• Santé - Méthode, Protéine, Taux

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Bonjour tous le monde je ne sais pas ou poser ma question mai es que quelqu'un peut m'aider je cherche de méthode pour la teneur en chitine par la méthode de loiseleur1963 la teneure en protéine la méthode de kjeldehl et pour calculer le taux de cendre la méthode de fernendy*kim 2004 désolé mais je ne sais pas ou meter cette question.  [...]

[Biologie Moléculaire] Transduction/transfection

Je suis d'accord avec Delphinette. Après, la méthode à utiliser dépend de ce que tu veux faire. Si c'est pour une expression transitoire, il est beaucoup plus simple d'utiliser un liposome, car même avec un taux de transfection très faible, tu peux voir ta protéine exogène facilement en western-blot.  [...] Cependant sur le manuel de Promega il est dit que ce plasmide peut exprimé la protéine d'interet (que l'on aura eu soin d'intégrer) de manière transitoire ou permanente... Si c'est la séquence du plasmide qui permet ou pas son intégration dans l'ADN de la cellule, comment obtenir ces 2 sortes d'expression (transitoire/permanent) Quel facteur supplémentaire entre en jeu.  [...]

Un test urinaire pourrait suffire à repérer un cancer de la prostate

Concentration de sarcosine dans les cellules d'une prostate saine (gauche), atteinte d'une tumeur localisée (centre) et d'un cancer métastasé (droite). Crédit. Nature.   [...] La détection du cancer de la prostate se fait essentiellement par le dosage du taux sanguin de PSA. Cette protéine est normalement sécrétée par les cellules prostatiques mais son abondance peut être décuplée après l'apparition de cellules cancéreuses. Cependant, cette méthode permet difficilement de déterminer le niveau d'évolution du cancer, ainsi que sa capacité à développer des métastases ou non.  [...]

Des protéines médicaments innovantes contre les maladies de l'oeil

Ces travaux ont abouti à la mise au point d'une méthode physique de transfert d'ADN codant une protéine thérapeutique et utilisant de faibles champs électriques, surnommée électrotransfert. Ces deux équipes ont ainsi démontré, sur un modèle d'inflammation intraoculaire chez le rat, l'uvéite induite, que l'électrotransfert de plasmide (un petit ADN circulaire) dans le muscle ciliaire lisse de l'oeil, assurait une production intraoculaire locale et soutenue de protéines dans les milieux oculaires situés de part et d'autre du muscle.  [...] Les chercheurs ont administré par cette méthode un ADN plasmidique codant une protéine anti-TNF-a, qui neutralise une seconde protéine très inflammatoire, le TNF-a. Ils ont ainsi obtenu la production de taux thérapeutiques de protéine anti-inflammatoire anti-TNF-a dans les milieux oculaires, production associée à une inhibition majeure des signes cliniques et histologiques de l'uvéite.  [...]

Petite énigme à vous soumettre...

C'est là que l'expérimentation RMN peut être intéressante. Prenons la méthode RMN par différence de transfert de saturation (STD-NMR). Cette méthode présente l'avantage de caractériser les intéractions protéine - ligand en transférant la résonnance des protons de la protéine sur les ligands capables de s'y lier.  [...] La problématique de base ne nous donne que deux éléments. une chimiothèque et une protéine. Effectuer des tests concluants sur un troisième élément (le second messager) fausse la problématique de départ, tu me suis De plus, je me permets une remarque sur ton idée de radiomarquage, qui ne me semble assez chère aussi, et la seconde méthode, avec le second messager, qui, si testée indépendamment avec chaque molécule, sous-entend.  [...]

[Biochimie] Méthodes de purification du lysozyme

Avec le calcul de l'activité enzymatique j'ai un enrichissement de 16 pour un rendement de 32%. Je trouve que ma purification demande un sacrifice trop important pour un si petit résultat. Dans la partie discution de mon rapport je voudrais dire qu'une autre méthode aurait pu me permettre d'avoir un meilleur taux de purification avec un meilleur rendement, mais voilà, je n'en trouve pas sur internet concernant spécifiquement les protéines.  [...] Je précise juste que l'on a utilisé une méthode par compétition dans la colonne et non pas de variation de pH car le pHi du lysozyme est de 11.. Et si l'on met un pH plus élevé on aurait effectivement eu une dénaturation de la protéine.  [...]

[Biotechnologie] Global Analysis of Protein Activities using proteome chips

Ils purifient ensuite la protéine d'intérêt (grâce à la séquence GST). Sur les 1152 protéines différentes produites en même temps par cette méthode, ils en sélectionne aléatoirement 60 pour les tester par WB (afin de vérifier l'expression de la protéine d'intérêt).  [...] On a une protéine de fonction inconnu (ou peu connu). On la produit et la purifie grâce à une méthode identique. Puis on dépose ensuite cette protéine sur l'ensemble de la puce (très diluée, la protéine test, hein.). Puis on révèle où s'accroche la protéine testée.  [...]

[Biochimie] séquençage d'une proteine

Si tu veux séquencer entiérement ta protéine (disons qu'elle n'apparait pas dans ta base de données). Tu peux utiliser la méthode D'Edman, analyser plus de fragments ou utiliser plus d'endoprotéases.  [...] Ensuite, il est possible de séquencer ta protéine de façon séquentielle grâce à la méthode d'Edman que j'ai citée avant. Cette méthode va dégrader ta protéine acide aminé par acide aminé. Le produit de la dégradation est analysé et tu peux ainsi déterminer ta séquence d'acides aminés.  [...]

[Biologie Cellulaire] Co-Immunoprécipitation

Le but de la methode est de recuperer quelque chose qui va etre associe a ta proteine (ligand, proteine, ADN etc...) le plus courant etant une autre proteine.  [...] Pour la partie 1) soit tu possedes un Ac specifique de ta proteine, dans ce cas tu fais une immunoprecipitation, ie que ton Ac va reconnaitre ta proteine, et que tu vas ensuite purifier ton Ac par diverse methode (je ne connais pas la methode du sucre) generalement tu utilises des billes (agarose/magnetique) couplees a des proteines A/G qui vont fixer les Ac.  [...]

[Biochimie] Concentré une protéine recombinante

Il me semble que l'on avait fait ça en TP pr concentrer une protéine recombinante (facteur de croissance) mais je ne me rappelle plus des tampons et du protocole.  [...] Cela peut aussi permettre de passer la protéine d'un tampon à un autre, il suffit d'éliminer une forte quantité de tampon (ne jamais faire arriver la protéine à sec) et d'ajouter à la quantité restante le tampon voulu. Avec cette méthode, la protéine reste sous forme native et soluble, contrairement aux méthodes de précipitations.  [...]