• Santé - Protéines, Contrôle, Promoteur

[Biologie Cellulaire] épissage alternatif et ARN polycistronique?

Bonjour je voulais savoir si il y avait un lien entre l'épissage alternatif et l'ARN polycistronique Il me semble que l'ARN polycistronique c'est chez les procaryotes et l'épissage chez les eucaryotes mais tout ça reste un peu flou.   [...] ARN polycistronique. plusieurs ARN codant plusieurs protéines sous le contrôle d'un seul promoteur (ça fait un pack, tout en même temps).  [...]

Différence shARN, miARN et siARN

L'ARN polymérase 3 c'est juste si on veut qu'il soit transcrit tout le temps si j'ai bien compris, sans contrôle spatial/temporel à l'aide d'un promoteur.  [...] promoteur de pol II = expression régulée (transcrit en même temps qu'une autre protéine donnée) + contrôle spatial possible.  [...]

[Biologie Cellulaire] CSM et pcdan 3

Je commence un nouveau stage depuis peu et le labo travaille sur des cellules souches mésenchymateuses. Une manip consiste à les transfecter stablement avec le plasmide pcdna3 ou pcdna3.1 afin d'exprimer stablement une protéine (donc sous contrôle du promoteur fort CMV).  [...] Le soucis est qu'ils ont pu remarqué depuis quelque temps l'expression du gène tend à diminuer au bout d'un moment, et que donc l'expression constitutive ne l'est plus tant que ça.   [...]

[Biologie Moléculaire] Initiation de la transcription

Car les ARN Pol eucaryote contrairement à l'ARN Pol procaryote requière la présence de protéines matrice supplémentaire avant qu'elle soit prête à se fixer au promoteur et initier la transcription.  [...] En tous cas, on ne m'a jamais parler d'exception. L'absence de certains facteurs généraux, ou protéines du complexe médiateur ne suffit peut-être pas à arrêter totalement toute transcription. mais pour moi, il est clair que si aucun n'est en présence, il n'y aura aucune transcription (par exemple, la phosphorylation de la pol nécessaire à l'initiation et au capping se fait par un facteur TF).  [...]

[Microbiologie] Yeast Two Hybrid System

Pour l'étude de l'interaction entre deux protéines bactériennes, j'aimerai réaliser des expériences de double hybride en levure (Y2H). Mon probléme, c'est que j'ai des difficultés a faire pousser mes cellules (Saccharomyces cerevisiae AH109) sur milieu solide YPAD, je n'arrive a obtenir que de miniscules colonies (des points) aprés 4 jours, je pense donc que ce sont des contaminants.  [...] BOn j'y connais rien aux levures et pas trop aux systemes hybrides, mais j'imagine que tu peux aussi bien faire le 2hybrid system dans milieu liquide non tu design le truc pour que l'intéraction des 2 protéine lève la répression d'une promoteur qui controle un gene de resistance ou truc du genre.  [...]

mon grand-père est trop fort pour moi

Ta réponse n'est pas bête, je dirai qu'en fait on séquence les gènes entiers (cela implique les promoteurs) et non pas les ORF(=CDS=séquences codantes).  [...] Oula la définition d'un gène. un gène est une séquence d'ADN qui détermine la séquence ( code )d'une ou plusieurs protéines et les modalités de son expression (je fais réference au promoteur). Cette définition a des contre-exemples (protéines codées par 2 gènes, gènes d'ARNr qui ne codent donc pas des gènes) et trouvent surement d'autres limites donc oui la définition de ton grand-père est réductrice.  [...]

Mesure de la température chez la souris in vivo

J'avais vu passer un papier dans lequel les auteurs avaient developpé un modèle animal pour l'imagerie optique. L'expression de la sonde d'imagerie (je ne sais plus si c'est de la fluo ou de la bioluminescence) était sous contrôle du promoteur d'HSP70, une protéine de réponse au stress cellulaire (notamment induit par un choc thermique).  [...] C'est comme çà que l'on a initialement mis en évidence Hsp70 (d'où sont nom.). On a élevé la température de cellules en cultures, et on a regardé qu'elles étaient les protéines qui étaient surexprimées. Il faudrait retrouver les papiers pour avoir les valeurs.  [...]

[Biologie Moléculaire] Exprimer une protéine fonctionnelle en plasmide

Mais seul le cDNA suffit à exprimer la protéine nan En considérant biensur que le promoteur soit déjà dans le plasmide Parce que en fait je ne comprends pas bien l'histoire de l'intron avant l'ATG.  [...] Il ne veut pas l'exprimer dans une bactérie puisqu'il précise qu'il clone son gene sous control du promoteur CMV qui est un promoteur viral eucaryote.  [...]

Expression d'un transgène

Si on veut exprimer un transgène uniquement dans un type cellulaire d'un organisme il faut le mettre sous le contrôle du promoteur d'un gène exprimé uniquement dans ce type cellulaire.  [...] Il doit exister des systèmes où tu exprimes un facteur de transcription sous contrôle de ton promoteur tissu spécifique, et ensuite ce facteur de transcription avec son propre promoteur s'occupe de ta protéine.  [...]

[Biologie Moléculaire] Regulation des gènes chez les eucaryotes

Pourrais-tu préciser ce passage Je n'ai jamais entendu parler d'un promoteur compacté Ni de protéine épigénétiques (je pinaille peut-être ). de la régulation épigénétique, oui, des protéines dont l'action résulte en ça, oui aussi, mais that's all.  [...] Je ne sais pas si il y a lieu de pinailler pourtant. Parler de promoteur compacté ne me semble même pas si abusif que cela. Le terme renvoie bien au rôle des histones (méthylation par exemple) et l'idée de condensation de la chromatine empêchant l'accessibilité au promoteur des protéines promouvant la transcription.  [...]