• Santé - Produit, Expression, Protéine

La protéine du cancer du sein, BRCA2, est enfin purifiée

Mais la purification d'une protéine est un chemin semé d'embûches. Chaque étape peut vite devenir un problème. le clonage du gène, l'expression de la protéine dans des cellules (spécialement modifiées pour sécréter en grande quantité le produit du gène inséré), la séparation de la protéine de tous les autres constituants de la cellule, sa solubilisation.  [...] La suite des expériences devrait apporter de nouvelles réponses, notamment en modifiant la séquence de la protéine à l'image des mutations observées chez des patientes puis en observant l'effet sur les propriétés de BRCA2 (en purifiant cette fois la protéine mutée).  [...]

Définition | Polyprotéine - Poly-protéine | Futura Santé

Une polyprotéine (qui signifie étymologiquement plusieurs protéines ) est un produit d'expression d'un seul gène en une seule protéine, principalement non fonctionnelle.  [...] La polyprotéine est ensuite clivée en protéines plus petites, grâce à l'action d'une ou plusieurs protéases en des sites précis. Les protéines séparées les unes des autres sont alors capables d'assurer leur fonction.  [...]

[Biochimie] Petite question sur le Western Blot

Le probleme est que le raisonement repose sur une enorme approximation de départ (que la protéine surexprimée va avoir un impacte significatif sur la quantité de protéines). Or ce n'est jamais le cas, les variations d'expression d'une proteine ne seront jamais suffisantes pour avoir un impacte sur la quantification.  [...] Dans ton exemple tu sous entends en fait que la protéine B dont l'expression a été boosté représente la majorité de la quantité de protéine que tu déposes sur ton gel ce qui me parait un peu abusif. J'ai tendance à penser que même si cette expression augmente, elle reste marginale devant la quantité de protéine totale et donc la quantité de protéine totale n'est pas affecté par l'augmentation de protéine B car sa valeur est tout à fait négligeable.  [...]

Bactérie et intentionalité

on peut très bien imaginer que deux bactéries au fonctionnement différent soient présente, l'une va fixer l'une des molécules issue du macrophage grace a une protéine A, l'autre va capter les molécules issues du macrophage par une protéine B.  [...] cependant une cause entraînant une conséquence, la bactérie 1 avec la protéine A va mourir tandis que la bactérie 2 avec la protéine B va survivre, et donc faire proliférer cette version B qui entraine un mouvement opposé a celui entrainé par la protéine A, on va donc observer des bactéries qui semblent fuir, alors que c'est juste le produit de l'évolution par la sélection naturelle issu de multiples possibilité et qui reste visible après l'expression des conséquences des autres variants (en l'occurence la mort des autres variants).  [...]

Vecteur de clonage, PCR et vecteur d'expression

Ils disent ensuite que le produit de PCR () est purifié par électrophorèse sur gel d'agarose et ensuite il est encore inséré dans un autre vecteur entry vector en utilisant une deuxième PCR(). Puis ils utilisent enfin un vecteur d'expression pour obtenir la protéine de fusion GST-gene d'intérêt.  [...] C'est assez simple en fait. Le gene d'interet etait deja present sur un plasmide mais qui ne leur convenait pas. Ils ont donc amplifié le gene par PCR, on purifier le produit d'amplification sur gel pour se debarasser du plasmid ayant servi de matrice, pour cloner le tout dans un plasmide permettant l'expression de la protéine.  [...]

[Biochimie] [Terminale S] Vrai ou faux ?

je ne suis pas d'accord, il n'y a pas de lien entre la a et la d. On pourrait parler d'une protéine contrôlant l'expression de gènes autosomaux qui serait codée par un gène autosomal ou situé sur le chromosome X ou Y.  [...] Mais encore une fois, certains prof. de repro (les miens cette année en tous cas) n'appellent pas TDF le produit d'expression du gène SRY.  [...]

[Biologie Moléculaire] polymorphisme/mutation???

Ce sont les polymorphismes qui causent la diversité entre les individus. différence d'intensité de couleur de peau, expression favorisée de certains protéines, groupes sanguins... Mais ils peuvent aussi être totalement neutres phénotypiquement.  [...] Les polymorphismes conduisent par définition à la synthèse d'une protéine normale (produit d'expression du gène) mais peuvent prédisposer à certaines maladies.Tout dépend alors de ce que l'on entend par neutre.  [...]

dégradation de protéine recombinante

Je rencontre actuellement un problème lors de l'expression et la purif d'une prot recombinante. j'utilise le vecteur d'esxpression pQE30 et je purifie sur colonne NI-NTA, mais voila lorsque que je charge le produit de ma purif sur gel SDS j'observe bien la protéine d'intérêt à la MM attendue mais également des bandes de MM plus basse.  [...] Ca devrait ameliorer pas mal les choses, je pense. Le PMSF, c'est une bonne chose, ça permet d'éliminer toutes les sérines-protéases (comme la trypsine). L'EDTA à la fin est important aussi, il élimine les métallo-protéases qui sont présentes en masse dans beaucoup de systèmes d'expression, notamment en bactéries il me semble.  [...]

Trangénèse > caroténoides > cossupression de gène ...

pour moi, la cosuppression d'un gène ou gene silencing est le fait d'éteindre l'expression d'un gène, c'est à dire d'entrainer l'arrêt de la production de la protéine qu'il code, en provoquant la destruction des ARNm de ce gène au fur et à mesure de leur production.  [...] En gros, si tu introduit par transgenèse une construction qui produit l'ARNm de ton gène-cible en grande quantité. Le système de régulation de l'expression du gène va détecter l'excès d'ARNm et détruire tous les ARNm de ce gène. Du coup, au lieu d'augmenter la quantité d'ARNm de ce gène et donc la quantité de protéines, on obtient l'effet inverse.  [...]

[Biologie Moléculaire] Expression hétérologue de protéine : vecteur baculoviral

.. J'ai décidé de rester chez coli parce que les essais préliminaires d'expression de cette protéine mais avec un tag MBP (j'utilise hexa-His) ont été concluants.  [...] 107 kDa, c'est très gros pour une expression en bactérie. Parfois ça marche mais en général ça finit en corps d'inclusion ou en protéine non exprimée. Le passage en baculovirus me semble inévitable dans ton cas.  [...]