• Santé - Procédé, Amplification, Génétique

ITS \ 16s !!!

La PCR est un procédé d'amplification de matériel génétique, le protocole ne change pas ici, c'est ta séquence génétique qui diffère.. En fait je pense que la différence se situe au niveau de la conservation de ces séquences entre les espèces. les ITS (Internal Trancribed Spacer) sont très différents entre deux espèces, même si celles-ci sont proches, alors que les ADNc 16S (après transcriptase inverse) sont des séquences très stables dans l'évolution.  [...] 2 eme question.si on veux detectè par exemple un gene de resistance aux antibiotique si il est present chez une tel bactérie ou non,on utilise PCR Its çèça.   [...]

[Biologie Cellulaire] Recherche OGM? ADN introuvable? Option?

L'autre différence est sans doute plus subtile à apprécier. Au cours d'une PCR on amplifie des millions de fois la séquence d'ADN que l'on souhaite identifier. Cette amplification permet ainsi de détecter notre cible même en présence infinitésimale. Certaines équipes pointues parviennent ainsi à trouver la présence d'un gène donné dans une cellule unique (c'est ainsi que l'on procède au DPI dont nous discutions sur ce forum il y a quelques temps).  [...] Le test ELISA ne procède pas par amplification. Il s'agit de capturer la protéine recherchée sur une bandelette puis d'en révéler la présence. Selon le moyen détecter il en faut plus ou moins.  [...]

[Biologie Moléculaire] Les applications cliniques de la PCR

l'étude de expressions des gènes (RT-PCR), la médecine légale, agroalimentaire (OGM), diagnostics, évolutions, sonde, clonage, criblage, séquençage...etc.   [...] La PCR est utilisée pour identifier une cellule ou un virus grâce à son ADN, ou toute maladie génétique par amplification de séquences spécifiques.  [...]

[Biochimie] Mecanisme de ligation SOS clonage

J'ai procédé aussi par amplification de ce mm géne par PCR à partir de la mm construcution et le dosage n'est pas fameux (9.81 ng/ul dans 75 ul d'eluat aprés purif) il faut noter que les bandes correspendant au produit Pcr sont intenses sur gel d'agarose+ BET.  [...] j 'ai procédé à la ligation ds les proportions 1/1, 1/3, et1/5 mais aprés transformations ds ECOLI (top 10), extraction plasmidique par lyse alcaline et screening par pcr...Pas de clonage. j'ai fais 3 tentative jusque la.  [...]

[Biochimie] Quelle est la différence entre ADN et ARN?

La fonction est également différente. l'ADN est une molécule qui sert au stockage de l'information génétique, l'ARN a de nombreuses autres utilisations (mais rarement le stockage de l'information).  [...] .. On permet ainsi un phénomène d'amplification de l'information et on touche le moins possible au support de l'information génétique.  [...]

[Génétique] principe des études moléculaires

J' ai également une seconde question... pour réaliser une PCR il faut une amorce et suite à l'amplification réalisée le séquençage est possible ainsi les mutations peuvent-elles être découvertes...mais pour l' analyse d'une maladie génétique portant sur une séquence d'ADN à déterminer comment fait-on Le séquençage n'étant pas possible par manque de matériel génétique puisque aucune PCR est réalisable sans amorce donc brin complémentaire.  [...] Je vais essayer d'amorcer le problème, quelqu'un pourra toujours me compléter ensuite. En effet pour connaitre avec précision une mutation, on peut réaliser une PCR avec des amorces encadrant la région considérée, puis faire un séquençage. Toutefois, le séquençage n'est pas absolument nécessaire et beaucoup d'autres techniques permettent de détecter une mutation en s'en passant.   [...]

Une extraordinaire diversité | Dossier

Il a fallu attendre les progrès conjoints de la biologie moléculaire (amplification en chaîne d' ADN, séquençage à haut-débit) et de la bioinformatique pour que se développe la phylogénie moléculaire. Il est alors devenu possible d'établir des arbres généalogiques à partir des séquences d'un même gène comparées entre toutes les espèces.  [...] Ainsi, pour positionner dans un groupe phylogénétique une nouvelle espèce, on procède à l'amplification et au séquençage de ce gène puis à sa comparaison avec les séquences déjà connues disponibles dans les banques de données.  [...]

[Biologie Moléculaire] miRNA (ou microARN) - Page 2

Il faut savoir que le procédé d'interférence est un phénomène d'amplification, puisque DICER clive le double brin d'ARN en plusieurs ARNi. Comment l'ADN a mis en route le mécanisme d'interférence C'est une bonne question lol.  [...] Chez les Mammifères non plus, il n'y a pas de phénomène d'amplification, contrairement à ce qu'on observe chez les plantes ou C.elegans.  [...]

[Génétique] Transgenèse : altération du génome

J'avais bien pensé à la PCR, mais si l'on place un seul primer, quand s'arrête l'amplification De plus, l'amplicon en lui même ne sert à rien, alors procède-t-on à un séquençage (puis confrontation aux banques de données) pour positionner le site d'insertion du transgène.  [...] eh bien tu n'en prends pas, tu fais des lectures dans un seul sens. Contrairement a la PCR pour amplification, en Sanger tu n'as pas besoin d'amorce de l'autre coté.  [...]

[Génétique] Choix amorces amplification portion ADN

- Si j 'ai un fragment d'ADN à amplifier et que j ai un codon début et un codon stop au milieu du fragment, est-ce que je m'en fiche dans le cadre d'une amplification d'un fragment d'ADN En gros, quand on me demande d amplifier un fragment, c est un fragment, sinon on m aurait demandé d'amplifier le gène.  [...] - Si je n'ai pas de codon ATG ou stop dans mon fragment, dois-je le rajouter dans ma séquence d'amorce ( je crois que je fais une confusion entre l amplification et la traduction du gène).  [...]