• Santé - Précipitation, Protéines, Contamination, Sérum

[Divers] Problème contamination & colmatage colonne HPLC-UV

je suis doctorant en Biochimie, mon problème concerne le dosage d'une molécule (iohexol) dans le sérum humain par HPLC-UV à cause de l'augmentation de la pression. J'ai essayé ça avec plusieurs colonnes mais malheureusement le problème persiste. Dans l'autre sens, la précipitation des protéines sériques est suffisant pour éviter la contamination de la collone ou bien il est indispensable de filtrer le sérum et utiliser un pré-collone. Merci par avance.  [...] Dernière modification par Soufiane Elassri. 03/03/2019 à 21h41.   [...]

Biochimie : précipitation protéines au sulfate d'ammonium, pourquoi NaOH pour réversibilité?

préparant un tp dont la première étape consiste en la précipitation de globulines présentes dans du sérum de boeuf, nous procédons comme suit.  [...] De ce que je comprends (même si ça a apparemment l'air plus complexe), NH4+ et SO4(2-), ioniques, vont entrer en compétition avec ma protéine pour l'eau, ma protéine déshydratée précipite donc. Mais alors pourquoi utiliser de la soude pour re-solubiliser.  [...]

précipitation des protéines

la précipitation des proteines se fait préferentiellement au sulfate d'ammonium, et on obtient après un culot protéique. Est-ce qu'on peut avoir des protéines ou peptides qui echappent à cette précipitation et pourquoi.  [...]

[Biochimie] Definitions et propriétés

Mais sache également que le phénomène inverse existe salting in. Pour faire précipiter ou cristalliser une protéine, on peut abaisser de façon drastique la concentration en NaCl.  [...] salut fabien, moi je fais l'xtraction de l'ADN à partir du sang (entre 8 et 10 ml) humain avec la technique salting out, pour la précipitation des protéines j'utilise 1 à 1, 2 ml de NaCl 6x molaire.  [...]

[Biochimie] western surnageant culture

je souhaiterais avoir des renseignements afin de détecter par western blot une protéine contenue dans le milieu de culture de cellules. Faut-il concentrer (précipitation, ultracentri, chromato,...) les protéines présentes dans le surnageant de la culture Comment procéder.  [...] Sinon sur ce forum, Gorben parle souvent d'une précipitation au TCA qui permet de concentrer les protéines. Ca devrait aussi pouvoir vous intéresser.  [...]

Identification des acides aminés d'une plante

Cependant personnelement, avec le matériel que tu peux avoir à disposition, je ferais un broyat de la cellule (tissu dans un mortier), met cela en solution dans de l'eau physiologique par exemple, puis tu fais une pré-purification en faisant précipiter les protéines avec du sulfate d'ammonium.  [...] ==. Note. Pour enlever le surplus de sulfate d'ammonium qui fait précipité les protéines, il te faudra probablement faire des cycle solubilisation - centri - récupération du culot plusieurs fois de suite (la forte concentration en sulfate d'ammonium encore présent pourrait continuer a fait précipiter les protéines et gêner la suite de l'expérience.  [...]

précipitation des protéines

que veut dire la précipitation des protéines et que veut dire la demi saturation des protéines car on dit que les globulines précipitent à 50% de saturation et l'albumine à +de 50% de concentration dans le sulfate d'ammonium. Que cela veut il dire.  [...] en fait la précipitation des protéines arrive lorsqu'il y a une faible solubilité de la protéine dans la solution. En concentration faible de sels dissouts dans la solution, (donc faible force ionique) les sels interagissent avec les radicaux des protéines et aident à leur dissolution, or qu'en forte concentration saline, tout change, en effet, il n'y a plus assez de éluant (pris par les sels) donc les protéines se regroupent, on dit qu'elles précipitent (relargage).  [...]

[Biochimie] Acide trichloracétique (TCA)

Si c'est pour quantifier une activité de protéases, il faut considérer quie les peptides ne sont pas précipités, seulement les protéines de taille suffisante.  [...] Quand au rôle du tube contrôle, c'est ça. Enfin à peu près, une enzyme ne fait qu'accélérer une réaction en fait. Donc ça te permet de voir si cette réaction se produit à de manière naturelle, et la part attribuable à l'activité enymatique.   [...]

[Biologie Moléculaire] Nettoyage d'ARNs & Transfert de protéines

1) J'ai des ARNs que je voudrait nettoyer. La DO 260/280 est bonne (. 2) mais je suis apparemment contaminé par les sels du tampon RLT (extraction sur colonne) puisque ma DO 260/230 n'est que de 1,3. Est-ce que vous pensez que ça peut poser un problème pour les envoyer en Q-RT-PCR Et si oui, pour éliminer ces sels, est-ce qu'une simple précipitation à l'isopropanol (+lavages à l'EtOH) suffirait.  [...] J'utilise le kit RNeasy Mini. Il est prévu pour extraire les ARNs à la base mais on peut aussi récupérer les protéines dans le tampon RTL. Il suffit juste de faire une précipitation à l'acétone.  [...]

[Biochimie] Précipitation des protéines après fractionnement sur gradient de sucrose

Ma question est. quelle est selon vous le type de précipitation le plus adapté pour ce type de manipe Est ce que quelqu'un a déjà eu besoin de procéder à ce genre de précipitation.  [...] Pour ceux que cela intéresse (s'il y en a), la précipitation chlorforme/méthanol a bien fonctionnée, et est apparament la meilleure pour un gradient de sucrose.  [...]