• Santé - Méthodes, Protéines, ARNm

[Biologie Moléculaire] purification de ARNm procaryote

je dois faire une etude du transcriptome d'une bacterie,par la methode rna seq,pour creer ma librairie je dois purifier mes ARNm procaryotes des ARNm eucaryotes et autres ARN,ADN,ma question est donc comment isoler mon ARNm procaryote de restes des ARNs(ARNm eucaryotes,ARNr...).  [...] Par la suite, tu cherches à séparer des ARNm procaryotes d'eucaryotes. Ici c'est une autre histoire. Tu pourrais imaginer des méthodes visant à identifier les protéines fixées sur les ARNm. Par exemple, chez les eucaryotes la maturation de l'ARN fait appel à un épissage qui laisse des traces sur l'ARNm.  [...]

La génomique et la viande bovine | Dossier

La génétique et les conditions d'élevage déterminent ensemble et en interaction les caractéristiques des animaux de ferme, parmi lesquels les bovins. La génomique autorise une vision globale et exhaustive des caractéristiques des gènes (génomique structurale) et de leur expression sous forme de transcrits (ou ARNm pour ARN messager) et de protéines (génomique expressionnelle).  [...] La deuxième moitié du XX ème siècle a vu le développement des méthodes d'étude de l' ADN. Il semblerait que le XXI ème siècle sera celui des biotechnologies à haut débit d'étude des ARNm et des protéines. Les applications en Science de la viande sont.  [...]

Méthodes d'extraction et de purification des protéines recombinées

On dit protéine recombinante. Tu auras plus de réponses sur le forum biologie. En attendant. http.//fr.wikipedia.org/wiki/Purification_de_protéines.  [...] tu as deu méthodes d'extractions. non dénaturante (qui permet de maintenir l'activité de l'enzyme), dénaturante (si tu n'as pas besoin de conserver l'activité de la protéine).  [...]

[Microbiologie] Isolation ARNm bacterien

Je sais qu'il existe quelques kit mais je suis perplexe.. pour l'ARNm d'eucaryote je comprend que la selection se fait par la queue polyA de l'ARNm mais les procaryotes n'en ont pas.. Sinon les methode que j'ai vue son des methodes de précipitation de l'ARNm dans un pool d'ARN total.  [...] Toutes les méthodes d'extraction d'acides nucléiques marchent pour l'extraction des ARN totaux. Je ne connais pas de méthode qui isole spécifiquement les ARNm.  [...]

[Biochimie] dosage spécifique des protéines!

j'aimerais avoir des explications, assez détaillées si possible (définition, principes...), sur trois méthodes de dosage des protéines, qui sont les méthodes immunonéphélémétrique, radioimmunologique et immunoenzymatique. voilà.  [...]

[Biochimie] Conservation par azote liquide

Ces méthodes sont suffisantes pour faire ensuite des extractions d'ARN ou de protéines, si tu veux faire des coupes histo, il y a d'autres méthodes.  [...] ouais c'est ce que j'allais dire, pour l'intestin qui est très très fragile si on veut récupérer des protéines et/ou des ARN, il vaut mieux le rincer avant a l'intérieur (avec PBS ou sérum phy) et ne pas trainer pour le congeler.  [...]

[Biologie Moléculaire] Les protéines recombinantes

Bonjour, je voudrais savoir qu'elles sont les différentes méthodes de purification des protéines recombinantes. je sais qu'il y a la chromatographie d'affinité mais je n'arrive pas à trouver d'autres méthodes.  [...] il y a aussi la purification par HPLC, la purif sur gel, sur colonnes.   [...]

[Immunologie] Fixation pour immonofluorescence

Par contre ils restent visibles dans les cellules transfectées avec les plasmides contenant mes gènes d'intérets. J'ai peur que les méthodes de fixations utilisées n'entrainent une relocalisation cellulaire de mes protéines.  [...] Je ne pense pas que cela soit un problème de relocalisation cellulaire, sinon tu aurais vu le marquage mais pas à l'endroit attendu. D'autant plus que les méthodes de marquage fixent très rapidement les protéines de la cellule et c'est le but puisqu'elles permettent d'étudier des localisations cellulaires.  [...]

[Immunologie] Virologie : plusieurs virus en un

j'aimerais savoir s'il est possible de combiner plusieurs protéines issues de virus de nature différente (par exemple des protéines codées par un virus à ARN à polarité négative et des protéines codées par un virus à ADN) par le biais de la mutagenèse dirigée Si non y a-t-il d'autres méthodes pour cela.  [...] J'ai pensé (d'une façon très théorique) que l'on pouvait prélever des extraits de n'importe quel virus pendant leur phase ARN puis tous les combiner pendant cette phase (il n'y aurait donc pas de problème de compatibilité) puis les laisser coder pour des protéines diverses Est-ce théoriquement possible.  [...]

[Biologie Moléculaire] Séquences répétées inversées

Le problème est qu'on sait que le gène visé est invalidé, c'est évident, un exon entier qui ne code plus du tout les même acides aminés est assimilable à une autre protéine. C'est là où il pourrait y avoir un problème. celui de générer une nouvelle protéine avec de nouvelles fonctions.  [...] Ce système ne dégrade pas la totalité des ARNm en question ce ne serait donc pas aussi efficace que les méthodes utilisées actuellement, où on invalide brutalement le gène.  [...]