• Santé - Mélange, Tampon, Liquide

methodes de cryopreservation des cellules

la congélation lente et la vitrification sont les deux techniques employées pour cryoprésever les cellules.j'ai écris dans mon cours que pour conserver les cellules il faut descendre en température lentement par tranche de température de 20° à 0° PUIS FRANCHIR RAPIDEMENT 0° à-5° puis redescendre lentement de -5°à-156° POURQuOI spécialement ces paliers de température et pourquoi aller vite ou moin vite par foisque se passe t il à chaque étape ou k cherche t on à éviter par chaque étape.   [...] ET pour la vitrification on prend les cellules on les met ds quelle type de solution(tampon peut etre doit on rajouter du milieu de culture)on rajoute le melange de cryoprotecteurs en suite j'imagine qu' on met le tout dans un cryotube ou paillette puis on place ds la bonbonne d'azote liquide.  [...]

[Biologie Moléculaire] Sds-page

SVP j'ai besoin d'aide car mon gel polyacrylamide ne veut pas polymériser, si je ne mélange que l'acry + le bis+ TEMED+ APS j'obtient un bon gel mais dés que je rajoute la slution tampon que je prépare moi même j'obtiens un liquide si kelkun peu m'aider.  [...] merci bien, mais ce que je veux comprendre c'est comment le tampon peut il influencer la polymérisation, j'utilise T=10 pour cent,  [...]

[Biochimie] Conservation par azote liquide

le sacrifice des souris est réalisé au niveau de notre animalerie (à l'université) et effectivement dés que je récupère mon colon, je l'ouvre et je le rince avec le tampon PBS puis je l'introduit à +4° le temps de terminer rapidement mes sacrifices et d'acheminer mes échantillons à l'hopital où j'ai la possibilité de les conserver dans l'azote liquide.  [...] Donc en faite je transporte mes echantillons à +4° dans du tampon PBS avant de les introduires dans l'azote liquide... et j'ai peur de bousiller mes enzymes.  [...]

préparation de l'invertase

j aimerai bien savoir le rôle de chacun du tampon de citrate et le mélange toluène/éthanol dans la préparation de l'invertase à partir la levure de boulangerie.  [...] Il faudrait peut être savoir à quel moment interviennent le tampon et le mélange toluène/éthanol.  [...]

PCR et amorce

Quand on veut faire de la PCR, on définit un couple d'amorces (une sens et une anti-sens) permettant d'amplifier la région d'intérêt.   [...] Le mélange réactionnel contient les différents réactifs (Tampon, dNTPs, BSA, Amorce sens, Amorce anti-sens, Taq polymérase) à des concentrations optimales pour assurer le déroulement de la réaction de PCR. On ne rajoute donc pas d'amorces au fur et à mesure, mais elles sont dans le mélange réactionnel de départ.  [...]

Tampon phosphate NaCl?

Il existe des tables toutes faites (facilement trouvables sur le web. exemple ici http.//microscopy.berkeley.edu/Resou...n/buffers.html ) qui indiquent quel volume de chaque solution ajouter selon la molarité et le pH final. Selon cette table, pour obtenir un pH de 7,8 il faut 8,5 % de NaH2PO4- et 91,5 % de Na2HPO4(2-).   [...] Pour un litre de solution à 10mM, tu mélanges donc 85 mL de monobasique (H2PO4-) 10mM et 915 mL de dibasique (HPO4(2-)) 10mM. Ensuite, il ne reste plus qu'à peser ton sel et l'ajouter à la solution.  [...]

[Physiologie] Que faire apres un effort physique intense?

Il est donc important d'aider cette circulation après l'effort avant que les endomorphines (anti-douleurs secrétés par notre corps) cessent d'agir. D'une part parce que le relâchement musculaire induit une baisse de la circulation sanguine - dans le cas d'une immobilisation prolongé d'un membre, le médecin prescrit des anti-coagulants afin d'éviter thromboses et embolies.   [...] D'autre part le sang a un effet tampon - c'est un liquide régulateur du pH physiologique.  [...]

determination de l'activité xanthine oxydase dans le foie

le foie récupéré est broyé ensuite mis dans un tampon de lyse et l'activité xanthine oxydase est mesurée dans un mélange réactionnel contenant la xanthine, le tampon et HCl qui est rajouté aprés 10mn pour stopper la téaction. L'absorbance d'acide urique qui est le produit de la xanthine oxydase est suivie à 292nm.  [...] pour calculer la concentration de l'acide urique produite par minute on divisera l'absorbance par le coefficient d'extinction molaire de l'acide urique divisé par 10mn. donc on aura la concentration en mmolaire/l mn multiplié par le volume de l'échantillon.   [...]

[Biologie Moléculaire] Problème Western Blot

Lors de ma migration, le front de migration fait comme une vague au milieu du gel, problème de polymerisation Tampon pas assez mélangé.  [...] Si quelqu'un a déjà eu ce problème et peut me donner des explications plus avancé que changer toutes les sauces je suis preneur.   [...]

[Biologie Cellulaire] Iodure de propidium

Vous pouvez utiliser la version liquide. En cytometrie on utilise une concentration entre 5 et 10 ug/ml sur cellules perméabilisées.  [...] J'utilise l'IP liquide, je récupère les cellules, puis le lavage dans le PBS, une resuspension des cellules dans 100µl d'iodure de propidium (5µg iodure de propidium(Sigma) dans un tampon citrate), puis dans 200 µl de tampon citrate (3,4 mM de citrate de sodium, 0,1% TRITON/PBS). C'est pour analyser le cycle cellulaire.  [...]