• Santé - Méthode, Kit, Extraction

Kit extraction dna

Prière de m'éclaircir les étapes d'extraction d'adn génomique avec le kit commercial Purelink tm genomic DNA mini kit.  [...] Je fais souvent l'extraction avec la méthode classique phénol-chloroform et maintenant je veux utiliser ce kit pour l'extraction.  [...]

[Biologie Moléculaire] Concentration dosage ARN

edit. sinon pour vérifier si mes ARN ne sont pas trop dégradé, j'envisage de faire un gel non-dénaturant. Hormis des précautions style ARN dans la glace/port des gants/etc... des avis sur cette méthode.  [...] Ca me parait juste énorme d'avoir de telles concentrations grâce à un kit commercial. J'avais des rendements dans ces eaux là mais par la bonne vieille méthode de l'extraction au phénol, mes rendements par kit étaient beaucoup moins importants.  [...]

[Biologie Moléculaire] Extraction d'ARN pour puce

.. j'ai testé mon extraction sur des cellules cultivés en milieu optimum et c'est pareil, un énorme pic 5S. ma principal méthode d'extraction est phenol/chloroforme, j'ai testé un kit macherel, j'ai eu le m^me pic, avait vous une idée sur ce que peut etre ce pic des 5S des ARN degradés.  [...] j'ai testé de congeler mes culots et de rajouter le trizol lors de la decongélation. puis j'ai suivi le m^me protocole que d'hab, j'ai une le m^me résultat (énorme bande 5S. j'ai aussi tenté de traiter mon culot au lysozyme avant l'extraction et la c'était bon, apparament je ne casser pas suffisament mes cellules (mmm je n'ai pas encore passé mes échantiloons sur agilent, mais le profiles sur gel d'agarose n'est pas mal du tout.  [...]

[Biologie Moléculaire] extraction ARN

Le problème c'est que mon extraction avec le Tripure à un rendement faible et ensuite ma PCR ne donne pas de résultats. Enfait le signal de mon blanc est plus élevé que pour mes cellules péritonéales. Je pense peut-être à la présence d'un inhibiteur.  [...] J'ai des résultats avec la méthode d'extraction par colonne, par contre toujours rien pour le Tripure. Connaissez vous un kit permettant d'éliminer les éventuels inhibiteurs de pcr présents dans le tripure.  [...]

[Microbiologie] Isolation ARNm bacterien

Je dois isoler l'ARNm de bacteries dans le but de faire des analyse d'expression génomique et de transcirptomique et je voudrais savoir si quelqu'un à une méthode qu'il a déjà essayé (ou un kit en particulier) et qui fonctionne bien.  [...] Toutes les méthodes d'extraction d'acides nucléiques marchent pour l'extraction des ARN totaux. Je ne connais pas de méthode qui isole spécifiquement les ARNm.  [...]

[Biologie Moléculaire] Electrophorèse en gel d'agarose pGFP

Pour la piste après le marqueur de taille, c'est l'extraction avec kit, (+Rnase) je m'attendais à avoir plusieurs fragments d'une intensité supérieure à la méthode classique.  [...] Puit 1. pGFP traité à la RNase(0,05mg/mL) après extraction en méthode classique (TP de pré-lyse, de lyse, de neutralisation et purif) et repris dans du TE.  [...]

Extraction d'ADN

Notre laboratoire travaille entre autre sur de l'extraction d'ADN issu de valves cardiaques de patients. Nous utilisons pour ca le kit Qiagen (attention, il existe des kits d'extraction d'ARN et d'ADN). Je crois ne pas me tromper en disant qu'il existe plusieurs kit pour l'ADN.  [...] Renseigne toi sur le site de Qiagen a savoir s'ils ont un kit micro. Si tu es limité sur la quantité d'échantillon, il vaut mieux opter pour le kit d'extraction le plus petit possible (donc kit mini si le kit micro n'existe pas).  [...]

[Biologie Moléculaire] Micro ARN

J'ai déjà travaillé sur du plasma en voulant extraire l'ARNt circulant avec du Trizol invitrogen et mes rapports de DO à 280 et sutout 230 n'étaient pas fameux. J'ai même utilisé plusieurs méthodes (TRizol + KIT, TRizol + précipitation, avec des lavages supplémentaires et l'utilisation de différents carreers) c'était pas encore ça.  [...] Du coup, si j'utilise la méthode classique au TRizol je n'ai pas grand espoir rien que pour récupérer les micro ARN d'où l'utilisation de Kit spécifique en RT PCR mais d'abord en extraction.  [...]

[Biologie Moléculaire] extraction faible qté ARN

Je n'ai jamais eu de problèmes de contamination de phénol donc je ne peux malheureusement t'aider sur ce point. Peut-être le mieux serait d'utiliser les colonnes conçues pour les extractions d'ARN Dispendieuses, mais propres.  [...] Pour répondre à Greg concernant mes quantités et protocoles, je ne travaille pas sur des cellules mais sur de l'ARN circulant dans le sang d'où les faibles quantités obtenues et la fragilité des ARN. J'ai utilisé la méthode d'extraction au Trizol puis passage sur une colonne rneasy mini kit.  [...]

[Biologie Moléculaire] Extraction ADN Plasmodium

Je suis doctorant en parasitologie, une partie de mon travail repose sur la PCR de plasmodium. Le problème c'est que j'ai pas trouvé dans la bibliographie un protocole d'extraction d'ADN parasitaire depuis le sang total, j'ai trouvé seulement des méthodes utilisant des kit d'extraction tel que QUIgen.  [...] extraction de l'ADN totatal par l'un de ces deux protocole puis ensuite PCR avec des amorces spécifiques de Plasmodium, ca devrait faire l'affaire.  [...]