• Santé - Précipitation, Concentration, Activite enzymatique

précipitation des protéines

que veut dire la précipitation des protéines et que veut dire la demi saturation des protéines car on dit que les globulines précipitent à 50% de saturation et l'albumine à +de 50% de concentration dans le sulfate d'ammonium. Que cela veut il dire.  [...] en fait la précipitation des protéines arrive lorsqu'il y a une faible solubilité de la protéine dans la solution. En concentration faible de sels dissouts dans la solution, (donc faible force ionique) les sels interagissent avec les radicaux des protéines et aident à leur dissolution, or qu'en forte concentration saline, tout change, en effet, il n'y a plus assez de éluant (pris par les sels) donc les protéines se regroupent, on dit qu'elles précipitent (relargage).  [...]

[Biochimie] Culture virus?

Les virus peuvent être purifiés grâce à diverses méthodes de biochimie (centrifugation différentielle, précipitation, dénaturation, digestion enzymatique).  [...] Cette méthode s'appuis sur le principe de l'évolution et sur la mutation aléatoires,par un géne préalablement définie, des chromosomes contenant les variables du systéme. Au bout d'un certain nombre itération, la solution converges vers la solution la mieux adaptée aux fonction du probleme.   [...]

[Biochimie] Activité enzymatique

L'activité enzymatique est dosée en premier lieu au niveau du filtrat de culture (50 ml de culture) et puis ensuite aprés avoir précipité ces 50 ml pour aboutir à la fin a 5ml de précipité.  [...] Il faudrai également savoir, si la précipitation n'endommage pas la protéine et donc si il n'y a pas une perte d'activité catalytique. Pour cela il faudrai determiner l'activité spécifique, avant et après précipitation.  [...]

Extraction ADN phenol : température de centri

Mais si quelqu'un pouvais m'éclairer sur le rôle de la température (par exemple sur la séparation d'avec les protéines, mais aussi l'extraction préférentielle de l'ADN vs ARN peut-être) ce serai super.   [...] ps. je fais homogénéisation dans du TE - lyse enzymatique (prot K-SDS) puis mécanique avec phénol/chlo pH8- un second phénol/chlo puis un chloroforme -RNase- précipitation à l'éthanol absolu - lavages -resuspension dans l'eau.  [...]

real time pcr

Au passage, si tu obtiens des profils de PCR complètement bizarres et affreux en faisant comme tu dis, méfies-toi. Je faisais grosso-modo la même chose que toi et il s'averait que la concentration en sel de ma sauce n'était plus du tout adaptée pour la RT et la PCR. D'où précipitation nécessaire.  [...] Donc bon, si on met assez de trizol et que l'on laisse incuber assez longtemps on a pas de contamination. D'ailleurs, je me suis mal exprimé en disant bouffer. Ca n'est pas une dégradation de l'ADN mais simplement une séparation dans les phases. On a même reussit à faire des PCR à partir d'extraction trizol (m'enfin c'est lourdingue à faire).   [...]

Antiseptiques, désinfectants

Concernant l'eau distillée elle n'a (théoriquement) pas de minéraux et est composée (de molécule H2O, ions H3O+ et HO- seulement) contrairement à l'eau du robinet... ce qui limite significativement les réactions possible et donc supprime la précipitation (dans la majrité des cas).  [...] L'association à des sels de calcium entraine la précipitation du détergent, et de ce fait modifie la concentration (puisqu'il précipite, il y aura moins de détergent pour attaquer les bactéries).  [...]

[Biochimie] Protocole de purification d'une protéine, vos avis

Pour chaque fraction récoltée, on mesure l'activité enzymatique pour repérer la solution la plus active en beta galactosidase.  [...] à éliminer le sulfate d'ammonium de la précipitation. Si la concentration en sel est trop élevée, la protéine ne s'accrochera pas à l'échangeuse d'ions.  [...]

[Biologie Moléculaire] le gel idéal??

Je ne sais pas ce que tu veux faire avec ton ADN, mais si tu le quantifies A 260 il faut d'abord que tu degrades l'ARN et que tu repurifies l'ADN, sinon ta concentration va etre plus que fausse. Generalement dans les extractions old school il y a une etape de traitement a la RNase avant la precipitation.  [...] C'est inutile de diminuer encore la concentration en agarose dans le gel. Les fragments d'ADN génomique sont simplement trop gros pour être résolus dans un gel d'agarose en électrophorèse classique. Mais ce n'est pas ce que vous souhaitez faire, donc pas de souci à avoir.  [...]

[Zoologie] HELP!ma petite chatte Loola va tres mal. Elle a du sang dans l'iris et reste prostrée

ça permet d'avoir une idée de l'évolution en fonction du jour et de la nuit, des périodes pré-prandiale et post-prandiale, des heures de plus grande activité, etc. Et c'est assez espacé pour ne pas faire que ça. D'un autre côté, c'est pas forcément pratique pour quelqu'un qui travaille, donc faites comme vous pouvez.  [...] Sinon je vous le redis. En médecine (humaine et j'imagine aussi animale) il ne faut pas confondre vitesse et précipitation. Agir vite ne veut pas dire agiter les bras dans tous les sens en espérant qu'il en ressortira quelque chose. Je ne vous reproche pas votre activité mais pour le bien de votre animal et le votre, calmez vous, faites confiance.  [...]

[Biochimie] migration sds page

La précipitation des protéines dans de l'acétone et la reprise dans de l'urée m'a toujours donné des résultats pourri, jusqu'à ce que je change de bouteille d'acétone. Depuis même, j'évite l'urée au maximum et j'utilise de préférence du laemmli. Depuis, aucun soucis.  [...] je ne connais pas le kit d'extraction que tu utilises mais est ce que ça ne serais pas plutôt lui qui est pourri. Je veux dire, pour une raison ou une autre (trop vieux, pas bonnes conditions de stockage...) est ce que le pH des tampons de ton kit n'aurait pas varié, ou il n'y aurait-il pas eu précipitation ou concentration (du a une évaporation) en sel (je parle toujours des tampons).  [...]