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Technique d'analyse : la chromatographie pour séparer les molécules | Dossier

Lors d'un test de dopage, on analyse soit des prélèvements sanguins, soit de l'urine. Quelle que soit la matrice biologique à analyser, les substances à détecter s'y trouvent en faibles, voire très faibles concentrations dans des mélanges complexes contenant des sels, de l'eau, souvent des protéines ou d'autres grosses molécules, qui rendent le tri difficile.  [...] Entraînées par la phase mobile, les molécules migrent le long de la colonne de phase stationnaire et en sortent à une vitesse différente selon leurs propriétés. plus une molécule s' accroche à la colonne ou a peu d'affinité pour la phase mobile, plus elle tardera à sortir.  [...]

Chromatographie

1) A propos de la ccm je veux savoir si on doit obligatoirement avoir la phase stationnaire et la phase mobile de nature differente, tel que si l'une est polaire l'autre doit etre apolaire, ou bien on peut avoir une phase stationnaire et mobile polaires non charges ou charges de meme signe.  [...] 2) On dit qu'une molecule polaire a une affinité superieur pour les milieux polaires, et une molecule apolaire a une affinite superieur pour les milieux apolaire. ( et si on a par exemple une phase stationnaire hydrophobe et la molecule dont on veux analysé est de meme hydrophobe, par contre la phase mobile est polaire, en fait je sais qu'il y aura des interactions hydrophobes entre la molecule et la phase stationnaire=.  [...]

[Biochimie] HPLC phase réverse

En tp j'ai réalisé une chromatographie liquide en phase inversée avec comme phase stationnaire de la silice sur laquelle étaient greffés des groupements octadécyles et comme phase mobile de l'eau ultra pure.  [...] Avec ce type de chromato, plus la molécule est polaire plus elle est entrainée par la phase mobile et sort en premier. Donc le fructose est le sucre ayant le moins de groupements OH il est donc peu retenu par la phase stationnaire et sort en premier.  [...]

[Biologie Moléculaire] Séparation des protéines: HPLC!!

donc les molecules apolaires vont etre retenues or les polaires,j'ai dans mon cours qu'elles vont rester dans la phase mobile, 1)pourquoi elles ne seront pas eluer.  [...] en phase inverse, les composés polaires sont élués en premier (pour des protéines, les plus petites sortent d'abord). Ensuite, avec l'augmentation de solvent polaire dans le phase mobile (methanol, acetonitrile) les molécules hydrophobes (ou les grosses protéines) seront éluées.  [...]

[Microbiologie] Hplc

j'ai appliqué l'hplc pendant un stage. j'ai séparé des produits de fermentation ( glucose, fructose, ethanol, glycérol..). La colonne à un contre ion H+ et le solvant est une solution d'H2SO4, l'élution est isocratique. Mais je ne comprend pas comment les molécules sont séparés Est-ce par leur taille ou grâce a autre chose.  [...] C'est une méthode très précise, après suivant la phase stationnaire et la phase mobile utilisé les premières molecules a sortir sont les plus hydrophiles ou phobe.  [...]

Dosage de sucres pas HPLC

Les cations de la phase mobile sont plutôt repoussés car ils ont la même charge que la phase stationnaire, ce n'est donc pas discriminatif pour ces ions là. Alors que pour des molécules anioniques, plus elles sont chargées, plus elles intéragissent avec la phase statio, elles sont donc plus ou moins retenues. c'est discriminatif.  [...] Heu, ne serait-ce pas le contraire Les contres ions sont en général de charge opposée à celle de la phase stationnaire, puisqu'ils doivent saturer la phase mobile pour l'elution du produit, non.  [...]

[Biochimie] Chromatographie

Bonjour tout le monde,dans la chromatographie pouvez vous me dire ce que c'est qu'une phase mobile et une phase stationnaire. Et me determiner qu'elle est la phase mobile et stationnaire dans la chromatographie de partage. merci bien.  [...] Dans la chromatographie de partage,la phase mobile est le solvant qui passe a travers une couche de grains d'amidon ou de la silice entoures d'eau formant la phase stationnaire.  [...]

[Biochimie] Chromatographies

la chromatographie est une méthode d'analyse, surtout pour séparer des constituants d'un mélange. par entrainement au moyen d'une phase mobile, liquide ou gaz le long d'une phase stationnaire (fixe) solide ou liquide tt ces parametre ce change selon la chose que tu veus la séparrer ( par exemple. des fragement d'ADN ou des proteines ou etc).  [...] je ne suis pas d'accord avec Trok.la CCM consiste à fixer le mélange à séparer sur un support appelé phase stationnaire (le plus souvent un gel de silice déposé en couche mince sur une plaque d'aluminium ou de verre) qui sera entrainé par une phase mobile (éluant) qui est un liquide (solvant apolaire) qui migre par capillarité sur la plaque.  [...]

Séparation des pigments végétaux par partage entre solvants

l'acétone,le méthanol et l'ether de pétrole,constituant la phase mobile,sont des molécules apolaires.Ceux-ci vont entraînés les molécules qui présente une plus grande affinité pour eux.  [...] Il ne s'agit pas d'une chromato de partage. En fait j'ai un mélange de solvants dans de l'éther de pétrole. Je le place dans une ampoule à décanter. Puis j'ajoute successivement de l'eau, de l'acétone. J'élimine la phase inférieure contenant les xanthophylles.  [...]

maîtrise de la température d'HPLC

or si tu augmente la température, tu modifies ce coefficient de partage et donc ton temps de rétention (en général tu augmentes la proportion en phase mobile et donc tu diminues le temps de rétention).  [...] Les paramètres à prendre en compte sont donc uniquement le gain de résolution (essai / erreur sur différent run) et bien sur la stabilité de ta molécule (chauffer une molécule très thermo labile n'est pas une bonne idée..).  [...]