• Santé - Protéine, Cellules, Anticorps

[Immunologie] Immuno-marquage

C'est basé sur le système antigène-anticorps. Imaginons qu'on veuille marqué une cellule X qui présente des protéines Y sur la surface. Et bien on va pouvoir utiliser des anticorps de Y qui vont naturellement se fixer dessus..marquant ainsi la cellule X. Les anticorps sont des immunoglobines spécialement sécrétées pour se fixer sur la protéine Y.  [...] Mais faut savoir que chaque plasmocyte ne sécrète qu'un seul type d'anticorps. On choisira qu'un seul plasmocyte et on va en faire un hybridome( en gros. hybridation entre une cellule cancéreuse et un plasmocyte). Pourquoi on fait ça Tout simplement pour rendre le plasmocyte immortel car dans le corps le plasmocyte a une durée de vie très courte(de l'ordre du dixaine de jours si je me rappelle bien mais on s'en fou en fait ) Et donc voilà on a donc une jolie culture de plasmocytes qui sécrètent tous des anticorps contre la protéine qu'on veut observer.  [...]

[Biologie Cellulaire] Compter les passages

En résumé, même si tes cellules sont résistantes au G418, il est possible qu'elles n'expriment plus ta protéine suite à une mutation de sa séquence, ou du promoteur. Une autre hypothèse comme je l'ai dit précédement est que certains promoteurs sont sensibles aux métabolites secondaires produits durant la vie de la cellule, et qu'ils s'inhibent au fur et a mesure.  [...] Si tu as des anticorps dirigés contre ta protéine, tu peux faire une IF pour regarder le % de cellules exprimant ta protéine au cours des passages. Cela te permettra aussi de voir la localisation de ton récepteur qui peut éventuellement varier.  [...]

[Immunologie] pseudo-anticorps

salut les amis est ce qu'on peut créer un nouvel anticorps par exemple pour le sida créer un nouveau anticorps qui est le résultat de la fusion de la proteine CD4 du lymphocyte T4 d'un coté et le fragment constant de l'anticorps d 'un autre coté et le résultat est une nouvelle molécule qui va se lier au virus du VIH et par l'intermediaire du fragment constant de l'anticorps activer la réaction immunitaire même raisonnement pour les autre agent infectieux et le cellules cancéreuses.  [...]

[Biologie Moléculaire] Comment savoir qu'un ARNm est entier ?

Dans un deuxième temps j'ai produit un anticorps reconnaissant cette protéine et j'ai fait un western avec l'anticorps purifié. J'observe alors une bande au bon poids et d'autres plus petites (ne fait pas une smire, il n'y a que 3 bandes de plus).  [...] Un anticorps en western blot donne rarement qu'une seule bande, sauf si l'on dépose la protéine recombinante. Donc qu'as-tu déposé, des extraits (de tumeurs, de cellules surexprimant ta protéine après transfection d'une construction la codant,...), la protéine recombinante.  [...]

[Biochimie] Fonction de la protéine A-Sepharose ?

De l'ADN extrait de cellules humaines en culture ( cellules Hela ) a été purifié puis digéré par une enzyme de restriction (digestion totale),. aprés la digestion, les fragments sont marqués en 5'. une partie de la préparation est conservée à 4°C, l'autre partie est incubée successivement en présence de protéine p53, d'anticorps anti-p53, puis de protéine A-Sepharose.  [...] Dans un vieux tiroir de ma mémoire, quelque chose me dit que la protéine A se colle au fragment Fc des anticorps. La sépharose servant à culoter ce que la protéine A a collé.  [...]

Des anticorps "intelligents" à des fins diagnostiques

Les anticorps, en raison de leur capacité à reconnaître un marqueur cellulaire particulier &mdash. une protéine &mdash. sont généralement utilisés pour identifier des cellules anormales dans l'organisme. A ce titre, ils jouent un rôle clé dans le diagnostic, le traitement et la recherche fondamentale.  [...] Pour mieux comprendre le fonctionnement normal et pathologique des cellules, il est donc nécessaire de suivre l'expression des gènes mais aussi d'analyser le comportement des protéines elles-mêmes. Pour cela, les anticorps sont des outils intéressants. En recherche, les scientifiques utilisent traditionnellement des anticorps couplés à des molécules fluorescentes ou à des micro-billes métalliques pour pister les protéines.  [...]

[Divers] Protéine purifiée et anticorps

on obtiendra des anticorps polyclonaux car dirigés contre différents épitopes de ta protéine. Comme tu n'injecte que cette protéine (purifiée donc), tes anticorps eront dirigés uniquement contre cette protéine. Je suppose que c'est pour faire la distinction d'avec les cas où tu injectes un mix de protéines (un lysat ou des cellules entières par exemple).  [...] Non, tu as tout un tas d'épitopes dans une protéine. Prenons le cas d'une protéine à multidomaines. tu peux avoir des anticorps dirigés contre la partie C ou N-terminale mais également contre le domaine 1 le domaine 2, etc. Différents lympho sont susceptibles de reconnaitre une partie de ta protéine, et en fonction de leur maturation vont produire des IgG1, 2a, 2b, etc.  [...]

[Biologie Cellulaire] Sélection d'un clone stable : combien de temps ?

Je viens de me lancer dans la sélection d'un clone stable à partir de cellules C2C12. J'ai fait ma transfection et j'ai ajouté mon antibio de sélection G418 un jour aprés et j'attendais de voir mourrir mes cellules mais... rien Ca fait 3 jours Est ce normal combien de temps faut il attendre pour voir la sélection s'opérer.  [...] Perso quand j'ai fais des clones stables de cellules (pas des C2C12) je n'ai pas opté pour une telle stratégie. Attention je fais des choses compliquées, j'aime bien... protéine d'intérêt-IRES-IL2. Du coup la séléction était rapide et efficace vu qu'il suffisait de cultiver les cellules avec des billes magnétiques coatées avec l'anticorps anti IL2.  [...]

[Biologie Cellulaire] Réparation ADN

Il nous a dit que si une cellule avait beaucoup de foyers de réparation cela voulait dire que cette cellule réparait mal l'ADN. De plus on pouvait diminuer le nombre de foyer de réparation si on rajoutait une protéine ULP 1 et que ça avait une utilité dans le traitement des cancers.  [...] Je ne connais pas la protéine ULP1 dans la réparation de l'ADN mais ça ne m'étonnerait pas que le sujet de recherche de ton prof concerne ULP1. Ensuite, ajouter une protéine dans le traitement des cancers, en dehors des anticorps monoclonaux qui se fixent à l'extérieur des cellules, il n'y a pas d'autres protéines qui sont utilisées dans le traitement des cancers.  [...]

Définition | Immunothérapie | Futura Santé

Des anticorps monoclonaux sont aussi utilisés en immunothérapie. Ces anticorps peuvent être dirigés contre des protéines qui sont des points de contrôle, c'est-à-dire des molécules qui ralentissent la réponse immunitaire. Comme les points de contrôle freinent la réponse immunitaire, en inhibant ces freins moléculaires, l'immunothérapie active les défenses de l'organisme contre les cellules malignes.  [...] PD-1, un récepteur présent sur des cellules immunitaires, et qui ralentit la réponse immunitaire. L'anticorps nivolumab, dirigé contre PD-1, bloque cette protéine et active la réponse immunitaire.  [...]