• Santé - Pile, Intérêt, Plasmide

[Biologie Moléculaire] blunt-end ligation

Je dois réaliser un clonage assez classique. J'ai mon insert amplifié via la Phusion (et les amorces ne comportent pas d'ajouts d'enz de restriction en 5', c'est juste pile le gène d'intéret qui était dans un autre plasmide). J'ai mon vecteur de destination.  [...] Est-ce que je dois déphosphoriler mon plasmide Un traitement spéciale pour mon insert (a priori avec la Phusion, vu que c'est une proofreading, rien à faire de plus non).  [...]

[Biologie Moléculaire] mutagenèse dirigée

Une solution possible est de placer ton fragment dans un plasmide, puis de dupliquer ce plasmide avec des primers contenant la mutation voulue en plein centre. Avec un mismatch de seulement 1 sur 25-35 bases, ça doit jouer... Tu te retrouves avec tout un tas de plasmides contenant ton unique mutation pile là où tu la veux.  [...] Si tu as de l'argent il y a une méthode géniale. tu fais synthétiser la séquence directement, Eugogentec fait ça très bien par exemple pas pas trop cher me semble t'il. Après tout dépend de ce que tu veux faire de ta séquence ensuite.   [...]

microbiologie - CARTE DE RESTRICTION

La somme des tailles des fragments obtenus doit donner la taille du plasmide initial. Si ce n'est pas le cas, il faut penser à des sites qui donnent des fragments différents mais de même taille. Par exemple, si tu obtiens 1 seul fragment dont la taille est la moitié de la taille du plasmide, ça veut dire que l'enzyme a coupé 2 fois pile-poil au milieu (les sites sont à six heures et midi ).  [...] Une carte de restriction c'est une séquence où tu peux visualiser tout les sites de coupures des enzymes de restriction. Ça peut être une carte d'un plasmide où d'un génome. C'est utile pour savoir la taille de tes fragments obtenue après digestion avec une enzyme de restriction spécifique.  [...]

Comment lit-on un article scientifique ?!

EDIT. Pour mon stage de licence, j'avais une pile de publie assez incroyable (et pourtant je n'étais qu'en licence) et comme je devais présenter les publies en question à l'équipe, j'avais fait des fiches résumés pour chaque publie avec des notes attribuées en fonction de l'intérêt qu'elles avaient pour ma thématique.  [...] Les publis importantes sont classées en fonction des thèmes qui m'interessent dans des pochettes. C'est pas necessairement le thème principal du papier mais c'est le thème pour lequel elle m'a semble interessante. Du coup parfois je ne retrouve pas un papier, je le cherche à nouveau et je le remet dans un nouveau dossier.  [...]

[Physiologie] La Dépolarisation et l'hyperpolarisation

Déjà qu'est ce qu'une polarité et que sont les polarisations et dépolarisations AU repos, le neurone est dit polarisé, c'est son potentiel de repos à la membrane. Imaginé la membrane comme une pile électrique, on parle de polarité simplement parce qu'il y a 2 pôles (comme un aimant), on pourrait également parler de dipôle.  [...] du coup, au repos un neurone est comme une pile, les deux côtés de la membrane (interne et externe), comparables aux bornes +/- d'une pile ont des polarités qui s'opposent.  [...]

techniques de genetique - Page 2

D'ailleurs au passage, tu m'expliqueras comment ils introduisent un gene humain ou murin chez C.elegans... y'a pas de recombinaison homologue, donc pas de remplacement de gene possible.   [...] Apres, c'est fort probable qu'ils utilisent C.elegans et la droso comme tube a essai vivant pour detecter de nouveaux interacteurs/inhibiteurs etc.  [...]

pace-maker et autonomie

Il suffirait par exemple de disposer au voisinage de la batterie ( sous-cutanée) le secondaire d'un micro-transformateur, autrement dit un petit bobinage.   [...] En présentant à l'extérieur, en face de ce bobinage, le primaire du transformateur alimenté sur le secteur basse tension on devrait facilement obtenir après transformation de la tension en intensité constante une intensité suffisante pour recharger la batterie.   [...]

[Biochimie] Correspondance entre 37°C et 4°C

Pour les réactifs il y a des protéines pour certains et j'ai commencé à m'intéresser aux protéases surtout pour une autre stabilité, celle d'anticorps (pour avoir un étalon stable après utilisation). Il faudrait que je teste dessus l'effet d'anti protéases (ou anti peptidases) mais je ne sais pas trop laquelle choisir.  [...] PS. Si par malchance tu te retrouves pile poil dans cet interval, il serait plus judicieux alors de diminuer ou d'augmenter la température d'étude.  [...]

[Biochimie] extraction protéines membranaires à partir de tissu cérébral congelé (pour étude de co-IPP)

J'ai des collègues qui au lieux de mixer à l'aide d'un ultra-turrax, pile l'échantillon dans un mortier. Si ton interaction est faible, cela peut rester une alternative (attention méthode assez longue.).  [...] J'ai trouvé ce détergent. N-dodecyl-ß-D-maltoside, savez-vous s'il conserve les interactions entre deux prot membranaires (récepteur canal + protéine régulatrice) Car j'ai malheureusement lu que le CHAPS casse les interactions entre les protéines membranaires, donc ce n'est pas bon pour moi ( Useful for solubilizing membrane proteins and breaking protein-protein interactions ).  [...]

[Biologie Cellulaire] Potentiel de repos

En fait plus la membrane est perméable à un ion donné plus Em est proche du E de cet ion, sachant que la membrane plasmique à une forte perméabilité potassique on a Em proche de Ek.  [...] le point de connection cyt est à l'intérieur de la cellule. Il est en l'air comme on dit donc la pile n'est pas branchée =. pas de ddp.  [...]