• Santé - Protéines, Anticorps, Intérêt

Définition | Microscopie de super-résolution dynamique | Futura Santé

Le microscope de super-résolution est une nouvelle génération de microscopes, appelés nanoscopes. La microscopie de super-résolution dynamique fait partie des techniques de microscopie de super-résolution, avec les techniques.   [...] Il est possible de suivre un mouvement moléculaire, grâce à l'utilisation d' anticorps fluorescents dirigés contre des protéines d'intérêt. S'ils sont assez dilués, les anticorps ne vont marquer que quelques protéines isolées, et il sera alors possible de les suivre à une vitesse de 20 images par seconde.  [...]

[Biologie Moléculaire] Techniques de transfert

La technique utilise l'électrophorèse sur gel de polyacrylamide pour séparer les protéines, préalablement dénaturées, selon leur masse. Les protéines sont ensuite transférées depuis le gel sur une membrane (typiquement en nitrocellulose), où elles sont exposées à un anticorps spécifique de la protéine d'intérêt.  [...] Il est possible grâce à cette technique de détecter la présence d'une protéine dans un tissu, d'évaluer sa taille, sa concentration, les variations de cette concentration, effectuer des comparaisons de concentrations entre différents groupes, etc.  [...]

[Biologie Cellulaire] Expression des protéines

1. Quand les cellules commencent à exprimer les protéines dans un milieu de culture ( surtout les protéines mitochondriales et celles de la matrice extracellulaire pour les myotubes, lignée C2C12 ) je crois après 48h mais je voudrai confirmer cette infromation.  [...] En fait ce que je pense à faire est. une inhibition exogène par un anticorps dans un premier lieu et une induction exogène par une protéine recombinante pour voir les variations de mes protéines d'intérêt ( mitochondriales + MEC).  [...]

[Biologie Cellulaire] Co-Immunoprécipitation

on fait une électrophorèse en conditions dénaturantes (et là j'ai écrit excès d'anticorps je sais pas pourquoi. C'est quoi des conditions dénaturantes pour un complexe protéines-anticorps ).  [...] 5. Tu rajoutes un tampon dénaturant (SDS et b-mercaptoethanol), qui va dissocier et dénaturer les anticorps, libérant ainsi les protéines A et B.  [...]

[Biologie Moléculaire] Extraction protéines pariétales

Dans le but de faire un western-blot avec un anticorps (polyclonal) je me lance dans des extractions de protéines. Seulement (pas de bol) ma protéine d'intéret est ancrée dans le peptidoglycane de ma bestiole de façon covalente (motif LPXTG). Pour info je bosse sur une bactérie G+ qui a la mauvaise idée de résister au lysozyme.  [...] Sinon euh... je sais que moi j'extrait mes protéines par variation du pH en connaissant le pHi de mes molécules d'intéret (ph9 en récupérant le surnageant puis précipitation à pH 4,5 mais je ne sais pas si ça pourrait t'être utile).  [...]

Paludisme : une démarche innovante pour le développement d'un vaccin

En partant du constat que les réponses immunitaires provoquées par le parasite Plasmodium falciparum sont extrêmement spécifiques de son hôte naturel, l'homme, les chercheurs de l'Institut Pasteur ont suivi une démarche originale. ils ont recherché directement chez des individus ayant développé une réponse immunitaire protectrice contre le parasite quelles protéines avaient déclenché cette réponse.  [...] En étudiant les protéines parasitaires reconnues par le sérum de sujets prémunis, vivant en zone d'endémie en Afrique et en Asie, les chercheurs ont pu mettre en évidence l'intérêt d'un nouvel antigène, dénommé MSP3. Il existe en effet une très forte corrélation entre la présence d'anticorps dirigés contre cet antigène et la protection acquise par exposition naturelle à l'infection.  [...]

Des nanorobots d'ADN pour des thérapies anticancéreuses plus ciblées

Dans cette expérience, le nanorobot adopte plus ou moins la forme d'un tonneau contenant en son centre la molécule d'intérêt, un médicament. À l'une de ses extrémités, il possède deux anticorps complémentaires de protéines présentes sur la membrane de cellules malades.  [...] Le nanorobot se compose de deux demi-tonneaux imbriqués l'un dans l'autre avec au milieu, le médicament (en rose). Lorsque la partie proéminente, les anticorps, se lie à des protéines, la structure s'ouvre et le principe actif est délivré directement à sa cible. Wyss Institute, Viméo.  [...]

[Biologie Cellulaire] Notion de contrôles, contrôles isotypiques, culture cellulaire

Pour moi, il s'agit d'un contrôle permettant la vérification de l'absence de fixation non spécifique d'un anticorps, que l'on effectue en incubant une IgG dirigée contre une protéine jamais exprimée dans la cellule qui nous intéresse. Ainsi, on vérifie l'absence de fixation non spécifique et donc la spécificité du marquage effectué avec l'anticorps dirigé contre la protéine que l'on veut localiser.  [...] Bah si l'anticorps qui cible votre protéine d'intérêt est un IgM, l'anticorps contrôle doit être un IgM. Si il s'agit d'un IgG, le contrôle doit être un IgG.  [...]

Co-immunoprécipitation: à quoi sert le flowthrough?

Bonjour, j'ai récemment effectué un stage où j'ai fais une co-immunoprécipitation avec des billes magnétiques, sur des cellules lysées. Avant d'éluer les complexes billes -anticorps-antigènes, on a placé les tubes sur le support aimanté pour récupérer le surnageant que mon maître de stage a appelé flow through.  [...] Le flow through est censé ne contenir que les autres protéines cellulaires dont je n'ai pas besoin Si la co-pi a fonctionné je ne devrais rien avoir dessus au WB (ou montrerait les restes de protéines d'intérêt n'ayant pas lié) Cela sert à savoir si la liaison entre l'anticorps et la protéine est bonne ou mauvaise.  [...]

[Biochimie] Différence entre tween, triton x, NP ... ?

Voilà, je voudrai utiliser un detergent non ioniques (le moins dénaturant possible pour mes protéines) pour diminuer les adsorptions non specifiques d'anticorps ou autre protéines d'interet sur un test qui se rappoche de l'ELISA.  [...] Dans ton contexte (des cupules normalement en ELISA) tu prendrais un risque de conserver des agrégats et (1) de conserver des saloperies dans tes puits qui génereraient du bruit de fond en liguant les anticorps (2) de fausser tes DO du simple fait de leur présence.  [...]