• Santé - Protéine, Anticorps, Question

[Biologie Moléculaire] Mutations et Southern Blot

Question 1. on fait un southern. cette méthode est elle adaptée pour tous les types de mutation Quelle serai l'expérience la plus adaptée.  [...] Question 1. Connais-tu la technique Southern Que faut-il pour qu'elle fonctionne que permet t'elle d'identifier Essaie de formuler ce qui te pose problème, c'est comme cela que l'on (= toi et nous) trouve les réponses.  [...]

[Biochimie] Etude des partenaires protéiques : Co-Immunoprécipitation, Tap-Tag et double hybride

Et je me posais la question de savoir quel type d'anticorps fallait-il utiliser pour la Co-Ip Un anticorps poly ou monoclonal Si j'utilise un anticorps polyclonal, il risque de se fixer un peu partout sur ma protéine et je risque d'empêcher les interactions.  [...] co-immunoprécipitation. technique in vivo donc c'est bien, il y a le problème des anticorps qui peuvent en effet prendre un site de fixation d'un partenaire de la protéine.  [...]

[Biologie Moléculaire] Lecture Sequence ADN et WB

- Troisième question. l'IP vous dit quelle protéine on a immunoprécipité (ici DCC est immunoprécipitée), et WB vous dit quelle protéine a été marquée en western blot (ici p-y kinase). On utilise un anticorps polyclonal pour les immunoprécipitations et pour le western blot, si on détecte une autre protéine que celle immunoprécipitée, on utilise soit un monoclonal soit un polyclonal.  [...] Merci d'avoir répondu c'est plus clair pour les 2 premieres cependant pour la question sur le Western Blot ce que je n'arrive pas à comprendre les indications de l'experience et donc comment peut on avoir une bande caracteristique pour cet exemple et déduire par exemple qu'un produit X qu'on a rajouter induit la Phosporylation de DCC(recepteur)(en comparaison des intensités des bandes par ex).  [...]

[Divers] Protéine purifiée et anticorps

Lors de la préparation des concours pour l'INRA, je bloque sur une question me demandant ce que l'on espère obtenir en injectant une protéine purifiée à un lapin. Je serai tentée de répondre des anticorps monoclonaux, mais je ne vois pas bien la différence entre une protéine dite purifiée et une protéine tout court.  [...] on obtiendra des anticorps polyclonaux car dirigés contre différents épitopes de ta protéine. Comme tu n'injecte que cette protéine (purifiée donc), tes anticorps eront dirigés uniquement contre cette protéine. Je suppose que c'est pour faire la distinction d'avec les cas où tu injectes un mix de protéines (un lysat ou des cellules entières par exemple).  [...]

[Biologie Moléculaire] identification d'un gène

Après tu peux commencer une étude fonctionnelle = tu sais que tel gène muté entraîne une maladie, mais pourquoi Mais c'est une autre question, je crois. Et là effectivement tu va passer à la production d'anticorps à partir de ta protéine (soit fait maison, ce qui est pénible, soit en commandant l'anticorps idoine chez felix potin).  [...] En dernier recours, tu doit sûrement pouvoir faire de la protéine, c'est a dire des anticorps + bordelo-immuno-cyto-chimie, mais çà c'est vraiment pas ma tasse de thé.  [...]

[Biologie Moléculaire] Retard sur gel

En effet, si le retard qu'on observe est bien spécifique a la protéine d'intérêt, l'incubation avec un anticorps dirigé contre peut avoir deux effets. soit le retard est décalé vers le haut (supershift) du a la taille du complexe, soit le retard disparaît, a cause de l'encombrement produit par l'anticorps dans l'interaction avec la sonde.  [...] Sinon, en absence d'anticorps, on peut aussi utiliser un extrait protéique qui ne possède pas la la protéine en question (Knock down, ou KO s'il est disponible), et observer une diminution / absence du retard.  [...]

[Immunologie] Principe d'un vaccin contre le paludisme avec des sporozoites atténués

J'avais cru comprendre que, justement, cela ne fonctionnait pas selon le même mécanismes que les cas classiques que nous connaissons. J'avais compris (enfin je crois) que cela n'éradiquait pas pour autant l'infection causée par plasmodium mais que cela empêchait juste son développement hépatique (mais que le corps infectieux n'était pas éliminé par le système immunitaire).   [...] Je ne comprends pas trop ta question le mode d'action du vaccin. Différentes options ont été testées, tu parles de laquelle Les modes d'action des vaccins visent à déclencher une immunité cellulaire ou humorale (anticorps anti-CSP par exemple pour le palu, puisque c'est la protéine de surface majeure sur les sporozoïtes. Mais ça marche pas bien).  [...]

[Biologie Moléculaire] D'une protéine à un gène à une protéine

En d'autres mots et via un exemple, est-il possible de copier un anticorps monoclonal si l'on ne dipose pas de cellules productrices (mais bien de la protéine/anticorps en question et en quantité suffisante).  [...] Je sais qu'il est aisé de déterminer la structure primaire d'un protéine (et donc d'un anticorps) et de procéder à une reverse-translation d'une telle séquence d'acide aminés en une hypothétique séquence nucléique. Mais cela peut-il être juste ainsi.  [...]

influence des peptides signaux sur la sécrétion des protéines

Oui, j'ai fait une analyse par Western Blot (2 anticorps, révélation électroluminescente). Je ne retrouve rien dans le surnageant, mais je retrouve la protéine dans la fraction soluble et non soluble après la lyse des cellules.  [...] 3°) incubation avec des anticorps dirigés contre la clathrine et contre ta protéine en question. par exemple un rabbit anti-clathrine et un mouse anti-protéineX.  [...]

[Biologie Moléculaire] kinase

Si la protéine à la quelle je pense, est bien Y-phospho alors l'anticorps devrait se fixer dessus et bloquer ainsi son activité. L'inactivation de la proteine en question pouvant etre suivi par un test enzymatique, je devrais pouvoir quantifier précisément l'effet de l'anticorps.  [...] 3) pour le controle, il faudrait mieux utiliser un autre anticorps que ceux diriger contre des phosphorylations. Si jamais ils ont un effet bloquant et que ta proteine est cible, tu pourrais avoir un effet dans le temoin... Et s'il est bloquant, meme remarque que pour l'anti P-Y.  [...]