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[Biotechnologie] ADN recombinant réplication dépend du cycle cellulaire ?

En fait l' ADN recombinant qui est composé de plasmide qui est le vecteur et de l'ADN inséré ainsi que d'autre gène inséré dans ce vecteur comme le gène de résistance à l'ampicilline le gène marqueur lactZ qui code pour la protéine béta galactosidase et le polylinker qui s'insère dans le gène marqueur lactZ sans influencé son fonctionnement, bref en gros lors de l'injection de l'ADN recombinant dans les cellules hote comme e.  [...] C'est d'ailleurs une propriété qu'on utilise pour augmenter le rendement de production de plasmides, en bloquant spécifiquement la réplication chomosomique sans gêner celle du plasmide.   [...]

Les résultats déjà obtenus | Dossier

Coupe en immunohistochimie de myotudes (cellules musculaires) provenant de souris saines ou de souris mdx. La présence de dystrophine est révélée par un anticorps dirigé contre la partie terminale de la protéine. Le marqueur fluorescent rouge utilisé pour cette détection est la rhodamine.  [...] Des résultats publiés en janvier 2002 par une équipe américaine montrent qu'il est possible de supprimer des mutations du gène p53 dans des cellules fibroblastiques embryonnaires de rats (13). Grâce à une quantification précise de l'efficacité de suppression, mais aussi grâce à l'utilisation d'un test indirect de l'activité de la protéine p53, ils ont montré que les cellules traitées avec 200mg/ml de gentamicine, ou 800mg/ml d'amikacine possédaient une activité p53 significative.  [...]

Cancer du sein : la protéine CK2 responsable de sa progression

Des analyses cellulaires, biochimiques et transcriptomiques ont permis d'identifier Snail1 comme étant une cible de cette protéine kinase. Par conséquent, en induisant la phosphorylation (ajout d'un groupement phosphate, qui active la molécule) de Snail1, l'activité de la protéine kinase CK2 est nécessaire pour empêcher l'activation de l'EMT, et ainsi diminuer le risque de développement de métastases.  [...] Cette étude révèle que la protéine-kinase CK2 est un régulateur clé de l'homéostasie des cellules épithéliales. Grâce à ses propriétés de marqueur dans plusieurs types de cancers et à ses qualités en tant que cible thérapeutique, CK2 a acquis le statut d'un biomarqueur théranostique (thérapeutique et diagnostique) pertinent.  [...]

L'ezrine, pilier de l'architecture cellulaire | Dossier

L'ezrine est l'un des piliers de l'architecture et de l`agencement des cellules épithéliales. Cette protéine assure la liaison entre les filaments d' actine et la membrane cellulaire, en se liant à certains récepteurs membranaires, comme la protéine CD44 impliquée dans les phénomènes d'adhérence.  [...] Pour suivre les mouvements de l'ezrine, les chercheurs de l'Institut Curie lui ont couplé un marqueur fluorescent puis ont combiné la microscopie à deux photons et la technique plus connue du FRAP. La protéine est alors pistée dans les cellules. sa localisation spatio-temporelle peut être déterminée avec précision (à 10 millisecondes et à 1 micron près).  [...]

[Biologie Moléculaire] Méthodes d'étude de l'ADN

On voit sur le contrôle (des cellules Hela du laboratoire) une bande majoritaire détectée, qui a une taille d'environ 35kDa (le marqueur de taille n'est pas dans l'image ici), et qui correspond vraisemblablement à notre protéine. Mais on observe également une petite bande au dessous, et plusieurs bande au dessus (60-70kDa).  [...] Au labo, on en a déduit que l'anticorps reconnait faiblement d'autres protéines de la famille SR... Donc une non-spécificité à prendre en compte, même si le ratio protéine SC35/autres protéines SR donne SC35 largement gagnante (en voulant arranger les résultats, il est possible de ne faire apparaître que la protéine SC35, en contrôlant le temps d'exposition).  [...]

Interview : la réparation du cartilage articulaire | Dossier

les cellules perdent leurs caractéristiques. En effet, la protéine marqueur du cartilage est le collagène de type II. Or, au cours de l'amplification des chondrocytes, on perd l'expression du collagène de type II et on observe la présence de collagène de type I, qui est le collagène caractéristique de la peau et des os.  [...] On pourrait également utiliser les cellules-souches pour réparer le cartilage. Le challenge est d'utiliser des cellules-souches qui ont une potentialité et de les orienter vers le lignage chondrocytaire. Il est très compliqué d'induire des cellules-souches en chondrocytes pour qu'elles fabriquent les bonnes protéines. Il faut trouver les bons protocoles.  [...]

Cellules souches

Oui mais CD34 est un marqueur spécifique des cellules souches, marqueur qui n'est pas exprimé sur d'autres types cellulaire, enfin il semble.  [...] De plus avec ta technique de 2eme colonne, tu ne sais pas si tu éluera que les cellules souches car d'autres types cellulaires ont peut etre le marqueur CD34 et absence du marqueur de purification de ta 2eme colonne, à moins de vraiment recenser les différents marqueurs cellulaires et de bien discriminer les marqueurs.  [...]

[Biochimie] Comment optimiser le transfert (en western blot) des protéines de haut poids moléculaire ?

C'est ce qu'on veut d'ailleurs montrer en traitant les cellules différemment). J'ai alors acheté des gels commerciaux de chez BioRad ( 10%). J'ai suivi leur protocole de migration (200V pendant 45 min), j'ai fais le semi dry transfert à 25V pendant 2h. Le transfert a été parfait car mon marqueur de poids moléculaire de 300kda a été bien transféré.  [...] Donc à priori, tu as de la protéine, elle est sans doute intacte, sa taille n'est probablement pas un problème majeur puisque des bandes de marqueur plus grosses sont transférées et le WB est tout de même négatif... Pas simple. J'ai une autre idée. sauf erreur de ma part, ta protéine vient d'un extrait cellulaire eucaryote.  [...]

[Biochimie] quel est le taux létale de la troponine dans le sang?

merci c'est parce qu'un proche a fait un infarctus, et on a trouvé que le taux de troponine chez lui était 3 fois plus important que la valeur normale, est ce que c'est une protéine qui est libérée suite à une mal oxygénation du tissu myocarde.  [...] c'est un marqueur de souffrance myocytaire en effet, puisque cette protéine intracellulaire ne se retrouve dans la circulation que lorsque la cellule nécrose.  [...]

[Biologie Cellulaire] Marqueur pour cellules mortes dans une culture.

Lors d'un TP, nous avons mis des progenitors de cellules nerveuses en culture pendant une durée de 16H approximativement, avant de les analyser. Afin de ne pas biaiser les résultats nous aimerions différentier les cellules mortes, mais à ce stade, je doute que cela puisse se faire simplement d'après la morphologie des cellules.  [...] Existe-t-il un marqueur spécifiques des cellules mortes que nous pourrions utiliser (mais pas spécifique de l'apoptose comme ce que j'ai trouvé jusqu'à présent sur le net).  [...]