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[Biologie Cellulaire] Colorant d'intégrité des membranes cellulaires

J'ai besoin d'un colorant pour vérifier l'intégrité de la membrane cellulaire d'une algue sur laquelle je travaille, après avoir trempé le thalle dans différents solvants organiques.  [...] Pas évident sur une algue... Tu connais la composition de paroi/membrane A partir de là ça permettra de se diriger vers un colorant plus qu'un autre.  [...]

coloration de Gram et glycogène

les peptidoglycanes de la paroi de certaines bactéries retiennent le Gram c'est-à-dire un colorant violet. on parle alors de bactéries à Gram positif.  [...] Chez les autres (bactéries à Gram négatif), les peptidoglycanes sont moins nombreux et couverts par une membrane externe composée de lipopolysaccharides qui retiennent un colorant rouge.  [...]

alcool à 70°?

Non ça c'est la mauvaise explication. Prend du violet de gentiane et de l'éthanol, tu verras que ça ne décolore pas si bien. En fait l'éthanol déstabilise la membrane et provoque la fuite du colorant.  [...] La coloration de Gram sert à différencier les structures de la paroi bactérienne, non de la membrane plasmique. Le violet de gentiane reste prisonnier de la structure polyosidique du peptidoglycane plus épaisse chez les Gram+. Chez les Gram-, cette structure ne retient que peu/pas le pigment au lavage à l'alcool même après mordançage au Lugol.  [...]

Définition | Coloration de Gram - Méthode de Gram | Futura Santé

La coloration de Gram est fondée sur l'action successive d'un colorant d'aniline, le cristal violet, d' iode puis d'un mélange d' alcool et d'acétone. Dans un premier temps, le colorant pénètre dans la paroi et le cytoplasme. Dans un second temps, l'iode réagit avec le colorant et le rend insoluble.  [...] La perméabilité plus grande des bactéries à Gram négatif à l'alcool permet la décoloration. Les bactéries à Gram positif restent colorées en violet ou mauve. Une contre-coloration (par exemple en rose) permet de visualiser à nouveau, les corps cellulaires des bactéries à Gram négatif.  [...]

utilisation imagej

sur une preparation microscopique, j'ai coloré les bacteries avec le colorant FM4-64 qui colore la paroi bacterienne en rouge.  [...] Si tu n'as pas de repère, tu peux aussi réaliser une mesure relative en comparant les septa entre eux... Mais sinon sans repère, je ne pense pas que imagej soit en mesure d'estimer la longueur.   [...]

Matériels et méthodes | Dossier

Cette étape se fait à 24 V pendant 3 heures et à température ambiante. La qualité du transfert est vérifiée en colorant la membrane avec une solution de rouge de Ponceau à 1%, ce qui permet de visualiser l'ensemble des protéines présentes sur la membrane de nitrocellulose.  [...] L'anticorps primaire polyclonal de chèvre (TEBU), correspondant à l'isoforme de la protéine kinase C recherchée, est dilué 1000 fois dans la solution pour western blot à laquelle il est ajouté du lait et de la sérum albumine bovine concentrée à 1%, puis il est mis en contact avec la membrane pendant une nuit à 4°C ou pendant 1,5 heure à température ambiante.  [...]

[Identification] Test d'identification bactérienne

Je voudrais savoir comment fonctionne le teste du KOH. Je sais que, normalement, les bactéries GN sont KOH+ et inversément, mais je ne comprends pas le fonctionnement.   [...] - L'alcool provoque la dissolution des lipides (les bactéries Gram négatives sont riche en lipides et ont une paroi plus mince) et la bactérie, devient poreuse et laisse échapper le colorant.  [...]

[Biologie Cellulaire] chute du potentiel mitochondrial

La Rhodamine est un colorant qui rentre dans les mitochondries et s'y distribue en fonction du potentiel de membrane, phénomène que tu peux visualiser par microscopie.  [...] Si ta chaîne respiratoire ne fonctionne plus, il n'y a plus de potentiel de membrane. La distribution du marqueur va changer.  [...]

Coloration archeol

Je suis confronté à un problème, celui de trouver un colorant chimique pour des lipides présents sur la paroi des archées (archaea). Ces lipides sont appelés Archeol et sont des analogues des diacylglyceroles (DAGs).  [...] vous voulez colorer les lipides de la paroi spécifiquement, ou alors la paroi elle même.  [...]

Bientôt de nouveaux antibiotiques grâce à la découverte d'enzymes bactériennes ?

Une classe d'antibiotiques particuliers, les quinolones, sont connues et utilisées en médecine depuis près de cinquante ans. Elles ont pour caractéristique d'inhiber spécifiquement et efficacement la protéine topoisomérase IIA des bactéries. Cette enzyme, aussi appelée gyrase, a pour rôle de modifier l'enroulement de l' ADN au sein de la bactérie, un processus essentiel lors de la multiplication cellulaire ou lors de l'expression des gènes.   [...] En effet, l'efficacité de cette molécule a été testée sur un large spectre de bactéries et elle semble efficace, à l'image des quinolones, sur les deux grandes classes existantes. aussi bien les Gram-positives (positives au colorant de Gram) à l'image de Staphylococus aureus ( même la souche résistante à la méticilline impliquée dans beaucoup d' infections nosocomiales ), que les Gram-négatives (négatives au colorant de Gram) comme Escherichia coli, Pseudomonas, Klebsiella ou Acinetobacter, qui sont plus difficiles à éliminer à cause de la présence d'une membrane externe souvent imperméable aux molécules.  [...]