• Santé - Protéine, Anticorps, ADN

Utilisation des fluorochromes Cyanine

Dites moi, je sais que les fluorochrome cyanine sont organiques Copment peut t on les utiliser pout un marquage en cellule Est ce qu'on peut faire un marquage spécifiques avec.   [...] Ils peuvent etre fonctionnalisés avec des groupements réactifs pour pouvoir les fixer sur une protéine par exemple. Le marquage ne sera pas spécifique, il ciblera par exemple toutes les lysine d'une protéine. Ils peuvent aussi etre couplés à des brins d'ADN ou des anticorps et sont donc ensuite révélés par fluorescence.  [...]

[Biologie Moléculaire] Utilisation de la résine Chelex pour reverse crosslink de l'adn

Je l'utilise dans le cadre d'immunoprécipitation de la chromatine, j'en ajoute 100 uL à 10% sur mes échantillons immunoprécipités pour détacher les complexes protéine/anticorps/billes de l'adn. Pour cela je mets le tout à 99°C pendant 10 minutes.  [...] Le Chelex est un chelateur puissant. Il va chelater les ions positifs ce qui va permettre d'eviter la degradation de l'ADN lors de l'etape 99 deg C / 10min. C'est cette etape de chauffage qui va dissocier les proteines de l'ADN. Chelater les ions va aussi inhiber les DNases.  [...]

Asthme allergique : bientôt un vaccin intramusculaire efficace ?

Cette illustration montre la façon dont les chercheurs ont procédé pour réaliser l'expérience. À partir de l'ADN de l'allergène, ils ont pu placer le plasmide dans un nanovecteur. Une fois injecté, cet ADN sera traduit et transcrit en protéine contre laquelle le corps va produire des anticorps qui n'induiront pas d'allergie. B. Pitard.  [...] Le vaccin mis au point avec un modèle de souris saines a ensuite été optimisé avec un modèle de souris asthmatiques. Chez ces dernières il déclenche une fabrication d'anticorps spécifiques anti-Derf1 et une réponse cellulaire spécifique de Derf1, orientant ainsi le système immunitaire vers une réponse non allergisante, protectrice lorsque l'allergène est rencontré.  [...]

[Biochimie] etude de proteine de liaison à l'ADN

@@ou la liaison de l'anticorps empêche la protéine de se fixer a la sonde. disparition du shift.  [...] -tu ajoutes aun anticorps anti-X pour agglomérer la protéine X liée a des séquences.  [...]

[Biologie Moléculaire] structure des protéines

On élimine ensuite les protéines qui ne sont pas liées à l'anticorps anti-proinsuline pour ne garder que les protéines de proinsuline.  [...] Par contres elles ont été immunoprécipitées par des anticorps anti-proinsuline, donc ces protéines possèdent le même épitope que la proinsuline, elles en sont donc très proches. Ce seraient donc des protéines de pré-proinsuline, ce qui collerait car leur PM est plus élevé.  [...]

[Immunologie] VIH difficultées à trouver un vaccin

Alors pourquoi cibler le domaine de liaison Parce qu'il est constant. Si vous produisez un anticorps contre ce domaine vous allez pouvoir toucher tous les variants de la protéine, alors que si vous dirigez l'anticorps contre la partie hypervariable vous n'atteindrez que quelques versions de la protéine.  [...] Ceci vous justifie d'emblée que les anticorps produits à partir de la protéine native soient inéfficaces et l'intérêt d'en quelque sorte peler la protéine virale. On cherche à atteindre le noyau.  [...]

[Biologie Cellulaire] Co-Immunoprécipitation

2. Tu rajoutes des billes de sepharose ou d'agarose sur lesquelles sont greffées de la protéine A ou G, qui ont la particularité de fixer les anticorps. Ton complexe Antigene Anticorps est donc capté par les billes. tu as donc.  [...] donc que B interagit avec A. Pour controler, tu reincubera la membrane avec un anticorps anti A pour vérifier la présence de la protéine A (sinon cela signifie que ton IP n'a pas marché, donc il est normal que tu ne vois pas B).  [...]

[Divers] Protéine purifiée et anticorps

on obtiendra des anticorps polyclonaux car dirigés contre différents épitopes de ta protéine. Comme tu n'injecte que cette protéine (purifiée donc), tes anticorps eront dirigés uniquement contre cette protéine. Je suppose que c'est pour faire la distinction d'avec les cas où tu injectes un mix de protéines (un lysat ou des cellules entières par exemple).  [...] Non, tu as tout un tas d'épitopes dans une protéine. Prenons le cas d'une protéine à multidomaines. tu peux avoir des anticorps dirigés contre la partie C ou N-terminale mais également contre le domaine 1 le domaine 2, etc. Différents lympho sont susceptibles de reconnaitre une partie de ta protéine, et en fonction de leur maturation vont produire des IgG1, 2a, 2b, etc.  [...]

[Immunologie] Immuno-marquage

Donc on va profiter de cette affinité pour marquer des protéines cibles. Mais pour qu'on puisse voir, on fixe sur les anticorps des marqueurs. Alors ça peut être un marqueur radioactif par exemple, ou un marqueur fluorescent comme ça au microscope on repère bien la protéine cible.  [...] Pour aider. vois les régions épitopes comme des serrures présentes sur la protéine et les anticorps comme des clés. Si un anticorps correspond à la serrure elle se fixera et la protéine sera marqué.  [...]

[Biologie Moléculaire] Expression de protéines grâce au pGEX. DH5alpha ou BL21?

De la même manière j'ai co-migré un extrait protéique obtenu après transformation des bactéries avec un pGEX vide et là aussi la colonne reste entièrement vide. Ces contrôles signifient bien que mon anticorps ne marque pas une protéine bactérienne endogène ou un bidule provoqué par l'insertion du seul plasmide.  [...] Pour l'anticorps c'est un anticorps polyclonal commercial dirigé contre ma protéine et qui fonctionne pas mal dans les autres applications pour lesquelle je l'utilise.  [...]