• Santé - Protéines, Anticorps, Question

[Immunologie] Synthèse d'anticorps

Ce passage n'est pas très clair. Dans ce cas précis, les protéines dont tu parles sont les anticorps en question. Tu réessayes de nous expliquer ça plus clairement.  [...] Cependant, comme les réarrangements sont différents, les séquences en acides aminés le sont aussi, donc les protéines ainsi codées sont différentes, ce qui est visible sur la partie variable de la chaine lourde et légère de l'anticorps, ces parties variables définissetn sa spécificité.  [...]

[Biologie Moléculaire] Immunoprécipitation

J'ai une question concernant l'électrophorèse et l'immunoprécipitation. Pendant mon stage j'ai effectué d'abord une lyse cellulaire ensuite une séparation des protéines par électrophorèse et puis un western blot pour identifier la protéine recherchée. Une autre fois, pour la même protéine, j'ai fait l'immunoprécipitation puis le reste jusqu'au western blot.  [...] Alors ma question c'est, pourquoi on fait l'immunoprécipitation qui est une méthode beaucoup plus longue et où on peut avoir des interférences avec des chaînes légères (peut être parce que seule protéines est présente sur la membrane) et peut être aussi parce que avec une électrophorèse sur les protéines totales il peut y avoir des interactions aspécifiques protéine-anticorps.  [...]

[Biologie Moléculaire] Mutations et Southern Blot

Question 1. on fait un southern. cette méthode est elle adaptée pour tous les types de mutation Quelle serai l'expérience la plus adaptée.  [...] Question 1. Connais-tu la technique Southern Que faut-il pour qu'elle fonctionne que permet t'elle d'identifier Essaie de formuler ce qui te pose problème, c'est comme cela que l'on (= toi et nous) trouve les réponses.  [...]

[Biologie Moléculaire] structure des protéines

Ici l'anticorps anti-proinsuline va réagir avec les protéines de proinsuline. On va donc par la suite pouvoir examiner la quantité ou les caractéristiques physiques de la protéine. On élimine ensuite les protéines qui ne sont pas liées à l'anticorps anti-proinsuline pour ne garder que les protéines de proinsuline.  [...] Par contres elles ont été immunoprécipitées par des anticorps anti-proinsuline, donc ces protéines possèdent le même épitope que la proinsuline, elles en sont donc très proches. Ce seraient donc des protéines de pré-proinsuline, ce qui collerait car leur PM est plus élevé.  [...]

[Biochimie] Etude des partenaires protéiques : Co-Immunoprécipitation, Tap-Tag et double hybride

Et je me posais la question de savoir quel type d'anticorps fallait-il utiliser pour la Co-Ip Un anticorps poly ou monoclonal Si j'utilise un anticorps polyclonal, il risque de se fixer un peu partout sur ma protéine et je risque d'empêcher les interactions.  [...] co-immunoprécipitation. technique in vivo donc c'est bien, il y a le problème des anticorps qui peuvent en effet prendre un site de fixation d'un partenaire de la protéine.  [...]

[Biochimie] Epigénome et immunoprécipitation

L'immunoprécipitation est une méthode utilisée pour étudier les séquences de DNA auquelles se lient les protéines. Pour ce faire on utilise du formaldéhyde qui gele les molécules, le liquide va fusionner de manière covalente les protéines au DNA. On va lyser les cellules et récupérer le DNA puis le fragmenter.  [...] Ha oui en effet. en fait les anticorps interviennent dans cette technique pour récupérer le DNA sur lequel sont fixées les protéines. On ligue des anticorps spécifiques de ces protéines (ici spécifique des histones modifiées sur leur queue aminoterminale) les anticorps sont eux même liés à des molécules de Sépharose, ce qui permet de récupérer le tout par centrifugation/précipitation.  [...]

[Biologie Cellulaire] Co-Immunoprécipitation

on fait une électrophorèse en conditions dénaturantes (et là j'ai écrit excès d'anticorps je sais pas pourquoi. C'est quoi des conditions dénaturantes pour un complexe protéines-anticorps ).  [...] 5. Tu rajoutes un tampon dénaturant (SDS et b-mercaptoethanol), qui va dissocier et dénaturer les anticorps, libérant ainsi les protéines A et B.  [...]

Interaction entrée viral protéine cellulaire

Salut, je te remerci de ta réponse et c'est déjà ce que je pensais mais je doutais, par contre la 1iere D doit etre fait dans des conditions dénaturante comme le BN-Page. Et apres il faut que je vérifie si la ou les protéines identifiés servent dans l'infection virale.  [...] Quitte a synthetiser une proteine recombinante autant faire un pull-down avec une fusion GST-proteine X. Si tu utilises une etape anticorps, ne pas oublier de cross-linker l'anticorps avant l'IP... Un autre detail, identifier des proteines membranaires par mass spec n'est pas une partie de plaisir.  [...]

anticorps

De plus, les personnes allergiques produisent des anticorps qui reconnaissent une protéine du polen par exemple. Cela veut dire que tous les hommes possedent dans leur génome un gène codant pour un anticorps reconnaissant cette protéine. Pourquoi ce gène s'exprime - t - il chez les allergiques et pas chez les autres Et pourquoi ce gène a - t -il était conservé au cours de l'évolution.  [...] Il y a un mécanisme particulier d'édition au niveau des deux gènes permettant de coder pour les anticorps avec des protéines chargées de faire muter dans chaque lymphocyte B le gène en question. cela s'appelle dans ces gènes des régions hypervariables.  [...]

[Biochimie] lyse cellulaire

je vais faire un western blot avec le sérum contenant les anticorps après infection d'un animal et par là je détermine les protéines immunogènes.  [...] Si vous faites un western blot avec un pool d'anticorps dirigés contre des antigènes du parasite, votre expérience sera spécifique de ces antigènes là. Les antigènes de l'hôte ne seront pas détectés vu que les anticorps proviennent de l'hôte en question (sinon ce seraient des anticorps auto-immuns).  [...]