• Santé - Marques, Protéine, Paramètres, Technique

[Biochimie] retard sur gel

c'est une proteine recombinante pure, et je pense que la protéine est inactive in vitro vu sa structure (HTH, doigt de zinc) lui permet normalement de se fixer sur les oligo marqués. et la seule hypothese que je peux y mettre est que ma proteine est activée par des proteine chaperonnes.  [...] effectivement, je vois bien mes oligos marqués qui migre à la mm vitesse en présence et en absence de ma protéine et je pense que je dois vérifier certains paramètres de ma technique.  [...]

La cellule nerveuse (neurone) | Dossier

Culture de neurones corticaux de souris doublement marqués pour une protéine de structure, le MAP2 (en rouge) et une protéine du métabolisme, un transporteur de monocarboxylates (en vert). L'aspect punctiforme de la réaction traduit un marquage de type synaptique.  [...] Culture de neurones corticaux de souris doublement marqués pour une protéine de structure, le MAP2 (en rouge) et une protéine du métabolisme, un transporteur de monocarboxylates (en vert). Karin Pierre, Institut de Physiologie, UNIL, Lausanne, DR.  [...]

[Divers] Quel microscope choisir ?

Je travaille environ 7 heures par jours au microscope je penses donc pouvoir te répondre. Tu aurras beaucoup de mal à trouver dans cette gamme de prix un microscope de bonne qualité. Ceux que tu présentes présentent un grave défaut. ne pas pouvoir réaliser un éclairage de Koelher. C'est à dire d'optimiser le faisceau lumineux.   [...] Bien entendu réunir tous ces paramètres à un coût, je ne connais pas beaucoup les marques de grandes distribution mais je peut toutefois te conseiller quelques grandes marques de microscopes. Zeiss, Olympus, Nikon et Nachet (trop souvent oubliée cette petite marque française.  [...]

synthèse des protéines

Des cellules où s'effectue une synthèse protéique importante sont incubées 45 secondes dans une solution contenant des acides aminés marqués par un isotope radioactif. Par une technique appropriée, on fait ensuite éclatrer les cellules puis, par ultracentrifugation, on sépare différentes fractions cytoplasmiques dont on peut contrôler la pureté au microscope électronique.  [...] - les acides aminés disponibles dans le milieu sont marqués par un isotope radioactif. En mesurant la radioactivité de chacune des fractions, tu vois donc quelle fraction a utilisé les acides aminés pour synthétiser les protéines.  [...]

[Biologie Cellulaire] Marquage par Ac-FITC : du solide ?

Je tente de mettre au point un protocole pour doser une protéine produite dans certaines conditions (notamment en présence de substances toxiques).  [...] Nous travaillons actuellement par point counting. Les cellules sont fixées sur lames puis révélées. Le comptage de la protéine révélée dépend d'un opérateur à l'autre, et j'ai bien peur que la qualité de l'image enregistrée par le microscope ne soit pas de qualité optimale.  [...]

[Immunologie] Le test d'ELISA sandwich

Salut, je ne pense pas que la technique sandwich soit du domaine de l'immunohistochimie. Histo voulant dire tissu, se serait plutôt l'application d'Ac marqués sur un tissu pour une observation au microscope.  [...] Pour la technique sandwich d'ELISA tu a juste a taper ça sur wikipedia ou sur google et je suis sûr que tu trouvera plein de trucs super intéressant.  [...]

L'huile d'olive, le nouveau traitement contre la maladie d'Alzheimer ?

Dans les deux cas, un traitement à base d'oléocanthal extrait d'huile d'olive extra vierge a permis la surexpression de deux protéines, la glycoprotéine P et le LRP-1 ( LDL lipoprotein receptor related protein-1). Toutes deux sont des transporteurs des bêta-amyloïdes du neurone vers la circulation sanguine, au-delà de la barrière hémato-encéphalique.  [...] Effectivement, à l'aide de bêta-amyloïdes marqués à l' iode radioactif, les chercheurs ont observé que la protéine caractéristique de la neurodégénérescence était davantage éliminée des cellules nerveuses après administration de l'oléocanthal.  [...]

[Biochimie] Sequençage de l'ADN

L'idée est toujours d'amplifier l'ADN. On utilise donc une polymérase avec 4 oligonucléotides. Contrairement à la technique de Sanger, les nucléotides sont tous marqués par un fluorochrome (un différent pour chacun des 4 nucléotides) qui bloque la progression de la polymérase.  [...] Une autre astuce de la technique est que l'ADN à séquencé est clivé en petits fragments (une vingtaine de pb) qui vont être chacun fixés sur une plaque couverte de séquences fixant les séquences adaptatrices. Arpès amplification on a donc des spots sur la plaque formés par les amplicons issu d'un brin initial.  [...]

[Biochimie] Travaux pratiques de biochimie des systemes integrés urgents

Une fois transfecté soit tu utilise un microscope à fluorescence simple pour visualiser où se trouvent les protéines marquées ou pour la technique du FRAP ou FLIP il faut un appareil spécifique qui utilise un laser pour éteindre la fluorescence à un endroit précis et calculer le recouvrement de fluorescence.  [...] Une fois récupéré tu le transfecte dans des cellules genre HeLA pour voir où la protéine voulue se localise. Ensuite les techniques de microscopies sont plus poussées, je ne les connais pas moi même par coeur. Je m'excuse.  [...]

[Biologie Moléculaire] technique PIFE + fluroscence

Du coup la PIFE serait une méthode quantitative avec une bonne sensibilité et la technique de fluorescence sur plaque 96 puits serait donc moins sensible. Par contre avec cette technique (96 puits) on peut quand même quantifier la fluorescence pour en déterminer l'interaction d'une protéine vis à vis d'un ARN ou ça reste une méthode qualitative.  [...] Sinon l'autre méthode, ce serait de fixer au fond d'une plaque des protéines et d'y ajouter des ARN marqués avec un fluorochrome. Si il y a interaction de l'ARN avec la protéine alors normalement il devrait il y aura une fluorescence. Du coup ma question c'est.  [...]