• Santé - Longueur, NADH, Concentration

La mesure de l’activité enzymatique par spectrophotométrie et sa relation avec l’NAD

Si j'avais bien compris, on utilise 340 nm car à cette longueur d'onde seule l'NADH absorbe alors l'absorbance serait exclusivement proportionnelle à la concentration de NADH dans la solution, tandis que cette concentration d'NADH mesurée serait elle-même proportionnelle à l'activité de l'enzyme. Est-ce correct.  [...] Pourquoi dites-vous que l'NADH absorbe '' fortement '' à 340 elle n'absorbe d'ailleurs qu'à 340 ( si je ne me trompe pas..) sous sa forme réduite,ceci est mentionné dans le lien de @JPL, alors lorseque vous parler d'une absorbance plus forte, c'est par rapport à quoi Voulez vous peut-être dire que lorsque la longueur d'onde possède une valeur élevé, ceci signifie-t-il que la densité optique serait plus forte.  [...]

[Biologie Moléculaire] dosages enzymatiques

Donc, si par exemple, on veut doser l'acide lactique. On sait que l'acide lactique en présence de NAD + donne du pyruvate et du NADH,H +. On réalise un test UV. Si on remarque une augmentation de NADH, on en déduit qu'il y a formation de pyruvate. Je suppose qu'on doit aussi calculer la concentration en acide lactique Comment fait-on.  [...] Tu trouves donc la concentration de NADH et grâce à l'équation de la réaction catalysée par la lactate déshydrogénase (LDH), tu en déduis celle du lactate. Et vu que 1 mole de lactate est consommée pour donner 1mole de NADH, la concentration est la même. Attention après à ramener cette concentration à celle de ton échantillon de départ qui a généralement été dilué.  [...]

[Biochimie] Extraction d'enzymes musculaires

Pour avoir une concentration plus importante il suffit d'ajuster le volume de tampon de lyse, ou lyser plus de matériel biologique tout simplement.  [...] En ce qui concerne les réactifs du protocole, ce sont de nouveaux produits. De plus, le protocole que je réalise est une adaptation de protocoles déjà existants dans la littérature scientifique (on y développe pas vraiment le mode opératoire mais en ce qui concerne les concentrations de chaque réactifs, tout est décrit).  [...]

Matériels et méthodes | Dossier

La cytotoxicité de la molécule à tester est évaluée par le dosage de l'activité enzymatique de la lactate déshydrogénase (LDH) du surnageant cellulaire d'une suspension de granulocytes neutrophiles (5.10 6 GrN/ml) incubée à 37°C avec l'inhibiteur à différentes concentrations.  [...] L'élution de la protéine kinase C est obtenue par addition de chlorure de sodium pour arriver à la concentration de 150 mM. L'élution est pratiquée de manière isocratique (Nakanishi H. et Exton J., 1992).  [...]

chaine respiratoire mitochondrial

NADH a un potentiel redox qui est moins négatif que la FMN. comment peut-il céder ses électrons Si on prend un seul complexe I (une seule FMN, une seule chaîne Fer/Soufre), il y aura en face beaucoup plus de NADH. Cette différence de concentration permet de rendre le transfert possible.  [...] qu'elle relation du potentiel redox avec le flux de protons et puis pour quoi le potentiel redox de NADH est moins que le FMN.  [...]

[Biochimie] TP activité de la phosphoénol pyruvate carboxylase, calcul vitesse initiale

la DO n'a pas d'unités, certes, mais la loi de Beer-Lambert vous permet de déterminer la vitesse d'apparition du produit (ou de disparition du substrat), par la relation. A (DO) = e (coeff d'extinction molaire de votre composé) x L (longueur du trajet optique) x C (concentration du composé).  [...] Du coup je vais calculer la vitesse en concentration (micromol/L) par minute et je convertirai cette concentration en nmol pour avoir l'activité du NADH en nmol/min et donc avoir celle de la PEPcase.  [...]

[Biochimie] Favisme

Dans l`érythrocyte il y a la présence dans le cytosol,d`une enzyme essentielle qui utilise principalement le glutathion comme substrat, la gluthatione peroxydase (GPx) (qui ce présente sous 5 forme connue). Cette enzyme empêche l`oxydation membranaire de l`érythrocyte produite par les peroxydes organiques ou hydroperoxydes en les réduisants, évitant du même coup la formation d`un radical encore plus dangereux, le radical OH. Elle est reconnu comme une sélénoprotéine.   [...] Bonjour je ne sais pas si cela peut apporté quelque chose, il parait que l`activité des transhydrogénase ce fait au niveau de la mitochondrie, cette enzyme transfert un proton du NADH pour former du NADPH ou possiblement l`inverse, dépendemment de leur concentration.  [...]

[Biologie Cellulaire] TPE arsenic comprehension terme technique biologie corps humain

Dans la mitochondrie, l'énergie de l'oxydation des coenzymes NADH,H + et FADH 2 est utilisée pour pomper des protons dans l'espace inter-membranaire (au niveau de la chaîne respiratoire). Ensuite ces protons qui se sont accumulés dans cet espace inter-membranaire veulent retourner dans la matrice pour rétablir l'équilibre des charges électriques (+/-) et de concentration d'ion H + entres matrice et l'espace inter-membranaire.  [...] Le oxydation des cofacteurs NADH, H + et FADH 2 est couplée avec les phosphorylations de l'ADP. L'arsenic est un analogue structural de l'ion phosphate, Pi. Il prend la place du Pi dans l'ATP synthétase et l'empêche de phosphorylé l'ADP. Conclusion les oxydations vont se poursuivre mais plus les phosphorylations -. il y a découplage.  [...]

Cycle de Krebs

Le coeur du cycle de Krebs est constitué par deux réactions de décarboxylations oxydatives qui vont générer de NADH+H +. Le but est d'oxyder in fine le pyruvate.  [...] On obtient alors du NAD+ (CoSubstrat réduit) qui viendra dans le cytoplasme faire la néoglycogénèse (la glycolyse quoi...) et des H+ libres utile pour des réactions d'oxydo-réduction pour la respiration aérobie.   [...]

[Biochimie] Chaine respiratoire

Les 2 NADH,H+ formés lors de la 2ème phase de la glycolyse ( plus précisément lors de l'oxydation du 3P-glycéraldéhyde en 1,3 Biphosphoglycérate) sont réoxydés en NAD+ grâce à un système de navette [ Le NADH,H+ cède ses électrons à l'oxaloacétate pour donner du malate, donc NADH+ est oxydé en NAD+).  [...] Ce NADH, H+ va entrer dans la chaîne respiratoire (située dans la membrane interne) et céder ses électrons au complexe I de la chaîne. -. NADH,H+ oxydé devient NAD+, et le NAD+ rentre dan le cycle de krebs. Le NADH,H+ peut donc provenir de l'oxydation du malate après la glycolyse.  [...]