• Santé - Position, Résistance, Plasmide

[biologie moléculaire] Numérotation d'un plasmide

Quant à la position du gène de résistance, il faut veiller à ce qu'il soit pas trop près de la MCS, suffisament loin du gène rapporteur s'il y en a un- pour éviter que le gène de résistance soit exprimé à partir du promoteur qui précède la MCS- et qu'il y ait un terminateur après pour que les transcrits du gène de résistance n'altèrent pas la réplication.  [...] Les genes de resistance sont sous le controle de quel type de promoteur tu peux me donner un exemple parceque souvent sur une carte de plasmide le promoteur du gène de resistance n'est pas placé du coup parfois même je me demande comment sa marche.  [...]

[Génétique] Enzyme de restriction, vecteurs

Le petit chiffre est la position du site de coupure par l'enzyme de restriction. On commence à numéroter les bases arbitraitrement à partir d'une certaine position (ici il semblerait qu'on commence à numéroter à partir du début de la partie codant la résistance à la tétracycline), et on fait le tour du plasmide en numérotant les bases.  [...] Pour compléter on peut dire que les sites présents sur cette carte sont les sites de restriction uniques du plasmide mais il doit en contenir plein d'autre. Tu pourras trouver plus de renseignements sur lifelab plasmid database si tu veux.  [...]

[Biochimie] Calculer la taille d'un fragment dans une carte de restriction

Mais là je ne me servirais même pas de ça. Tu as un plasmide rond dont tu connais la taille, un insert dont tu peux connaitre la taille d'après le puits 1, et tu peux découvrir la position des sites claI et PstI dans cet insert par les 2 et 3.  [...] Du puits 2, tu vois que t'as deux sites de coupure ClaI dans ton plasmide + insert. Hors le plasmide seul n'en a qu'un. Conclusion, ton insert a aussi un site de coupure ClaI. Tu peux donc donner une position possible à ce site dans ton insert. Tu fais pareil avec PstI et ainsi tu pourras savoir la taille des différents fragments.  [...]

[Biologie Moléculaire] Ligation

ça ne me semble pas logique, car le plasmide ouvert ou non, s'il est présent dans la bactérie, permet de résister à l'ampicilline et permet donc aux colonies de se développer dans la boîte. Le gène de résistance de l'ampicilline n'étant pas localisé dans la zone de coupure.  [...] Bon je ne comprends pas alors pourquoi mon prof m'a dit que si le gène était là et que le plasmide soit ouvert ou non,il pouvait s'exprimer quand même. Car à la base j'étais partie justement dans l'hypothèse que si les plasmides n'étaient pas refermés et bien la bactérie ne pouvait pas pousser sur un milieu avec de l'ampicilline car il n'y avait plus la résistance, d'où l'utilité donc de ce témoin... Ralala, ça m'a embrouillé du coup.  [...]

[Microbiologie] Hybridation Southern Blot

Si c'est pour connaître la séquence de ce gène et sa position... A priori vous parlez d'un gène de résistance. Pourriez-vous nous en dire plus.  [...] J'imagine que dans le cas d'un gène spécifique (ex. enzyme s'attaquant à un antibiotique ou créant un repliement particulier sur d'autres protéines), on peut effectuer une RT-PCR à partir des bactéries cultivées en condition de résistance On procèderait ensuite à une migration sur gel d'agarose et on repère les bandes de forte expression.  [...]

Prévention chez l'homme par les antiviraux : oseltamivir et péramivir | Dossier

Les études génétiques des isolats aviaires et humains de clade 1 de 2004-2005 en Asie, montrent une substitution d' acide aminé à la position 31 de la protéine M2 du virus A ( H5N1 ). cette mutation confère invariablement une résistance aux adamantanes (WHO Global Influenza Program 2005 65 ).  [...] Bien que des cas de résistance du virus A (H5N1) aient été signalés chez des patients ayant reçu des doses thérapeutiques ou prophylactiques d'oseltamivir (Le, Kiso et al. 2005 38 ) (de Jong, Tran et al. 2005 14 ), il n'a pas été démontré à ce jour de résistance primaire du virus à cet antiviral.  [...]

Carte de restriction d'un plasmide

Question confuse. Dans un plasmide recombinant on a un vecteur et un insert. L'ADN génomique humain a une taille d'environ 3 000 000 000 Nt. Mais je suppose que c'est la taille de l'insert du plasmique recombinant que tu veux.  [...] Bonjour à tous j'ai également un problème au sujet d'un exercice sur les cartes de restriction j'ai mis le fichier en question, il s'agit de la fin de l'exercice 1 de ce TD ou il faut donner la carte de restriction du plasmide pk rec.  [...]

[Biologie Moléculaire] Programme de clonage

- Deuxièmement, lui demande de construire ton plasmide. Tu lui donnes ta PCR avec les deux sites de restriction, et de l'autre ton plasmide cible avec tes deux sites. Et tu récupère la séquence totale de ton nouveau plasmide. Je ne m'embette plus à faire ça sur papier et à vérifier 20 fois si j'ai fais une erreur de phase ou autre en tapant mes séquences vu que tout est déja sur le mac.  [...] Je vous donne un exemple. en voulant cartographier le plasmide pEGFP-N1 de Clontech ( http.//www.clontech.com/images/pt/di...s/PT3027-5.pdf ), j'ai remarqué qu'après un Scan, le promoteur CMV n'apparaît pas. En effet, la séquence consensuelle diffère de celle de la librairie d'un seul nucléotide (en position 509 de votre séquence, il y a un C, alors que c'est un G dans la séquence consensuelle).  [...]

Carte de restriction

Je ne vois pas en quoi une représentation linéaire d'une carte de restriction diffère de celle en représentation circulaire. Prenons un exemple concret où le 1er site de restriction se situe en position 278 sur le plasmide circulaire et le second en position 778 dans le premier cas de figure.  [...] Le second cas de figure peut alors être positions 278 et 3278, ce qui donne bien 2 cartes distinctes avec un plasmide circulaire A. Sur un gel d'agarose, on ne peut distinguer en l'état entre ces 2 possibilités car on a dans les 2 cas un fragment de 500 bp et un de 3000 bp visualisé après coloration au BET.  [...]

Manoeuvre cardio

Le but d'une telle manoeuvre est d'augmenter la résistance artériolaire périphérique, et donc la postcharge. En augmentant la postcharge et la résistance, on va diminuer l'intensité des bruits de Korchkoff (ou murmurs) - s'ils existent - qui attestent d'un écoulement turbulent (régurgitation aortique/sténose aortique, régurgitation mitrale, shunt ventriculaire.  [...] L'enfant va alors naturellement adopter cette position pour retrouver un meilleur souffle. en augmentant la résistance périphérique, il augmente sa postcharge, et augmente ainsi la pression intraventriculaire gauche, de manière à inverser - ou du moins atténuer - le gradient de pression VD-VG, et donc l'intensité du flux sanguin à travers le septum IV (qui sera alors plutôt redirigé vers l'ostium pulmonaire).  [...]