• Santé - Méthode, Azote, Liquide

protocole de rt pcr sur melon

j'ai fait une extraction trizol + pvp1% méthode phénol-chloroforme avec des feuilles de melon broyés dans l'azote liquide, je pèse environ 50mg d'échantillons.  [...] après je fais une pruification sur colonne, je perds un peu de matériels puisque le dosage me donne des quantités environ 100ng/µl.   [...]

[Biochimie] Conservation par azote liquide

Pour être plus claire, je souhaiterai mesurer le module d'élasticité du tissu rénal (rein de porc) avant et après congélation afin d'extraire les effets du cycle de congélation/décongélation. Dans mon cas je vais faire une congélation normal où je mets le rein dans un congélateur à -20°C par exemple et d'autre dans l'azote liquide à -196°C et voir le changement des propriétés mécaniques des reins en fonction de chaque méthode.  [...] Ce que je demande et je cherche à savoir c'est l'utilisation de l'azote liquide et la méthode de conservation employer pour un organe comme le rein. Se n'est pas pour des études de transplantation ou d'extractions d'ARN ou de protéines. C'est juste comment je dois manipuler l'azote liquide et le rein.  [...]

[Biochimie] prélévements pour dosages parathormone

Soit environ 6-7 minutes entre le prélévement et la congélation. Quelqu'un a t il une idée/méthode pour aller plus vite (sans utilisation d'azote liquide...).  [...] à part l'azote liquide, je ne vois pas quoi ajouter... même la centrifugation n'est pas vraiment raccourcissable.  [...]

Molluscum contagiosum et verrues

Traitement en expérimentation. une crème à base d'imiquimod qui stimule les défenses de l'organisme. Autre traitement en cours d'évaluation, une crème antivirale (cidofovir). Ces méthodes seront utiles en particulier pour les lésions génitales.  [...] En fait je me suis dejà documenté sur molluscum mais je voulais savoir si des personnes vecu et soigné le molluscum et leur temignages. Vu le desastre de l'azote liquide sur mes verrues planes ben je voulais eviter la case brûlure à l'azote ou grattage mais de toute façon j'ai pris RV chez un dermato quand même.  [...]

[Biologie Moléculaire] Conservation lysat ADN

Je réalise des extractions d'ADNg de rates en phénol/chloroforme. J'aurai voulu faire une lyse chimique (Tampon Tnes-Urée + pk) toute la nuit à 55°C et en prendre une fraction pour réaliser mon extraction. Je voudrai conserver le reste à -20°C (en passant par une étape d'inactivation de la pk) sur une longue durée (mois ou année).   [...] La rate est un organe très hétérogène, c'est pour cela que je voudrai passer par une étape d'homogénéisation du tissu. Je ne peux pas extraire tout mon tissu qui est trop gros. Une autre méthode serait un broyage dans l'azote liquide mais le temps passé n'est pas le même.  [...]

[Biologie Cellulaire] Utilisation du FACS

Ils nous ont aussi conseillé de fixer nos cellules soit en formol 2% soit en PAF 4% et de congeler azote liquide pour conserver. J'imagine bien évidemment qu'il faut rincer les cellules fixées avant de les congeler... La congélation est elle obligatoire, j'ai fait de l'immunoloc sur cellules et je n'ai jamais congelé j'ai toujours conservé mes préparation à 4°.  [...] Ma cinétique se déroulerait sur 40 jours et ça va être très difficile de le faire sur cellules fraiches. D'où la mise au point d'une methode de fixation/congélation la moins dénaturante possible. D'après ce que j'en sais la congélation à l'azote liquide devrait vitrifier l'eau ce qui n'endommage pas les cellules au moment de la décongélation mais c'est vrai que j'ai quand même quelques craintes.  [...]

[Biologie Moléculaire] Manipulation de laboratoire - Extraction d'ARN

Voilà les détails. Maintenant, en pratique, j'extrais l'ARN en utilisant le protocole du Tri-Réagent (par Sigma-aldrich). Mon problème est tout à la base de la manipulation. je n'arrive pas à transformer les ménisques en solutions. J'ai tenté de les mettre dans l'azote liquide et de les broyer avec un pilon mais ils sont tellement dur que ça durcit encore plus mais ça ne se casse pas en poudre.  [...] Tu n'as pas de moelle a l'intérieur du ménisque ou il serait plus facile d'extraire il suffirait de couper l'os, de récupérer la moelle et mettre directement dans l'azote liquide. Car pour de l'os il semble evident que le moyens le plus simple serait par traitement chimique pour ramollir l'os, mais ca dégraderait tes ARN donc t'as pas beaucoup de choix restants.  [...]

Funérailles écologiques : les alternatives à l'inhumation et la crémation

Humus, azote liquide et lyophilisation, dissolution... Certains modes de funérailles encore confidentiels seraient, assurent leurs partisans, plus écologiques que l' inhumation et la crémation classiques, les seules méthodes autorisées en France.  [...] La promession, quant à elle, consiste à exposer le corps déjà congelé du défunt à de l' azote liquide (-196 °C). Cela rend le corps cassant et ensuite nous utilisons des vibrations qui le désagrègent en petits morceaux, ensuite lyophilisés, explique à l'AFP sa créatrice, la Suédoise Susanne Wiigh-Mäsak, qui décrit un système qui imite la nature avec l'aide d'une technologie respectueuse.  [...]

Conservation des fruits & légumes

En effet, on congèle même des fruits et légumes à l'azote liquide me semble t'il.. J'ai vu une fois un restaurant qui trempait certains aliments dans l'azote liquide pour qu'ils restent comme ils étaient où je ne sais plus trop quoi, puis les servait aux clients.  [...] petite informations sur l'azote liquide je travail en ce moment sur un sujet de pré traitement a l'azote liquide sur des fruits.donc ce que je peut te dire que cela dépend sur quelle fruit et légume tu l'utilise certain son plus sensible que d'autre.je te conseille également de congelé tes fruits avant le traitement a l'azote autrement il risque de ce fendre ce qui est pas le but que tu recherche enfin je pense.  [...]

durée de vies des spermatozoïdes?

Moi j'ai une question en se moment et zootechnie on éudie la reproduction chez les bovins on a vu des inseminations artificielles le sperme était conservé dans de l'azote liquide, je ne comprend pas comment ces cellule peuvent survivre à une telle température même si il doit y avoir des antigels. qqun pourrait -il m'expliquer.  [...] Juste pour compléter ce qui a déjà été dit. L'étape la plus délicate lorsque l'on travaille sur des cellules congelée dans l'azote liquide (ou à moins 80), c'estla décongélation parce qu'on reprend les cellules dans du milieu de décongélation (milieu de culture additionné d'autres éléments) mais il faut faire attention à prendre uniquement le glaçon de cellules.  [...]