• Santé - Méthodes, Extraction, Protéine

[Biochimie] Extraction protéine cry du bacillus thuringiensis

J'ai une présentation à réaliser sur l'extraction de la protéine cry (insecticide) du bacillus thuringiensis. Uniquement l'extraction et non la culture et la purification. Le problème est qu'il existe énormément de méthodes liées à l'extraction de cette protéine, et je m'y perd donc un peu.  [...] La méthode que je choisirais pour une telle isolation serait une destruction physique (Homogénéisateur de type Dounce, presse Aminco- French...) suivie d'une sédimentation pour séparer les composants. Ces méthodes conviennent-elles à mon problème De plus, avez vous une idée du tampon à utiliser pour réaliser cette extraction (SDS ).  [...]

Méthodes d'extraction et de purification des protéines recombinées

On dit protéine recombinante. Tu auras plus de réponses sur le forum biologie. En attendant. http.//fr.wikipedia.org/wiki/Purification_de_protéines.  [...] tu as deu méthodes d'extractions. non dénaturante (qui permet de maintenir l'activité de l'enzyme), dénaturante (si tu n'as pas besoin de conserver l'activité de la protéine).  [...]

[Biologie Moléculaire] extraction à la guanidine/ digestion à la papaïne

[Biologie Moléculaire] extraction à la guanidine/ digestion à la papaïne.  [...] Je travaille sur une proteine des pili bactériens en utilisant pour isoler cette protéine (sous-unité pilE du pilus) 2 méthodes. l'extraction à la guanidine (détergent) et la digestion à la papaïne (enzyme protéolytique). Est-ce que quelqu'un saurait quelles autres applications il y aurait pour ces 2 méthodes ou autrement quelle est leur action, au niveau moléculaire.  [...]

[Biochimie] Sollution tampon votre avis

Le tanpon que tu souhaites utiliser est un tampon d'extraction donc pour moi le plus important c'est qu'il te permettes d'extraite ta protéine avec un rendement maximal et tout en gardant l'activité de ta protréine. La composition que tu as donné me parait classique.  [...] Ensuite concernant ta seconde question. Difficile a répondre sans connaitre ton protocole expérimental (composition tampon, volume tp vs volume extrait enzymatique,...). Peux tu me donner quelques élements de réponses si ce n'ai pas trop confidentiel Mais sache qu'il existe des méthodes pour changer de tampon après ton extraction pour conditionner ta protéine dans un autre tampon... (Dialyse, unité de concentration,...).  [...]

[Biologie Cellulaire] Western Blot ATM phosphorylé

J'ai déjà testé de nombreux protocoles sans succès (méthodes d'extraction différentes, migration sur petit/grand gel, transfert liquide/semi-sec..), donc j'aimerais savoir si quelqu'un possède un protocole précis ou des indications.  [...] Et, ATM est une grosse protéine, très peu abondante. Y a t-il une méthode d'extraction à privilégier de migration et de transfert.  [...]

BL21 pour production protéines et extractions

J'aimerais extraire mes proteines recombinantes de mon mutant BL21, pour cela j'aimerais eviter les methodes classiques d'extraction (tampon et sonication).  [...] J'aimerais produire de la Taq polymérase, j'ai finalement choisi la souche Mach1. J'aurais aimé une méthode d'extraction/ purification rapide, simple et efficace. Quels sont vos protocoles.  [...]

[Biologie Cellulaire] Etudier l'expression d'une protéine entre différentes cellules.

pour suivre l'expression de la protéine tu peux faire un extraction purification de la proteine dans les deux cellules séparément puis tu fait un blotting ( westerne blot pour suivre le niveau d'expression de la protéine c'est-à-dire la quantité de la protéine dans les deux cellules).  [...] pour cela tu mets les cellules en culture puis à un certain temps tu prélève les cellules et tu fait l'extraction de la protéine et purification. lorsque tu fait le westerne blot tu révélera avec des anti-corps diriger contre la protéine d'intérer. sinon tu peux faire aussi un marquage de la protéine avec des acides aminées radioactive en utilisant la technique de pulse chasse.  [...]

[Biotechnologie] Plantes transgéniques

mais le prof a refusé l'idée des plantes vaccins (pour quele cause je ne sais pas), il m'a dit de parler sur les méthodes de la création des plantes transgéniques et par la suite détailler une seule espéce, donc je suis revenue au point de départ, alors la si vous avez des espéces précises a me conseiller ainsi que des sites interessants, des documents, des livres ou quoi que ce soit concernat le sujet, ça sera vraiment agréable.  [...] On vient juste de commencer ce cours, donc pas trop d'informations...je cherhce avec cet exopsé de bien comprendre ou d'essayer de comprendre ces méthodes, et on les verra aprés en cours ou en paralléle je ne sais pas encore.  [...]

[Génétique] Extraction de l'ADN au Chelex 100

J'étudie actuellement les différentes méthodes d'extraction de l'ADN et je ne parviens pas à comprendre la méthode d'extraction au moyen de la résine Chelex 100. Est-ce-que quelqu'un qui s'y connait plus que moi pourrait me l'expliquer en termes simples.  [...]

[Biochimie] extraction protéine d'une huile ou d'une cire pour quantification

[Biochimie] extraction protéine d'une huile ou d'une cire pour quantification.  [...] extraction protéine d'une huile ou d'une cire pour quantification.  [...]