• Santé - Protéine, Paramètres, Technique

[Biochimie] séquençage d'une proteine

voila dans l'article les auteurs ont procéder à une digestion enzymatique d'une protéine par la trypsine et par la Asp N. Ensuite ils ont fait une analyse des peptides par HPLC couplé à un spectromètre de masse en tandem. Ce que j'ai pas compris c'est comment en premier temps on identifie les acides aminé sur le profil d'élution de HPLC et comment on determine l'ordre de chaque acide aminé cad comment savoir que c'est une tyrosine et non une lysine ou cysteine et comment on détermine qu'il ya une tyrosine ensuite une methionine ensuite une leucine dans notre peptide.  [...] D'abord, la technique utilisée dépendra grandement de ce que tu veux faire. S'agit-il de l'identification d'une protéine inconnue que tu as réussi à purifier, d'un mélange complexe de protéines, de l'étude des modifications post-translationelles Bref, il existe beaucoup d'applications à cette technique, et à chaque application, tu choisiras d'appliquer certains paramètres et tu devras faire des choix.  [...]

[Biochimie] retard sur gel

Pensez vous qu'il y a une interaction directe La nature des échantillons par exemple est très critique. protéine recombinante pure, extrait enrichi, extrait total, etc.  [...] effectivement, je vois bien mes oligos marqués qui migre à la mm vitesse en présence et en absence de ma protéine et je pense que je dois vérifier certains paramètres de ma technique.  [...]

[Biochimie] probleme de migration electrophorèse

Vous avez réalisé une électrophorèse des protéines sériques et vous obtenez après coloration une migration trop courte et des fractions mal séparées. Quels paramètres allez vous modifier pour améliorer la technique.  [...] . concernant le pH du tampon, je sais pas trop si on peut le modifier parce que normalement il me semble qu'une électrophorèse des protéines sériques doit se faire à pH 8.6. Et si on le peut, pour déterminer s'il faut l'augmenter ou le diminuer, il me parait nécessaire de connaitre le pHi des protéines, non.  [...]

L'ezrine, pilier de l'architecture cellulaire | Dossier

Sylvie Coscoy, dans l'équipe de François Amblard à l'Institut Curie (2), en collaboration avec l'équipe de Daniel Louvard (3) et celle de Paul Mangeat (4), étudie cette protéine au fonctionnement encore mal connu et utilisent de toutes nouvelles techniques d'imagerie très sophistiquées pour plonger au coeur de l'architecture cellulaire.  [...] Par ailleurs, ces résultats montrent également toute la pertinence de la technique utilisée par les chercheurs pour étudier la localisation et la mobilité des protéines, des paramètres préoccupant de plus en plus les biologistes au vu du rôle important qu'ils jouent sur les fonctions protéiques.  [...]

[Génétique] Perte de la transformation d'une cellule cancéreuse.

Je viens de décongeler une lignée de cellules cancéreuse censée sur-exprimer une protéine donnée. Or, après qPCR, la protéine est normalement exprimée. Il y a un an, cette lignée sur-exprimait bien la protéine mais plus maintenant. J'ai re-testé mon couple d'amorces, ainsi que d'autres paramètres.  [...] Techniquement, la lignée a été congelée et décongelée peu de fois (2 à 3 fois maxi). Niveau repiquage j'étais à P6 (6 passages). On ne peut pas parler de lignée fraîche. Pourquoi le fait de décongeler ou repiquer aurait pu faire perdre l'expression de ma molécule à mes lignées.  [...]

[Biochimie] Phasage

Es-que qqn peut m'expliquer brièvement les techniques suivantes utilisées lors du phasage en cristallographie de macromolécules biologiques.  [...] Remplacement isomorphe. On va jouer sur la différence de diffusion entre un cristal de notre protéine seule et un cristal de protéine contenant un atome lourd (riche en électrons car les RX interagissent avec les électrons). Cette atome lourd ne doit pas modifier le cristal (paramètres de maille, groupe espace, repliement de la protéine.  [...]

[Biologie Cellulaire] La cellule mystère.... - Page 12

coco, (si tu ne sais vraiment pas ce que c'est) le peignage moléculaire de l'adn est en gros une technique permettant d'obtenir des fragments linéaires et parallèles d'adn pour faciliter leur étude. On fixe l'un des bouts sur une lame spéciale puis l'on retire le liquide.  [...] Grâce à cette technique on peut mesurer tout un tas de paramètres comme la vitesse de réplication, la distance moyenne entre deux origines de réplication (densité des fourches de réplication),  [...]

Cerveau d'Homme et cerveau de singe : de si petites différences...

Qu'est ce qui fait la différence entre un Homme et un macaque D'après une étude récente, pas grand-chose. En comparant les cerveaux de ces deux espèces, des chercheurs britanniques ont été surpris d'observer une très grande similarité dans la région qui contrôle les tâches intellectuelles supérieures comme le langage et la prise de décision.   [...] À leur grande surprise, ils ont découvert que ces deux paramètres étaient très similaires chez l'Homme et le macaque. Cependant, il est possible que la technique d'imagerie utilisée ne soit pas assez performante pour mettre en évidence des différences très subtiles.  [...]

[Biotechnologie] cytométrie de flux/épifluorescence

la cytometrie de flux est une technique qui permet de détecter la taille, la granulosité d'une cellule ainsi que la fluorescence de protéines cellulaires (protéines fluorescentes comme la GFP ou marquées avec un anticorps couplé à un fluorochrome) ou de l'ADN (ex intercalant fluorescent de l'ADN).  [...] cette technique est réalisée sur un cytomètre qui n'est pas du tout un microscope. dans cet appareil, les cellules sont aspirées et passent une par une, elles vont être excitées avec des faisceaux lasers pour détecter les différents paramètres.  [...]

[Biologie Cellulaire] [Biologie medicale]Achat d'un microscope pour observer des spermatozoides.

) etc...C'est un métier qui requiert de la pratique et un coup d'oeil qui ne se forme qu'avec l'expérience. on ne laisse jamais un technicien de labo inexpérimenté rendre sans vérification des résultats de spermogramme. Ca ne s'improvise pas sur un coin de table de cuisine après avoir lu deux/trois liens trouvés sur Google.  [...] Et même tous paramètres pris en compte, le spermogramme a des limites bien expliquées ici. http.//www.lesjta.com/article.phpar_id=185 ( par la même occasion la technique de l'examen est bien expliquée, vous comprendrez mieux que ce n'est pas du tout à votre portée).  [...]