• Santé - Protéine, Contrôle, Positif

[Biochimie] Complexe Hypotalamo hypophysaire

voila mon problème, les cellule de Sertoli s'écrête une hormone que l'on appelle l'inibine celle ci exerce un rétro controle négatif au niveau de l'hypotalamus est plus précissement au niveau des neurones qui s'ecrete une proteine appellé GnRH. Cependant on dit que quand le taux d'inibine et faible il y à une déficience de la spermatogénese il y à alors rétro controle négatif mais pourquoi NEGATIF et pas positif puisque le taux de GnRH doit augmenter tout comme la FSH pour donc stimuler la spermatogenèse.  [...] d'accord merci. c'est pour cela donc que l'on ne parle pas de rétro controle positif chez l'homme. Les cellules de Sertoli fabrique également un proteine l ABP je ne comprend pas sont role.  [...]

[Biochimie] Expression protéique

La protéine est détectée par Western blot et le contrôle positif est correcte. A quel niveau sont sensé agir les régions régulatrices Lors de la traduction N'est ce pas un peu tard une fois que les ARNs sont synthétisés.  [...] L'ARN semble suffisamment exprimé puisqu'il est détecté assez clairement avec 30 cycles d'amplification. Sur WB j'obtiens deux bandes de tailles différentes pour mon contrôle positif mais seulement une bande très très haute dans le gel (très grosse protéine) comparé aux autres dans le reste de mes conditions.  [...]

CDK-cyclines

Cdk-G1 va ensuite phosphoryler la protéine Rb ce qui va avoir pour effet de l'inactiver. Lorsque Rb n'est pas phosphorylée (donc active), elle inactive la protéine E2F donc l'action de Cdk-G1 permet d'activer E2F.  [...] Lorsque la cellule a bien répliqué son ADN elle passe en G2 puis la cellule rentre en phase M. La Cdk-M prépare alors la cellule pour l'anaphase. elle phosphoryle les lamines pour rompre l'enveloppe nucléaire, elle phosphoryle les condensines et les cohésines pour condenser les chromosomes puis elle phosphoryle les protéines régulatrices des microtubules ce qui permet aux chromosomes de s'aligner correctement sur la plaque équatoriale.  [...]

[Biologie Cellulaire] Western Blot ATM phosphorylé

A la révélation, je n'ai aucune bande ou au contraire quelque fois j'ai des bandes intéressantes mais qui ne correspondent pas à la taille de la protéine (250kDa). (L'anticorps utilisé est celui qui est le plus abondant dans les publications).  [...] Il faut aussi être sur que la protéine rentre dans le gel au moment de la migration, tu devrais essayer si ce n'est pas déjà fait un gel moins concentré (genre 7% mais c'est de la vraie morve).  [...]

Immunohistochimie

es tu certaine que ton Ig 1 est bien spécifique T'as essayé de faire un western blot, juste pour voir si il reconnait bien la bonne proteine.  [...] C'est de la paraffine. Concernant l'Ig1, oui il reconnait bien la bonne protéine, mon positif est bien positif. Par contre je viens de l'acheter donc je sais pas si il est super spécifique, je fais encore la mise au point, et dans la biblio ils n'ont jamais essayé de trouver ce recepteur sur les cellules en gobelet, donc en fait j'ai même pas d'images ni rien pour sa oir si ma protéine est fortement exprimée.  [...]

[Biochimie] Contrôle d'inhibition de la dégradation lysosomale

J'inhibe la dégradation par les lysosomes (avec plusieurs concentrations de leupeptine) et j'aimerai trouver un contrôle positif de mon blocage c'est à dire une protéine qui s'accumule sous leupeptine en western.  [...] Oui un récepteur ca aurait pû convenir mais je travaille en cellule S2 (pool de cellules embryonnaires de drosophile) et je ne sais pas trop qui est exprimé et qui ne l'est pas. Je recherche donc une protéine TRES ubiquitaire.  [...]

[Biotechnologie] ADN ARN ou PROTEINE??

lorsqu'on a les résultats d'une expérience d'hybridation in situ, comment savoir si c'est la protéine ou l'ARN ou l'ADN qu'on regarde.  [...] du coup ça induit pas synthèse de Shh du coup ya plu le controle positif fgf8 shh je sais pas trop.. FGF8 qui se fixe sur les recepteurs membranaire est sous forme de proteine je crois du coup ce serai logique que hybridation soit de la proteine.  [...]

[Biologie Moléculaire] augmentation du taux d'ARN mais non celui de la protéine

Maintenant, je te l'accorde, ces questions ne concernent pas le soucis de la détection de la protéine. Sachant que la protéine est détectée en WB dans le contrôle positif et négatif, ce n'est pas un soucis de détection.  [...] je rejoints la précédente réponse. le controle positif se fait à 20% SVF. Dans ce cas, tu actives un max de kinases, ce qui se traduit entre autre par la phosphorylation de facteurs nucléaires, leur relocalisation dans certains cas. Est ce le cas de ta protéine Peut on imaginer qu'une phosphorylation puisse jouer sur sa stabilité, que cette phosphorylation ait lieu en présence de sérum, mais pas de ligand.  [...]

Problème RT-PCR sur cDNA

Par la façon dont tu exposes ton problème, j'ai l'impression que tu ne connais pas la structure exacte intron/exon de ton gène... J'imagine que c'est pour ça que tu séquences le cDNA. Une chose est sûre. entre les prédictions des sites d'épissages et une preuve biologique (ADNc séquencé), c'est la preuve biologique qui gagne.   [...] Une autre possibilité. un Western Blot avec un anticorps specifique du peptide que donnerait cet intron s'il était traduit. Si le Western est positif alors tu auras prouvé que cet intron est inclus et tu pourrais même estimer la quantité avec un anticorps contrôle spécifique d'une autre partie de ta protéine.  [...]

Achat de proteines

D'ailleurs, il est bien mentionné à la fin qu'il fallait avoir recourt aux conseils d'un nutritionniste pour savoir si on a réellement besoin de prendre ce genre de suppléments protéinés.  [...] Certains compléments protéinés peuvent contenir des produits dopants, il y a risque d'être contrôlé positif suite à un contrôle antidopage.  [...]