• Santé - Molécule, ADN, Digestion

[Biologie Moléculaire] La carte de restriction

disons que nous avons une molécule de l'ADN linéaire de 15 kpb la digestion de celui-ci par trois enzymes nous donne quelque chose comme ça.  [...] PS. je suis sur mon téléphone et c'est trop galère de regarder les pièces jointes, mais j'espère quand même te lancer sur une piste. C'est plus de la logique que de la bio mol.   [...]

[Biologie Moléculaire] TP digestion ADN par enzymes de restriction par électrophorèse sur gel d'agarose

Tu digères ton ADN de phage, tu te retrouves donc avec plusieurs morceaux d'ADN de différentes tailles que tu sépares sur un gel d'agarose pour voir leurs tailles (en comparant avec le marqueur de poids moléculaire qui sert d'étalon) et savoir combien de sites de restriction il y a dans ton ADN de phage.  [...] D'accord donc si j'ai bien compris si je n'obtiens pas de fragments, c'est à dire que je reste avec la molécule d'ADN de départ ça veux dire qu'il n'y a pas eu digestion, alors que si je trouve plusieurs fragments qui sont à des positions différentes car migré de manière différente ça veux dire que mon fragment d'ADN initial a été digérer c'est ça.  [...]

[Biologie Moléculaire] Extraction de l'ADN et digestion enzymatique

[Biologie Moléculaire] Extraction de l'ADN et digestion enzymatique.  [...] Je les ai légender après en fait et pour le deuxième le professeur dit que les bandes juste en haut qui sont très claires sont de différentes tailles mais il a rien dit de plus, théoriquement nous devrions avoir une deuxieme bande en bas mais je suppose aussi qu'il n'y avait pas assez d'ADN.  [...]

real time pcr

Vous ne pouvez pas proceder avec le trizol Plus simple (autant qu'une extraction d'ADN), pas de phase de digestion de l'ADN (le trizol le bouffe)... tout pour soit quoi.  [...] Bon, maintenant j'ai refais des RTqPCRs hier et j'avais oublié un truc. Dans le kit qiagen que j'utilise pour mes RTs il y a une phase dite G-wipe qui dégrade l'ADN génomique. Comme ca, la question est réglée, je fais comme vous (seulement avec ces merveilleux kit maudits de chez qiagen, on ne sait même plus ce que l'on fait tellement c'est simple.).  [...]

[Biologie Moléculaire] Electrophorèse (ADN sur Agarose) et Bromure d'éthidium

PS. Juste à titre indicatif, j'ai découvert cette année le SYBR Safe qui permet également de visualiser l'ADN sur gel. On ne visualise pas l'ADN aux UV mais avec une lumière bleue, ce qui évite les problèmes de dégradation de l'ADN par les UV. C'est une molécule qui a l'avantage d'être beaucoup moins (ou pas du tout ) cancérigène que le BEt, et qui ne migre pas car pas chargé.  [...] en ce qui concerne l interference du BET dan la migration, comme on voulait separer de l'ADN issu de digestion plasmidique, la conformation de l ADN est aussi importante (circulaire, linéaire, superenroulée) et je pense que le fait que le BET soit présent avant la migration et s'intercalle doit modifier un peu cette conformation.  [...]

Il y a t'il de l'ADN animal dans les excréments humains ?

Je me suis demandé récemment si la digestion de la viande animale qu'on mange détruit tout l'ADN de ses animaux ou s'ils subsistent toujours de l'ADN dans nos excréments qui pourraient même encore indiquer quel genre d'animal on a mangé Je sais aussi qu'on y retrouve de notre ADN mais est ce qu'il y a une interférence entre les deux s'il subsiste de l'ADN animal.  [...] A part le réseau de micro-tubule et d'actine, qui permettent de donner une direction (et la lecture ADN en ARN et ARN en protéine), le reste des protéines (et molécules) qui nagent dans le cytosol (et le noyau) aussi ne se déplacent finalement que par des mouvements brownien. Un peu dure à imaginer, je l'accorde.  [...]

[L1 BIO] TP Biologie moléculaire

Puis après on décide de faire une carte de restriction,en faisant une digestion enzymatique par l'enzyme de restriction xho1,cette enzyme se trouve de base dans le plasmide recombinant et aussi dans la séquence de l'ADN de la GFP mais pas dans celui de la Dsred.  [...] La digestion te donne des fragments d'ADN. L'electrophorèse les classe selon leur taille. Le résultat du gel d'electrophorèse te donne donc seulement des bandes, chaque bande correspond à des fragments de plasmides d'une taille donnée.  [...]

[Divers] Epissage

Il existe donc un mécanisme d'excission et de recollage de l'ARN messager immature. l'épissage. Donc pour résumer ton expérience. repérer un gène, le décoder, faire en sorte qu'il soit surexprimé spécifiquement (pour pouvoir trouver sa protéine correspondante) et le reste en découle.   [...] L'hybridation de l'ARNm avec l'ADN génomique correspondant suivi de l'action d'exonucléase permet d'obtenir les fragments d'ADN génomique correspondant aux exons. Si l'ADN génomique reste entier après digestion, c'est que l'ARNm n'est pas épissé.  [...]

[Biochimie] Calculer la taille d'un fragment dans une carte de restriction

Dans un exercice, on nous demande de calculer la taille des fragments d'adn produit de la digestion en utilisant les fragment d'adn marqueurs de taille.  [...] Cette relation n'est pas fixe car elle va dépendre de tes conditions de migrations, qui sont fixés par le voltage appliqué, ainsi que l'intensité dudit courant, et la concentration de ton gel. Donc on la calcule à chaque fois.   [...]

[Biologie Moléculaire] Construction Banque ADNc

Une ADN polymérase I vient ensuite remplacer l'ARN par de l'ADN, à partir des cassures. Correct Ou bien dans le cas où la RNAse a détruit la quasi totalité comme dit ci-dessus, la Pol I part des amorces vu qu'il n'y a pas de cassures.  [...] Je vous avoue être embrouillé sur la question car on nous a dit que la RNAse agit par à-coups (là où la méthode chimique à la soude est agressive et détruit tout l'ARN d'un coup) et induit une série de cassures dans l'ARN, mais si c'est à la manière du NaOH, une ADN Pol I véritable (donc pas Klenow) ne conviendrait pas. Ou je me trompe.  [...]