• Santé - Promoteur, Rapporteur, Expression

T1 et T2 generation GUS

Est-ce qu'il faut s'attendre a des difference entre des expression GUS gene rapporteur (promoteur rapporteur) suivant si on utilise des plantes de generation T1 ou T2. Qu'est ce qu'il vaut mieux utiliser.  [...]

[Biologie Moléculaire] organisation plasmide

Dans un plasmide expression( rapporteur). il y a un gene de résistance pour le sélectionner, une origine de réplication, un MCS et par exemple le gène lacZ juste apres.  [...] Non il ne faut pas aller chercher trop loin. Si c'est un plasmide RAPPORTEUR, on veut mesurer l'ACTIVITE d'un PROMOTEUR en mesurant indirectement l'expression d'un gène quantifiable comme ß-galactosidase. Dans ce cas la, on a besoin DU PROMOTEUR d'intérêt et c'est lui que l'on clone dans le MCS en AMONT du gène rapporteur.  [...]

[Biologie végétale] Différence entre GUS et RT-PCR

Dans un article que je dois analyser, les rechercheurs ont fait une RT-PCR et utilisé un gène reporteur GUS afin de savoir où l'expression du gène en question se localisait.  [...] Dans le cas du gène rapporteur GUS, tu as localisation de l'expression à un endroit précis in situ. Autrement dit, je souhaite savoir où et quand s'exprime le gène tartampion, je fais donc une construction fusion entre le gène GUS et le promoteur du gène d'intérêt et je suis l'apparition de la coloration bleue.  [...]

hybridation in situ vs rapporteur

Pour étudier la localisation de l'expression d'un gène (à l'échelle cellulaire, pas subcellulaire), quel est l'intérêt de l'hybridation in situ par rapport à l'utilisation d'un rapporteur sous contrôle du promoteur de ce gène (ou l'intérêt de cette dernière technique par rapport à la 1ere).  [...] Mais tu as raison dans le cas d'une sipmle fusion promoteur-Gene rapporteur. Il est meme parfois pas evident que ca reflete l'expression normakl de l'ARNSm sdi d'autres elements que le promoteur entre en jeu (introns par ex).  [...]

[Biochimie] principe du gene rapporteur, sonde

La quantité d'oxyluciférine produite est proportionnelle à l'activité de la luciférase donc à l'activité du promoteur du gène rapporteur ainsi que du gène dont l'on cherche à mesurer l'expression.  [...] Je pense que dans ce cas la sonde bioluminescente est l'oxyluciférine + émission de photons. Cette sonde s'accumule au site d'expression du gène rapporteur.  [...]

[Biologie Moléculaire] Gène Rapporteur

- soit on place le gène rapporteur après la séquence régulatrice (promoteur), c'est-à-dire qu'on remplace le gène qui nous interesse par le gène rapporteur, et ceci nous permettra de mesurer l'expression du gène.  [...] Pour les constructions, oui votre explication peut être une des raisons à ma connaissance. En fait, insérer un gène rapporteur à la place du gène permettra d'étudier surtout son mode d'expression. qu'est ce qui active sa transcription et / ou sa traduction, qu'est ce qui la régule etc.  [...]

système de double hybride

Alors, dans l'ordre. Dans une levure classique, les gènes GAL4 sont normalement présent. Mais dans la levure qui est utilisé, les gènes codant pour les protéines GAL4 sont apportées par un/des plasmide(s). Le gène rapporteur est normalement déjà présent, mais il peut également être apporté.  [...] Donc, le promoteur du gène rapporteur est activé par l'interaction (ou le rapprochement) des deux protéines GAL4. Ce qui permet l'expression du gène rapporteur (et sa visualisation). Ca, c'est la cas classique. Le truc, c'est que l'on ne peut pas s'en servir en l'état.  [...]

technique du double hybride

En utilisant une séquence d'ADN codant pour un gène rapporteur sous le controle d'un promoteur activé par le facteur de transcription, on peut fixer la cible sur l'ADN via le domaine de liaison de l'ADN du facteur de transcription. Comme le système ne possède pas le domaine de transactivation, il n'y a pas d'activation de l'expression du gène.  [...] Ainsi pour avoir activation du gène rapporteur il faut une mise en contact du domaine d'activation au domaine de fixation. Ceci étant réalisé si il y a intéraction entre protéine X et Y.  [...]

[Génétique] transfection

Voilà dans le cadre d'un projet en apprentissage je dois rendre un rapport sur les differentes méthode de transfection. Le probleme c'est que je ne sais pas par quoi commencer donc si pouviez me donner un petit coup de main en me donnant des adresses internet ou en me disant ce que vous savez sur la transfection leurs avantages, leurs inconveniant etc.  [...] plusieurs dizaines iii) l'expression du gène rapporteur est retardée d'environ 72h.  [...]

[Biochimie] étude de promoteur

Une manip' envisageable est de faire un test rapporteur dans une lignée cellulaire. Vous clonez votre promoteur ou des morceaux de votre promoteur en amont de la séquence codante d'un gène rapporteur (CAT, Luc). Vous cotransfectez avec un plasmide codant pour votre facteur de transcription.  [...] En général, l'approche d'invalidation de l'élément de réponse d'un facteur de transcription par mutagenèse dirigée se fait après la troncation régulière du promoteur (énoncé brièvement par Piwi. morceaux de promoteurs en amont d'un gène rapporteur). Celle-ci permet de confirmer la position de l'élément de réponse sur le promoteur est pourquoi pas découvrir un nouvel élément de réponse zappé par le programme bioinformatique.  [...]