• Santé - Protéines, Phase, Supérieur

[Biologie Cellulaire] protéines dans la phase organique?

J'aurai voulu savoir si quelqu'un aurait pu m'eclairer sur le fait que les proteines lors d'une extraction au phenol chloroforme migrent dans la phase organique alors qu'elles sont le plus souvent cytosolubles... Ne devraient elles pas se retrouver dans la phase acqueuse.  [...] Moi j'ai fait une extraction éthanol/chloroforme sur un broya de foie et les protéines étaient bien dans la phase supérieur aqueuse.  [...]

[Biochimie] Les piments

tu ferme le robinet et tu ouvre le bouchon et tu laisse repoer. 2 phase vont se separer. la phase superrieur contien le piment. tu enlève la phase inferrieur. (attention à ne pa éliminer la phase superieur contenat le pigment). tu ferme le robinet tu rajoute de l'eau dans l'ampoule et tu secou, tu laisse reposer, puis tu elimine la phase inferieur.  [...] et tu recommence autant de fois jusqu'à ce qu'il ne reste plus que la phase superieur verte contenant le pigment.  [...]

[Biologie Moléculaire] Extraction ARN

Tu peux essayer de refaire un Trizol par dessus pour te débarrasser des protéines... Tu vas re-perdre un peu d'ARN forcément, mais niveau pureté on devrait se retrouver vers quelque chose d'un peu plus optimal déjà.  [...] sinon faire un mélange avec methanol-chloroforme (récupérer la phase supérieur) suivi d'un mélange chloroforme (récuperer la phase supérieur) suivi d'une précipitation à l'acetate de sodium et ethanol (0.3M finaux d'acetate de Na, avec 2.5V de ethanol 99%, une heure a -20°, centrifuger récupérer le culot et le laver avec 250 microlitres ethanol 70%, centrifuger evacuer l'ethanol et resuspendre en eau-DEPC ) permet normalement d'avoir une bonne qualité d'ARN sans trop de pertes.  [...]

[Biologie Moléculaire] les ARNs et extraction

En tout cas j'ai compris ça de l'extraction à la guanidine. Donc la phase supérieur c'est de l'eau à pH neutre avec l'ARN Par contre on aurait pu en effet utiliser des Dnases, c'est vrai. J'en prends note pour l'amélioration de la technique.  [...] Autre p'tites questions. dans ce TP on n'a pas utilisé de phénol (élimine les protéines). Dans ce cas dans la phase aqueuse on a donc de l'ARN et des protéines, nan Ou alors la dénaturation des protéines par la guanidine fait que les protéines ne sont plus dans la phase supérieure.  [...]

Chromatographie

1) A propos de la ccm je veux savoir si on doit obligatoirement avoir la phase stationnaire et la phase mobile de nature differente, tel que si l'une est polaire l'autre doit etre apolaire, ou bien on peut avoir une phase stationnaire et mobile polaires non charges ou charges de meme signe.  [...] 2) On dit qu'une molecule polaire a une affinité superieur pour les milieux polaires, et une molecule apolaire a une affinite superieur pour les milieux apolaire. ( et si on a par exemple une phase stationnaire hydrophobe et la molecule dont on veux analysé est de meme hydrophobe, par contre la phase mobile est polaire, en fait je sais qu'il y aura des interactions hydrophobes entre la molecule et la phase stationnaire=.  [...]

Expériences en génétique…

Euh en general pour intégrer l'adn à une bacterie, on passe plutot par un virus ( le lambda est bien) dans le quel se trouve en plus les genes de toutes les proteines necessaires à l'integration de l'adn au genome. (pour la technique c'est un peu complexe.  [...] Pour ce qui est du P32, on peux l'utiliser in vivo pour visualiser (par exemple) des protéines ou des acides nucléiques dans la cellule. Ce dont tu parles c'est de l'hybridation in situ et ça ne s'utilise pas avec un gel mais sur une cellule vivante.  [...]

[Biochimie] Do 260/280

cela voudrait dire qu'avec un rapport supérieur à 2 vous n'avez que très peu de protéines dans vos extraction d'acides nucléiques.  [...] Seulement je crois que ce n'est pas aussi simple. En effet, après un petit tour rapide sur la toile il semble que selon la composition des protéines en acides aminés, elles puissent absorber à d'autres longueurs d'ondes notamment à 260nm. Si tu es contaminé par des protéines absorbant plutôt à 260nm alors tu auras un rapport plus haut que la normale et donc supérieur à 2.  [...]

[Biologie Moléculaire] La molécule mystère

Je suis une petite protéine monomérique de 21kDa, possedant une activité GTPase et impliquée dans l'activation de plusieurs voies signalétiques dont la voie des MAP-Kinase. Qui suis je.  [...] Sauf erreur de ma part, les protéines Nup interviennent dans la formation du pore nucléaire tel qu'on le connait de façon classique.  [...]

[Biologie Cellulaire] Ficoll de sang de cordon

Je fais des Ficolls sur du sang de cordon (plus précisément sur l'anneau blanc de PBMC récupéré après un Buffy Coat du sang de cordon).   [...] Chose surprenante pour moi qui ait l'habitude des ficolls sur du sang de donneurs, la phase supérieur (sérum normalement) est ici complètement rouge, et sale (comme une présence de fibrine ).  [...]

[Biotechnologie] Micropropagation

Imaginons que tu prennes un bout de tige avec un apex secondaire et tu met ça en culture, la premiére chose qui se passera sera le dévellopement de racines pour reformer la plante en entiére, c'est je pense la phase d'enracinement. 1er phase du processus et phase inevitable pour n'importe quel morceaux de la plante choisi.  [...] Tout va dépendre de la composition en hormones du milieu, pour la phase d'enracinement, on va privilégier un milieu avec un balance hormonale auxine sur cytokinine supérieur à 1.  [...]