont le même poids moléculaire que les protéines notées C nous avons répondu vrai car l'échantillon P3 proviennent de l'échantillon P2 filtrés sur gel donc par poids moléculaire.  [...]