• Santé - Protéines, Phase, Organique

[Biologie Cellulaire] protéines dans la phase organique?

J'aurai voulu savoir si quelqu'un aurait pu m'eclairer sur le fait que les proteines lors d'une extraction au phenol chloroforme migrent dans la phase organique alors qu'elles sont le plus souvent cytosolubles... Ne devraient elles pas se retrouver dans la phase acqueuse.  [...] je n'ai jamais vu de proteines aller dans la phase organique... mais en revanche il peut se produire parfois une inversion de phase (la phase organique passe au dessus).  [...]

[Biologie Moléculaire] extraction d'ARN

J'ai bien compris cela, mais en quoi l'ARN est différent de l'ADN puisque j'ai trois phases au final. la phase organique, rose contenant les protéines, la phase aqueuse contenant l'ARN et au milieu, la phase intermédiaire qui correspond à l'anneau d'ADN.  [...] La phase organique est en bas contient les protéines et les débris, l'anneau blanc à l'interphase ce sont encore des protéines et des lipides, et dans la phase acqueuse il y a TOUS les acides nucléiques.  [...]

demande d'infos!!! extraction de l'ADN

mais ce que Je cherche c'est un document détaillé de la chose, avec les protocoles mais surtout les principes de chaque étape … j'ai un tas de documents tiré via divers moteurs de recherche… mais aucun ni complet, soit il n'y a que le protocole, soit on ne parle que de certains aspects de la manipe….   [...] - Après avoir placé le melange contenu cellulaire/phenol, il faut agiter afin que l'ADN puisse se retrouver dans la phase aqueuse que l'on recupère après avoir centrifugé. 2 phases sont visibles. la phase aqueuse au dessus contenant l'ADN, la phase organique contenant l'ARN et l'interphase contenant les protéines.  [...]

extraction d'ADN

L'extraction phenol/chlorophorme permet en general de separer la phase acqueuse (ou se concentrent les acides nucleiques) et la phase organique (dans la quelle les proteines se solubilisent plus facilement que les acides nucleiques apres avoir ete denaturees par le phenol).  [...] La digestion proteolytique (prot K par exemple) est parfois utilisee pour parfaire la purification en particulier des proteines interagissant fortement avec l'ADn, moi je n'ai jamais eu de probleme sans.  [...]

détection de l'epo?

Ensuite tu vas appliquer un fort champ électrique qui vas t'évaporer quasi instantanément le liquide dans lequel tu as ta molécule et tu vas obtenir tes protéines sous forme gazeuse...Il existe un autre système pour obtenir des protéines en phase gazeuse, c'est le MALDI (je ne me souviens plus de toutes les initiales), c'est un système différent avec une matrice organique qui piège tes protéine et un laser qui permet d'obtenir la phase gazeuse.  [...] Ce phénomène est occasionné par les modifications post-traductionnelles effactant la protéine lors de sa synthèse. Parmi ces copies certaines possèdent des charges nettes légèrement différentes et sont séparables les unes des autres par des techniques analytiques.  [...]

Solubilite des phospholipides

6. Centrifuger 15 minutes, 500 g. Récupérer la phase organique. Réextraction sur la phase aqueuse des lipides restant avec une solution Chloroforme/méthanol/NaCl (86/14/1, v/v/v).  [...] Attention, ce protocole marche très bien pour les tissus animaux, mais je ne l'ai jamais testé sur du tissu végétal. Ceci dit, contrairement à une extraction protéique, tu ne devrais pas te retrouver avec la paroi sur les bras, puisque ce qui t'intéresse est la phase organique.  [...]

[Biologie Moléculaire] ADN ARN extraction

bon,pour extraire l'ADN par exemple.aprés digestion des cellules par une solution de lyse pour faire sortir le matériel génétique,on fait la purification par le phénole,et on obtient deux phases.une organique qui contient tout les débris cellulaires puissque le phénole est un déproteinisant puissant et dans la phase liquide on trouve tout le matériel généitique qui n'a pas cette nature proteique (construit des bases nucléiques).  [...] Merci pour la réponse. On m'a dit qu'il y avait une histoire d'histones qui seraient plus ou moins attachées en fonction du pH, ce qui permettrai de rendre soluble ou non l'ADN en phase aqueuse car la présence d'histones favoriserait la solubilité en phase organique.  [...]

Un complexe anticorps-polymère pour isoler rapidement les cellules souches

L' isolation des cellules souches a lieu dans un tube à essai contenant deux phases insolubles, du polyéthylene-glycol pour la phase organique et du dextran pour la phase aqueuse. Le lot de cellules à trier et le complexe anticorps-polymère sont ajoutés au tube, et le tout est mélangé et chauffé.  [...] Le complexe adhère uniquement aux cellules souches et les entraine dans la phase organique supérieure, tandis que les autres types de cellules demeurent dans la phase aqueuse.  [...]

[Biologie Moléculaire] solubilité ADN, ARN dans le phénol

En revanche, pour l'extraction d'ADN avec du phénol basique, c'est pas vraiment clair. Des sites comme http.//www.chups.jussieu.fr/polys/bi...Y.Chp.7.3.html disent que l'ARN et l'ADN sont en phase aqueuse (mais dans ce cas, qu'est ce qui élimine l'arn) mais sinon, implicitement, on pense que l'ARN est dans la phase organique (d'où la purification différentiel des acides nucléiques en fonction du pH).  [...] Pour l'extraction des ARNs, le P/C/IAA doit être à pH acide (~5), ce qui va dénaturer l'ADN pour se retrouver dans la phase organique et pour ne trouver que les ARN dans la phase aqueuse.  [...]

[Biochimie] Les lipides

Ton truc la c'est juste un mélange de deux phases. une phase organique (huile) et une phase aqueuse (eau).  [...] eau+huile+noir soudan+ détergeant. le détergent crée des micelles qui permettent une émulsion d'huile dans l'eau, les lipide noires doivent apparaitre gris et bien homogènes dans la solution... On n'a plus deux phases mais une seule et les lipides en solution sous forme de micelles.  [...]