• Santé - Promoteur, Séquence, Activité

[Biologie Moléculaire] promoteur sequence regulatrice et activité CAT

mon exo consiste en la transfection de cellules utérines par un plasmide contenant un gène CAT,un promoteur eucaryote et des séquences cis régulatrices en amont du promoteur.  [...] C'est l'effet de l'E2 ou de la progesterone sur l'expression du promoteur qui est étudié. L'interaction de E2 ou de la progesterone sur les séquences régulatrices cis peut entrainer une modification de l'expression du promoteur et donc de l'activité CAT (comme dans le cas de l'estradiol).  [...]

opéron / enhancer

Je n'arrive pas à différencier un opéron d'un enhancer. L'opéron contrôle (si j'ai bien compris) l'activation ou non d'un gène ou ensemble de gène (opéron tryptophane), mais qu'en ait-il de l'énhancer, c'est la même chose.  [...] Un enhancer est une séquence qui va permettre d'augmenter l'activité d'un promoteur.  [...]

[Biologie Moléculaire] Disponibilité ARNt procaryotes

J'ai muté la séquence codante d'un gène bactérien mais de façon silencieuse afin d'en conserver la séquence en acides aminés. Je teste maintenant l'activité de la protéine codée par le gène sauvage ou le gène muté en la surexprimant par le promoteur inductible PBAD.  [...] En fait, on voudrait justement éviter de passer par un Western et on a besoin de muter le gène pour sa séquence en nucléotides mais sans modifier la séquence en AA. on a réussi et observé quelque chose qui va dans le sens de notre hypothèse, en l'occurrence une activité plus faible.  [...]

[Biochimie] recombineering...

N'est-ce pas possible, à l'inverse, de faire une construction rapporteur+séquence cible de l'ARN non codant, et donc de repérer la transcription de ton ARN d'intérêt par extinction de l'activité du promoteur.  [...] cependant, les ressources que nous possédons pour le moment ne me permettent pas d'introduire la séquence du rapporteur au début de l'ARN non traduit, car les mutants disponibles pour l'intégration du gène rapporteur sont limité(nous utilisons des attP-attB), donc je n'ai qu'un exon disponible au milieu de l'ARN.  [...]

[Biologie Moléculaire] Séquence du promoteur du gène résistance à l'ampicilline

J'aimerais savoir où trouver la séquence du promoteur de ce gène. C'est pour savoir si le site de restriction que j'ai choisi n'est pas trop près du promoteur.  [...] Vous avez la séquence du plasmide. J'imagine que sur la carte vous devez avoir les limites de votre cassette ampi (promoteur et séquence codante). Y a qu'a compter pour trouver la séquence de votre promoteur sur votre plasmide.  [...]

[Divers] aide révision questions diverses

Pour qu'une protéine soit produite sans arrêt, il faut généralement une mutation sur le promoteur (ou sur le promoteur du facteur de transcription qui active sa transcription, etc...). Une mutation dans la séquence codante peut par contre en effet perturber les signaux d'adressage.  [...] Le promoteur d'un gène est une partie de l'ADN située en amont de ce gène, qui sert à en réguler la transcription (et non la traduction, rien à voir avec les ribosomes donc). Sur le promoteur vont venir se fixer des protéines capables de reconnaitre spécifiquement la séquence d'une partie du promoteur et activer ou inhiber la synthèse de ce gène (en empêchant ou permettant à l'ARN polymérase de se fixer).  [...]

[Génétique] structure du gene, help!!

Un promoteur suivi quelques kilobases plus loin d'un terminateur. ce qu'il y a entre les deux peut correspondre à une séquence codante (le gène codera une protéine), ou non codante et on obtiendra un ARN non codant.  [...] Les opérons se retrouvent chez les procaryotes, cela consiste en un regroupements de séquences codantes sous le controle du même promoteur. Les opérateurs sont des séquences régulatrices qui servent à moduler l'activité du promoteur. Silencer= inhibition du promoteur, enhancer = stimulation.  [...]

[Biologie Moléculaire] Comment pRb peut-elle augmenter l'activité d'un promoteur ?

Grâce à une méthode de marquage d'un seul des 2 brins d'ADN suivie d'une digestion avec une très faible quantité de DNase d'ADN incubé avec C/EBP5 seul ou C/EBP5+Rb on conclut que c'est 2 facteurs se fixent sur un même module.GC.   [...] De plus, grâce à un système rapporteur Luciférase, on mesure l'activité d'un promoteur Y qui ne contient pas de module E2F et DP. Cette activité est mesurée seul, en présence de facteur C/EBP5, et en présence de C/EBP5+Rb. Les résultats montrent que l'activité Luciférase est nettement supérieure en présence de Rb.  [...]

séquence promotrice / séquence régulatrice

Dans le sens où les polymérases ont une affinité différentes en fonction de la séquence du promoteur (qui est un élément obligatoire pour la transcription.) on peut dire que le promoteur fait partie de la région régulatrice.  [...] exemple chez les eubactéries. Plus la séquence du promoteur est proche de la séquence consensus (TTGACA -quinzaine de nucléotides- TATAAT) plus l'affinité de l'ARN polymérase pour le promoteur est forte et plus il y a de transcription du gène sous contrôle de ce promoteur.  [...]

Adn

Après pour ton autre question j'aurais tendance à dire oui. Car chez les eucaryotes un ARN représente un gène à l'inverse des procaryotes où ils ont des ARN polycistroniques représentant plusieurs gènes. L'ARN des eucaryotes est transcrit via l'ARN polymérase II qui utilise tout les éléments de la séquence promotrice pour correctement se positionner sur le promoteur.  [...] Ensuite on a la transcription de l'ARN puis l'ARN polymérase rencontre une séquence de terminaison qui est un signal permettant le décrochage de l'ARN polymérase II. L'ARN polymérase décrochée va de nouveau se positionner sur le promoteur et recommencer son cycle.  [...]