• Santé - Protéine, Migration, Fonction

Recepteur à l'insuline en SDS PAGE

Voila comment, si mes souvenirs sont exact, l'électrophorèse avec SDS permet de faire migrer chaque protéine en fonction de son poids moléculaire...car celui ci est fonction de la taille du baton que forme la protéine en présence de SDS,et donc du rayon de stocke auquel celà correspond (*gros doute.*).  [...] Et donc, selon la distance de migration pour un type de gel donné sera associé à un rayon de Stock théorique...proportionnel à la taille de la protéine complexée par les molécules de SDS, et donc, proportionnel au poids moléculaire.  [...]

[biologie moléculaire] Identification d'une molécule

Il a raison de parler de protéine car les expériences qui ont été faites après l'identification de la phosphatidylsérine sont typiques d'une analyse de protéine. En effet, s'il n'y avait que des lipides, où serait l'intérêt de traiter avec un agent réducteur des ponts disulfures et de faire migrer sur électrophorèse.  [...] Pour l'identification, regarde si on te donne une échelle de PM ce qui te permettrais de lire le PM de chaque proteine en fonction de la distance de migration. Souvent, le 1er et le dernier puit servent à cela.  [...]

[Biologie Moléculaire] western blot / proteine hrp

En fait ce que je voulais savoir c'est s'il est possible de faire migrer sur gel une proteine couplée à la peroxydase puis de la transferer sur membrane et cela en condition non dénaturante pour que la peroxydase après avoir été blottée puisse encore réagir.  [...] A priori si tu es non dénaturant tu dois conserver la structure et la fonction de la péroxydase donc j'aurai tendance à dire que c'est possible tout en sachant que la migration et le transfert vont certainement quand même abimer ta protéine. Il faut essayer... tu me tiens au courant.  [...]

Matériels et méthodes | Dossier

Ceci entraîne la suppression des structures secondaires, tertiaires et quaternaires des protéines permettant ainsi une fixation du SDS sur ces protéines et donc de les charger négativement (transformation en anions). La migration électrophorétique ne se fera donc plus qu'en fonction de la masse moléculaire de chaque protéine, étant donné que chacune possède maintenant la même charge.  [...] Dans chaque puits il est déposé l'équivalent de 130 µg de protéines soit 90 µl de la fraction membranaire et 100 µl de la fraction cytoplasmique. La migration électrophorétique se fait à 50 V et pour une durée d'environ 15 heures, en fait c'est le front de migration formé par le bleu de bromophénol qui indique le moment où l'électrophorèse doit être arrêtée.  [...]

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La migration électrophorétique ne se fera donc plus qu'en fonction de la masse moléculaire de chaque protéine, étant donné que chacune possède maintenant la même charge. L'électrophorèse a pour but de séparer les protéines sur un gel de polyacrylamide, ensuite ce gel est mis en contact avec une membrane de nitrocellulose et un courant allant du gel vers la membrane ce qui permet de fixer les protéines contenues dans le gel sur cette membrane.  [...] Dans chaque puits, il est déposé l'équivalent de 130 µg de protéines soit 110 µl de la suspension. La migration électrophorétique se fait à 50 V et pour une durée d'environ 15 heures, en fait c'est le front de migration formé par le bleu de bromophénol qui indique le moment où l'électrophorèse doit être arrêtée.  [...]

[Biochimie] migration des AA proline glutamine

Je me demande si quelqu'un connait l'influence des acides aminés proline et glutamine sur la migration de protéine en condition dénaturante.  [...] Sinon, pour en revenir à ta question, ton résultat ne m'étonne pas trop en fait. La migration en WB SDS PAGE a lieu du fait de l'association de SDS (chargé -) à la protéine. Habituellement, on considère que le nombre de SDS associés à une proteine est fonction uniquement de sa taille mais vu la très faible diversité d'aa contenue dans ta prot, il n'est pas choquant qu'elle ne se comporte pas de la même façon que le marqueur de taille.  [...]

[Génétique] Génotype Phénotype souris électrophorèse

On purifie de l'amylase salivaire parfaitement fonctionnelle de chaque souris que l'on dépose sur un gel d'électrophorèse.  [...] Après application d'un champ électrique, les molécules migrent et sont séparées en fonction de leur taille, et de leur charge. Un colorant révélant les protéines permet de mettre en évidence 3 molécules différentes. La forme L à migration lente, la forme R à migration rapide et la forme M à migration intermédiaire.  [...]

Electrophorèse acétate de cellulose

En l'occurrence justement, quel serait le sens de migration des protéines à un pH de 8 (pH du TAE), sont-elles chargées positivement ou négativement (je suppose que cela peut varier en fonction des protéines).  [...] Du coup, la migration se ferait à la fois selon la taille et la charge des protéines Ou, si l'on considère que leur charge est la même, uniquement en fonction de leur taille.  [...]

[Biochimie] Modifications post traductionnelles et électrophorèse !

Le shift de phosphorylation est du à l'encombrement stérique du phosphate qui perturbe et retarde la migration de la protéine modifiée, dans le gel.  [...] Juste pour une grosse proteine, nous on utilise des gels precoules 4-12%. En migrant avec du tampon MOPS. Apres une heure de migration, mes proteines a 250 kD sont environ a 2 cm des puits (le gel fait 7 cm...) donc c'est tres bien.  [...]

Petit secret des migrations cellulaires au sein de notre corps

Leurs résultats ont confirmé leur hypothèse. En effet, leur étude publiée dans la revue Developmental cell pointe l'action essentielle d'une nouvelle protéine dans la migration cellulaire.  [...] Grâce à des techniques de microscopie électronique, ils ont montré que la présence d'Exo70 induisait la formation de petites avancées sur la membrane, qui se remplissaient ensuite d'actine. Pour vérifier cette hypothèse, les scientifiques ont alors fait muté la protéine Exo70, de sorte qu'elle ne puisse plus former ces protrusions membranaires.  [...]