• Santé - Protéine, Quantité, Cellules

[Biologie Cellulaire] ultracentrifugation et cellules!

je voudrais réaliser des ultracentrifugations différentielles afin de déterminer la localisation d'une protéine spécifique qui m'intéresse. mais au lieu de le faire sur tissu, j'aimerais le faire à partir de culture de HEK. Auriez vous une idée du nombre de cellules dont j'ai besoin pour avoir au final une quantité de proteine suffisante pour faire des western.  [...] Tout dépend du compartiment cellulaire que tu veux isoler, de la représentation de ta protéine dans ce compartiment...Donc c'est par l'expérience que tu sauras quelle quantité de cellule te permet d'avoir une bande convenable en western. Pour commencer tu peux essayer plusieurs conditions où tu auras mis un nombre croissant de cellules.  [...]

[Biologie Cellulaire] Etudier l'expression d'une protéine entre différentes cellules.

J'aimerai savoir si quelqu'un aurai un conseil quand à une technique permettant d'approcher au niveau d'une seule cellule l'expression d'une protéine, afin de pouvoir comparer par exemple, des cellules en périphérie de la culture (plus grosses, densité plus faible) à des cellules centrales (petites et denses).  [...] pour suivre l'expression de la protéine tu peux faire un extraction purification de la proteine dans les deux cellules séparément puis tu fait un blotting ( westerne blot pour suivre le niveau d'expression de la protéine c'est-à-dire la quantité de la protéine dans les deux cellules).  [...]

[Biochimie] Comment lire et interpréter un Immunoblot ?

L'actine est, bien entendu, une protéine ubiquitaire dont on estime que les différents traitements appliqués aux cellules ne vont pas modifier la concentration. Ainsi, on s'en sert pour certifier que l'on a bien déposer la même quantité globale de protéine dans les deux puits (contrôle et expérimental).  [...] Concernant la quantité de PCNA j'avoue que là aussi je ne sais pas. Nous savons juste par l'énoncé que c'est une protéine chez l'humain qui est ubiquitiné quand il y a un stress. Peut-être que ces cellules contiennent naturellement autant de PCNA...car je ne pense pas qu'ils en ait rajouté dans les cellules.  [...]

Angiogenèse : bloquer le développement des tumeurs ou traiter l'infarctus

En revanche, des anomalies du développement des vaisseaux à l'âge adulte sont responsables de maladies très fréquentes comme l' insuffisance cardiaque après infarctus en cas de défaut de vascularisation. Par ailleurs, le détournement de la formation de nouveaux vaisseaux permet, quant à lui, aux tumeurs de continuer à croître.  [...] La lactadhérine est une protéine de surface sécrétée par les cellules mammaires sur les globules lipidiques du lait, mais aussi présente sur les exosomes. Cette protéine est en outre présente en grande quantité dans certaines tumeurs.  [...]

La protéine du cancer du sein, BRCA2, est enfin purifiée

Mais la purification d'une protéine est un chemin semé d'embûches. Chaque étape peut vite devenir un problème. le clonage du gène, l'expression de la protéine dans des cellules (spécialement modifiées pour sécréter en grande quantité le produit du gène inséré), la séparation de la protéine de tous les autres constituants de la cellule, sa solubilisation.  [...] Une des trois équipes (de l' Université de Californie, Davis ) a extrait la protéine à partir de cellules épithéliales de rein humaines. Les chercheurs de l' UC Davis Cancer Center ont, quant à eux, purifié la protéine à partir de cellules de levure. La troisième équipe, basée au Cancer Research UK à Londres, a préféré utiliser des cellules épithéliales cancéreuses.  [...]

Cancer du sein : on pourrait mieux mesurer les risques

Quatre images de cellules tumorales au sein d'un tissu normal. En haut, deux colorants, verts tous les deux, marquent, à gauche, la protéine H1 alpha et, à droite, les cellules tumorales. On remarque que les formes colorées coïncident. la protéine HP1 alpha est présente en plus grande quantité dans les tumeurs.  [...] L'équipe de Geneviève Almouzni vient de mettre en évidence trois indices forts qui font de HP1 alpha un indicateur de premier ordre de la probabilité d'apparition de tumeurs et de métastases. Tout d'abord, ces biologistes montrent que la quantité de cette protéine est nettement plus grande dans les cellules tumorales que dans les cellules normales.  [...]

Mucoviscidose : la découverte de cellules pulmonaires donne de l'espoir

Des chercheurs de Harvard ont découvert de nouvelles cellules, les ionocytes pulmonaires. Alors que celles-ci ne représentent que 1 % des cellules des poumons, elles expriment une quantité élevée de CFTR, la protéine mutée chez les patients atteints de mucoviscidose.  [...] Les chercheurs ont ainsi trouvé un nouveau type cellulaire qui exprimait des niveaux particulièrement élevés de CFTR, plus hauts qu'aucune autre cellule. CFTR code pour une protéine impliquée dans le transport des ions chlorure à travers la membrane plasmique de cellules des muqueuses.  [...]

[Biologie Cellulaire] Polyribosomes

Car on dit qu'une cellule eucaryote est monocistronique donc qu'un ARNm code pour une seule protéine. Mais si plusieurs ribosomes viennent se fixer sur le même ARNm, il va y avoir la synthèse de plusieurs protéines différentes non.  [...] Le polysome est formeé dans les cellules eucaryotes pour produire une quantité suffisante de la même protéine dans un moins de temps.  [...]

Interaction cellule/virus

je sais que ce virus passe par plusieurs étapes d'attachement / fixation à la surface de la cellule hote avant de pénétrer dedans. de mémoire, il me semble qu'il y a l'intervention de plusieurs intégrines puis ensuite d'une protéine chaperone Hsc70.  [...] SI ta protéine est bien un partenaire de gB et qu'elle est présente en quantité correcte à la surface des cellules, il n'y a aucune chance que le virus se décroche de ta cellule. Le virus ne porte pas une, mais plusieurs dizaines ou centaines de gB, dont un grand nombre vont se lier à cette protéine.  [...]

extraction et dosage des protéines totales

Je voudrais savoir quelle quantité de protéine on peut s'attendre à obtenir après extraction à partir de neurones. 1µg/million de cellules 1mg/million de cellules.  [...] J'ai lu plusieurs thèse où, après culture cellulaire, il faisait une extraction sur un échantillon de 1 000 000 de cellules (c'est courant j'ai l'impression) puis un dosage pour savoir la bonne quantité à déposer sur des gels de western-blot.  [...]