• Santé - Marqueur, Bandes, Concentration

Conséquence de la concentration d'un tampon électrophorèse sur l'intensité

Sinon, la séparation des bandes dans l'ADN dépend de la concentration d'agarose. plus l'agarose est dilué, plus les petites molécules d'ADN vont migrer vite. Ca peut peut-être réduire la résistance totale du circuit.  [...] Sinon, abaisser la concentration d'agarose a 0.8 ou 0.6 (attention ca fond tres rapidement...) ou changer ton marqueur, certains donne des bandes a 100pb puis 200, 300 etc, pas besoin de migrer bcp pour voir un resultat.  [...]

[Biologie Moléculaire] DNA mass ladder

Oui vite fait, le marqueur que j'avais n'avait que deux bandes pour estimer la concentration, j'ai jamais trop essayé de vérifier si c'était précis. Je ne pense pas que ça le soit. Pour ce qui est de ton marqueur, ça me parait en effet un peu délicat de différencier précisément les bandes.  [...] Les deux, en sachant que les bandes formées par des plasmides notamment, n'auront pas la même forme lors de leur migration sur gel.  [...]

problème

jai fais plusieurs pcr à partir d'ADN obtenus de sang et les migrations me donnent toujours le meme résultat. pas de bande ou pas les bandes controles.  [...] Tu parles des bandes de contrôle du front de migration Est ce que le marqueur de taille a marché.  [...]

A quoi sert une électrophorèse ?

Mais à quoi ça sert Je comprend pas le principe, on fait migrer des bandes, et faut comparer nos bandes avec celle du marqueur, mais comment je suis censé interpréter tout ça A quoi ça sert Pourquoi les faire migrer.  [...] Là par exemple, j'ai fais migrer un ADN d'E.Coli, avec un deux marqueurs de taille, un de 100pb, et un de 1kb, je comprend pas comment faire pour comparer les tailles, les ADN d'E.Coli se sont tous arrêtés au même endroit, et ça fait une succession de bande pour les marqueurs.  [...]

[Biochimie] differencier deux gel d'agarose de concentration différente

On a 2 colonne ayant tout deux les meme marqueurs moléculaire (molécules de même taille) pour 2 gel de concentration différente.  [...] à priori le raisonnement est exact, si la migration s'est faite exactement dans les même conditions, le gel où le bleu de charge a migré le plus loin (ou celui où le marqueur de taille a les bandes les plus espacées) est le moins concentré en agarose. Par contre les concentrations me semblent vraiment très élevées, es-tu sûr que ce n'est pas 1.0 et 1.5%.  [...]

[Biochimie] Concentration d'un produit PCR

ca depend de l'intensité de la bande, en général tu peu t'aider du marqueur de poids moléculaire. ca te donnera une idée de ta concentration.  [...] Il y a plusieurs modèles de nanodrop. Celui utilisable pour la fluorimétrie (modèle 3300) permet de mesurer des concentrations très basses (de l'ordre de 5ng/ml) d'ADN en fluorescence avec le Picogreen.  [...]

[Biologie Moléculaire] dosage d'ADN sans spectrophotomètre

Je pense qu'il veut dire qu'il faut que la concentration de ton échantillon doit être compris dans la gamme de concentration de ton marqueur. Si elle est au dessus ou en dessous, tu ne pourras pas calculer sans être certaine du résultat.  [...] kamor a lu dans mes pensées. Il faut que ton produit ait une concentration comparable a celle de ton marqueur, parce que s'il y a un facteur 10, l'oeil ne suffit pas.  [...]

[Biochimie] Analyse de l'expression du gène fos

Pour ce qui est de la détermination des tailles des bandes il vous faut procéder à partir des bandes présentes dans le marqueur de poids moléculaire que vous avez déposé dans la première et la dernière colonne (les échelles). Normalement on a du vous donner les tailles de chacune des bande qui le compose. Deux manières de procéder.  [...] Vous tracez donc une droite en coordonnée semilog (log (taille). distance de migration) à partir de votre marqueur. Ensuite vou pouvez retrouver la taille en utilisant cette droite.  [...]

[Biologie Moléculaire] Probleme de clonage avec pT7Blue

On obtient un gel avec des produits de PCR de colonies bleues et blanches, de plasmides digérés par enzymes de restriction et des plasmides non digérés provenant de colonies bleues et blanches. (= 6 bandes)+marqueur de taille.  [...] obtention de 6 bandes + marqueur de taille afin de comparere les produits de la PCR brute, les plasmides digérés et les non digérés en provenance de colonies bleues et blanches.  [...]

[Biochimie] Transfert western blot raté

..je vois les bandes de mes poids de marqueur moléculaire coloré qui sont de travers comme s'il y avait eu un transfert en diagonale, de plus les bandes semblent s'étaler et sortir de leur piste comme si elles avaient transférées de côté.  [...] Bref, j'ai fait un transfert il y a 2 semaines avec un protéine purifiée...c'était magique. transfert impeccable, rouge ponceau OK et tout le reste aussi. Mais là je donne ma langue au chat, mon premier transfert était complètement de coté avec des bandes en zig-zag, on m'a dit qu'il devait y avoir une bulle qui a géné le transfert.  [...]