• Santé - Marquage, Fluorescent, Protéines

Méthode de marquage - HaloTag

Si j'ai bien compris la brochure, en gros au lieu d'avoir une GFP comme protéine de fusion, c'est le Halo tag qui est couplé à la protéine d'intérêt. Le principe a l'air assez simple, en gros on peut ensuite coupler n'importe quoi sur le Halo (billes, biotine, fluorophore.  [...] ..). Ce qui fait qu'on peut l'utiliser pour localiser la protéines d'intérêt dans un tissu ou une cellule avec la fluo, mais aussi coupler avec des billes pour faire un réaction biochimique, ou encore fixer la protéine sur une lame de verre, le tout sans devoir recommencer le clonage à chaque nouvelle application.  [...]

[Zoologie] [zoologie] Monstre Mystère - Page 2

Comme expliqué par Sylvebarbe les stries visibles doivent correspondre aux filaments d'actine et de myosine (il n'y a quasiment pas de légende pour cette photo que j'ai récupérée, mais elle doit être faite à mon avis avec une technique de fluorescence, d'où les jolies couleurs rouges vertes et bleues).  [...] Cette image a ete obtenue par marquage fluorescent des divers proteines/compartiments et l'aspect un peu 3D a du etre obtenu par deconvolution de plusieurs images 2D.  [...]

Les nanocristaux appliqués à l'étude du vivant

Les développements récents de la biologie impliquent l'observation des protéines en temps réel dans les cellules vivantes. Le suivi des protéines est rendu possible suite à leur marquage par un composé fluorescent. Le challenge réside dans le développement de composés qui soient non toxiques et suffisamment fluorescents pour permettre des observations dans de bonnes conditions.  [...] L'imagerie sur cellules vivantes apporte une meilleure compréhension des mécanismes biologiques. Depuis 1992 et le clonage du gène codant pour une protéine fluorescente naturellement présente dans certaines espèces de méduse, la GFP (Green Fluorescente Protein), ces techniques ont connu un développement important.  [...]

Avancée dans la compréhension des protéines ''chaperon''

Cependant, l'organisme dispose de protéines chaperon qui semblent protéger les protéines saines, mais dont le mécanisme de fonctionnement restait jusqu'à présent mystérieux.  [...] Un article publié dans Nature Cell Biology résume le travail d'une équipe de chercheurs en biologie moléculaire de Northwestern University qui a conçu une technique, utilisant le marquage fluorescent, pour surveiller le travail de ces protéines dans des cellules de vers de terre.  [...]

FRAP et microscopie à 2 photons : un mariage réussi | Dossier

Dans un premier temps, un marqueur fluorescent est couplé à la molécule d'intérêt. Ensuite, en illuminant fortement avec un laser une région donnée, ces protéines sont éteintes définitivement c'est-à-dire que leur marqueur fluorescent ne peut plus émettre de lumière.  [...] Le retour progressif de la fluorescence dans ce trou noir n'a lieu que si les protéines sont en mouvement, ce qui permet de mesurer leur mobilité. Le principe de la microscopie à deux photons est d`exciter une molécule fluorescente par un faisceau infrarouge produisant des impulsions ultra-brèves tellement intenses que deux photons sont absorbés simultanément par cette molécule.  [...]

[Biologie Moléculaire] Marquage fluorescent d'une protéine

Meme si c'est pas ce que tu as demande, il y a aussi l'option de certaines proteines fluorescente qui sont bien mise au point pour le FRET ( ici par exemple).  [...] Tu dois pouvoir trouver ton bonheur ici. Si ça t'intéresse il y aussi un lien pour les fluorophores que tu peux exciter avec des UV. Perso j'ai marqué des protéines sur des lysines pour de la microscopie à fluorescence avec des molécules d'Invitrogen aussi et c'est pas bien compliqué.  [...]

definition exacte des genes et alleles

Elle peut être utilisée sur de l'ADN, de l'ARN, des protéines, par fluorescence (ce sont des sondes moléculaires avec un marqueur fluorescent).  [...] Elle est par exemple utilisée pour détecter certaines maladies génétiques, comme le syndrome de Jacobsen ou celui de Williams, par repérage de micro-délétions. On peut aussi l'utiliser pour étudier la biodiversité. Cette technique est aussi appelée hybridation in situ en fluorescence.  [...]

[Biotechnologie] cytométrie de flux/épifluorescence

la cytometrie de flux est une technique qui permet de détecter la taille, la granulosité d'une cellule ainsi que la fluorescence de protéines cellulaires (protéines fluorescentes comme la GFP ou marquées avec un anticorps couplé à un fluorochrome) ou de l'ADN (ex intercalant fluorescent de l'ADN).  [...] Un microscope à épifluorescence est un microscope muni de faisseaux laser, qui permet l'observation d'échantillons tels que des cellules possédant des protéines fluorescentes comme la GFP ou marquées avec un anticorps couplé à un fluorochrome.  [...]

Immunologie : le rôle de la PI3-kinase | Dossier

Légende. Depuis la fin des années 1990, la green-fluorescent protein ( GFP ) de la méduse Aequorea Victoria et ses nombreux dérivés sont largement employés dans les laboratoires pour marquer des protéines dans les cellules vivantes et les visualiser ainsi directement en microscopie à fluorescence.  [...] Nous avons été les premiers à montrer ce phénomène dans des LT vivants en utilisant des techniques d'imagerie de fluorescence. L'astuce expérimentale consista à fusionner par génie génétique le domaine PH d'une de ces protéines, la protéine Akt (une enzyme à activité sérine/thréonine kinase ), à une protéine fluorescente, la GFP ( pour green fluorescent protein ), issue d'une méduse ( Aequorea victoria ).  [...]

[Biochimie] Destruction des ponts disulfure

Pour ceux qui pensent au Beta-mercapto, DTT ou autre composés de ce genre, cela ne marche pas. Ma sonde fluorescente réagit avec eux avant même de réagir avec la protéine.  [...] Je vais faire des tests de fixations du marqueur fluorescent à des protéines témoins (BSA & lysozyme) la semaine prochaine avec un microscope haute résolution. Je verrai ce que cela me donne avec et sans TCEP. Et je croise les doigts.  [...]