• Santé - Positif, Fragment, ADN, Signal

[Biologie Moléculaire] Témoins positifs et négatifs PCR

Cela permettra de voir si un de tes composants est contaminé avec un ADN qui peut produire du signal, du coup si tu as un signal dans ton contrôle négatif, tu ne sauras pas si le signal obtenu dans tes échantillons est spécifique ou lié à une contamination (permet donc d'éviter les FAUX POSITIFS).  [...] Le contôle positif le plus courant est d'ajouter un fragment d'ADN connu dont tu es sur qu'il produira le signal attendu. De la même manière, si tu n'as pas de signal dans ton contrôle positif tu ne sauras pas si tes échantillons sont négatifs ou si l'amplification n'a pas fonctionné (permet donc d'éviter les FAUX NEGATIFS).  [...]

[Biologie Moléculaire] Clonage en plasmides de grande taille via Sfi I (astuces)

la digestion je la fais géneralement avec 1,5 µl d'enzyme 1Hà 37°C. mais comme le signal obtenu après dépos sur gel est trop faible, j'ai augmenté la quantité d'ADN digeré (80µL dans 350 final) avec 5µl d'enzyme de digestion 1h 37°C(j'ai essayé d'amplifier le fragment par pcr, ça ne marche pas).  [...] après dépos sur gel le signal raltif à mon fragment d'interet reste faible (rapport incorrect avec l'autre fragment )mais les bandes plus visibles pour faire l'élution des bandes(kit gel extraction). j'ai déposé un aliquot à la fin d'élution j'ai eu encore un signal très faible (21ng/µL).  [...]

Notion de gène

On pourrait comparer le gène a une cassette, on peut lire la bande magnétique dans un sens ou dans l'autre et avoir des son qui on des significations différentes, il paraîtrait même qu'il existe un certain nombre de gènes chevauchants ici l'information serait différente a cause du point de départ ….  [...] c'est là qu'est l'ambiguité pour moi... tu parles d'un fragment d'ADN...alors que moi je dirais que le gène n'est pas le fragment d'ADN mais une information contenue dessus ( car un seul fragment d'ADN semble pouvoir contenir plusieur genes).  [...]

Mutagenèse dirigée : un Nobel pour des souris mutantes

C'est l'utilisation de deux sites loxP dans le même sens qui a été le plus vite exploité. En effet, on voit bien que dans ce cas là, la Cre excise le fragment d'ADN situé entre les deux sites loxP. On peut donc contrôler la survenue de la mutation en contrôlant l'expression de la Cre.  [...] Ce nouveau système exploite le fait que la Cre inverse l'orientation d'un fragment d'ADN flanqué de deux sites lox en position têtes bêches. Il exploite aussi le fait que la Cre ne permet la recombinaison de l'ADN que si les sites lox sont parfaitement identiques.  [...]

[Génétique] Plusieur question?

Deux version différentes d'un même gène sont bien un allèle. Mais contrairement à l'appellation trompeuse, ils ne donneront pas une même protéine, mais une protéine différente utilisée pour une même fonction.   [...] La question est vague. Si tu possède la séquence nucléotidique, sachant que l'association 3 par 3 des nucléotiques correspond à un acide aminé, il suffit globalement de diviser le nombre de nucléotides par 3. Si tu ne possède que la protéine, il faut alors par exemple faire migrer celle-ci sur un gel SDS-page et vérifier ainsi son poids moléculaire.   [...]

[Biologie Moléculaire] PCR et température d'hybridation

Tu sais ce qu'est la Tm. la température à laquelle la moitié de ton ADN double-brin est sous formé simple-brin. La T°hybridation est donc celle où tes oligos (ADN simple-brin) s'hybrideront le mieux avec ta matrice. Si tu as, admettons, une hybridation de quelques nucléotides en 3' pas loins de ton autre oligo, voilà une bande.  [...] Ca signifie en fait que tu obtient une trainée d'adn alors qu'avec une PCR tu amplifie normalement un fragment bien précis (et tu devrais donc avoir une bande (ou plusieurs si tu utilise plusieurs amorces) et non pas une trainée d'adn).  [...]

L'existence du Yéti prouvée de manière "irréfutable" ! - Page 2

Il est possible d'aller plus loin avec un peu de chance. les virus à intégrase peuvent avoir laissé des traces de leur passage dans le génome et comme ceux-ci sont spécifiques de certains types cellulaires, la présence d'ADN viral permet de réduire les possibilités.  [...] L'age a un effet sur le génome, ça se traduit par un raccourcissement des télomères et par des ADN mitochondriaux aberrants. Je ne sais pas si c'est suffisant pour déduire l'age d'une personne, même à 10 ans près à partir de ces effets.  [...]

[Biologie Moléculaire] Réplication de l'ADN chez les eucaryotes SOS

juste un petit hic tu me dis que le fragment de Kleenow est une enzyme amputée de sa fonction exonucléase 3'5' et pourtant dans mon cours il est explicitement écrit. Le fragment de Kleenow est une sous-unité de l'ADN polymérase I. Il a une activité polymérase 5'3' et une activité exonucléase 3'5' Ce il ne peut correspondre qu'au fragment de Kleenow car si ça avait visé l'ADN polymérase I cela aurait été elle.  [...] Mais le fragment de Kleenow est amputée de l'activité 5'3' donc cela ne peut pas etre, n'est-ce-pas Si oui cela repose le problème de savoir le que signifie. une fois la réplication terminée sur de longs segments.  [...]

Adénovirus et cre-lox

Alors pour insérer qqch (je vais faire autrement pour les demi sites, ce sera plus simple ^^ ) dans un fragment d'ADN par recombinaison Cre-Lox.  [...] Pb n°1. soit ton ADN ciruclaire contient des portions d'ADN bactérien dont il faut se débarasser, soit il faut faire des minicercles plasmidiens (minicircles en anglais je crois, je sais pas l'exacte traduction en francais).  [...]

[Biochimie] Mécanisme de réplication de l'ADN

apres que adn polymerase 1 transforme arn amorce en adn quel est le role de adn poly 3 ici elle a deja fait lelongation puisque on est a la terminaison de quel fragment il parle.  [...] ces amorces sont ensuite detruit et remplacees par de l'adn puisque la synthese du fragment suivant a amene e 3'OH apparie necessaire. Voila un petit resume,j'esper qu'il va t'aider un peu.  [...]