• Santé - Plaque, Inflammation, Cellules

athérosclerose

- concernant la formation des plaques de LDL...je ne comprends pas très bien...j'ai lu. le LDL veut rentrer dans la cellule pour exercer une activité endocrine mais s'il n'est pas attaché à la bonne apolipoprotéine il va dans la paroi artérielle quelqu'un pourrait-t-il m'éclaircir.  [...] pour ta première question la plaque d'athérome commence par une inflammation avec recrutement de macrophages et cellules conjonctive, cette inflammation va passer au stade de fibrose dans la plaque stable.  [...]

[Immunologie] Il17

ma question se centre principalement sur l'implication de la voie TH17et toute la cascade des reactions biochimiques(recepteur...) ds la reaction inflammatoire due a ce parasite en fin d'immmunodiagnostique precose. cela represente une ebauche de mon etude de memoire. je vs remercie d'avance.  [...] Ce que je sais c'est qu'il existe une catégorie de TH (lymphocytes T helper). les lymphocytes TH17. Ces cellules produisent, en réponse à leur activation par l'interleukine (IL)-23, de l'IL-17, de l'IL-6 et du TNF-1 et semblent impliquées l'inflammation dans de nombreuses maladies auto-immunes ou dysimmunitaires, telles que la sclérose en plaque, la polyarthrite rhumatoïde et les maladies inflammatoires chroniques intestinales (MICI).  [...]

[Biologie Cellulaire] co-culture les cellules vont-elles interagirent??

Sur une mono-couche de cellules stromales adhérente et à 80% confluente (dans une plaque 6 puits) nous aimerions co-cultiver pendant 3 jours, des cellules B immatures appelé cellules transitionnelles.  [...] Par contre j'avais pensé à centrifuger légèrement la plaque 6 puits pour faire tomber les cellules transitionnelles au fond et favoriser la rencontre avec les cellules stromales. Cependant j'ai peur qu'au début et à la fin de la centrifugation mon milieu ne s'échappe des puits...Qu'en pensez-vous.  [...]

[Biologie Cellulaire] PFA fixation

N.B. J'avais fait 3 lavages après fixation à la PFA...Normalement après fixation on en censé stockée nos plaques à 4°c pour faire les IF après mais cette fois ci...étant donné que les deux points se trouvaient dans la même plaque et donc j'ai été obligé de remettre la plque à 37°c sans retirer les lamelles des cellules pour le point 24h.  [...] . La PFA fixe les protéines de tes cellules en creant des liaisons covalentes... c'est assez solide et même si tu a mis tes cellules a 37 plutôt qu'a 4 la dénaturation doit être assez limité... Je te conseille d'essayer tu vas vite savoir après tes immuno si t'arrive a marquer quelque chose mais je pense qu'il n'y aura aucun problèmes (perso j'ai laisser des plaque a 4 °c pendant 6 mois et fait mes marquages après c'etait niquel...).  [...]

[Biologie Cellulaire] Problème test MTT et différenciation

Mon protocole est le suivant. dans une plaque 96 puits incubé 24h pour les cellules HepG2 et 48h pour les cellules SK-N-BE(2) à l'avance (à une concentration de 60 000 cellules/puits), je retire le milieu complet (avec SVF) de mes puits puis je dépose le traitement (molécule diluée dans du milieu incomplet.  [...] Je réalise également une différenciation des cellules SK-N-BE(2). pour cela j'ensemence une plaque 48 puits à 40 000 cellules/puits dans du milieu complet avec 10% de SVF le jeudi, le vendredi je change le milieu complet + 10% SVF et j'ajoute 10 µM d'acide rétinoïque.  [...]

[Biologie Cellulaire] Lipofectamine 2000 et antibiotiques ?

Je dois donc procéder à une inactivation par RNA interférence sur des cellules HeLa, je compte les transfecter à l'aide de la lipofectamine rnaimax en plaque 6 puits.  [...] Petite remarque, je n'ai pas mentionné que je procède à une transfection forward, c'est à dire que je place d'abord le siRNA+Lipofectamine en plaque 6 puits et que j'y dépose mes cellules 20 minutes après. Dans ce cas, mes cellules ont-elles eu le temps d'adhérer à la surface Changer le milieu ne risquerait pas de les décoller.  [...]

[Biologie Moléculaire] Ratio 260/230

Pour avoir utilisé le kit Qiagen et le nanodrop, je peux seulement vous dire qu'à chaque que j'avais une concentration faible et un mauvais ratio 260/230, c'est que mon ARN était dégradé. Il est effectivement très rare d'avoir une contamination à 230 nm avec les kits qui sont plutôt bien mis au point.   [...] une petite remarque concernant le ratio. il est très important de le calculer pour connaitre le degré de pureté de votre ARN. c'est une sorte de témoin pour votre manipulation.   [...]

[Biologie Cellulaire] protocole de culture cellulaire

Ensuite, lorsque tu as besoin de passer tes cellules, c'est à dire de transferer une partie de ta culture dans un nouvelle flasque (pour maintenir un stock) ou même en plaque (p24,p12,p6) tu dois procéder de la facon suivante.  [...] - Tu déposes le volume désiré dans une nouvelle flasque (F25, 75 ou 175) pour passer les cellules, ou bien tu les mets en plaque si tu veux les utiliser pour une manip.  [...]

[Biologie Cellulaire] Besoin d'aide pour savoir quel test statistique utiliser

Pour vous expliquer un peu ma manip' (je donnerais peut-être trop de détails mais pour que vous ayez un maximum d'infos), je travaille sur une lignée cellulaire (MCF-7), je fais un ensemencement aléatoire (dans une plaque 24 puits, le puit dans lequel j'ensemence mes cellules est choisi au hasard sur la plaque, jusqu'à ce que tous les puits soient utilisés (toujours le même nombre de cellules)).  [...] Quelques jours après je réalise des traitements (différentes doses d'une même molécule + contrôle négatif (solvant) + contrôle positif) en triplicat, que je renouvelle 3 jours après. 3 jours après le dernier traitement j'évalue l'effet des traitements sur la prolifération cellulaire (comptage des cellules).  [...]

Lignée Jurkat et adhérence

Lors d'un tp, j'ai utilisée des cellules de la lignée Jurkat qui ont été cultivés dans du RPMI-1640 supplémenté avec du SVF. Par observation microscopique j'ai vue que ces cellules étaient adhérentes or elles sont normalement non-adhérentes. Je pense que cela peut venir de la nature de cette lignée mais je ne serai pas vraiment l'expliquer.  [...] Après, ces cellules ont était cultivée dans une plaque 24 puits à une concentration de 0.5e6 cellules/mL et lorsque j'ai fait cette observation (24h après), la concentration était de 1.4e6 cellules/mL.  [...]