• Santé - Levures, Couples, Conditions

Ordre d'action Cdc28/cdc7

On dispose de levures mutants conditionnels pour les couples Cdc28-Cln et Cdc7-Dbf4 tel que nous pouvons obtenir 3 types de levures en jouant sur les conditions du milieu tel qu'on obtiennent.  [...] J'aurais eu tendance à déduire l'inverse... lorsqu'on exprime Cdc28 uniquement, on a entrée en phase S, tandis que l'expression seul de Cdc7 ne permet pas à la levure une reprise du cycle. Donc, Cdc7 s'exprimerait après action de Cdc28.  [...]

Conditions experimentales PCR, test primers !

Mon travail consiste a tester des couples d'amorces (primers F/R) afin de determiner les conditions experiementales pour leur utilisation. J'ai testé ces amorces avec une temperature d'hybridation standard donnée par les differents protocoles de PCR. 55°(diferente de celle indiquée sur les etiquettes des tubes des amorces) et la plus part de mes couples d'amorces ne donne pas de signal ou de signal specifique.  [...] . toutes vos idées à propos de ce que je fais me seraient utiles. determiner les bonnes conditions experimentales pour l'utilisation de differentes couples d'amorces (primers), comment savoir la bonne temperature d'hybridation, comment savoir combien de cycles de PCR pour chaque amorce.  [...]

la bonne Température d'anneling, PCR microsatellites

15 couples de primers, et chacun ses petits caprices. J'optimise au max les conditions de PCR pour chacun d'entre eux.  [...] - pour une PCR avec Ta. Tm, les amorces lorsqu'elles se fixent (car Température où il y a + de brins qui tendent à être monocaténaires que bicaténaires), s'hybrident avec + de spécificité, en particulier avec leur site spécifique de fixation de l'ADN-. du coup, plus de spécificité mais moins de rendement.   [...]

[Biologie Moléculaire] PCR en temps réel

le plus simple pour connaitre les coûts, ça ne serait pas d'aller discuter avec le labo en question Ils connaissent leur machine, les réactifs qui marchent et les prix. Ils sauront te conseiller sur les choix techniques à faire en fonction de ta problématique.   [...] Pour avoir testé et utilisé plusieurs dizaines de couples d'amorces, je trouve beaucoup plus simple de changer d'amorces que d'essayer d'optimiser les conditions.  [...]

Intransmissibilité du VIH sous traitement ?

- Il y a une dissociation entre le nombre de copies circulantes dans le sang et celui dans le sperme et s'il existe une grande inconnue, c'est bien la dose contaminante et si celle-ci reste non-contaminante pour la plupart des gens (on n'en sait rien mais on va le supposer), entre autre les sujets de l'étude dans les conditions de l'étude, cela ne veut pas dire qu'elles ne seront pas contaminante pour toutes les autres personnes qui ne seront pas dans les conditions de l'étude.  [...] Les conditions de l'étude sont des gens en couple et dans ces études, il n'est donc absolument pas question de rapports sexuels entre n'importes quels partenaires (qui se passent différemment).  [...]

Le ribosome enfin en 3D !

Puisque les ribosomes sont impliqués dans la traduction, beaucoup d'entre eux sont couplés à des ARN messagers différents, ce qui entraîne une grande diversité de complexes ribosomes-ARN. Dans ces conditions, il n'est pas possible d'obtenir une image exploitable.  [...] Pour résoudre ce problème, les scientifiques ont baissé la teneur en sucre du milieu de culture des levures. Sans cette source d' énergie, les levures sont au repos et synthétisent beaucoup moins de protéines, laissant la majorité des ribosomes vacants. Les ribosomes purifiés ont pu ensuite être préparés, de manière à obtenir des cristaux, c'est-à-dire une multitude de ribosomes identiques et bien alignés.  [...]

l'ion le plus abondant dans l'organisme

Exemple. pour un humain moyen 70 kg composé de 70% d'eau (en substance beaucoup d'hydrogène), je pense que le système digestif, dont l'estomac, qui contient la bile, les sucs gastriques, de l'acide chlorhydrique (acide fort) est la poche de liquide la plus importante du corps contenant le + d'ions.   [...] Je me demande si c'est l'acidité (au sens de pH global. 7 dans l'eau, d'ailleurs est-ce en rapport avec les conditions normales (P atm, 25°C et pH (hydrogène) acide des couples redox) qui domine la plupart () des organismes de la biosphère Même les virus (ARN, ADN).  [...]

essai vaccin contre le sida

hier aux infos ils ont parlé de la mise en place d'un vaccin contre le virus du sida, dit de phase II il me semble... Je serai très curieuse de savoir de quoi il est composé, si quelqu'un peut m'en dire plus.   [...] Pour résumer, c'est bien un essai de vaccin ou ils utilisent une combinaison de 5 peptides de HIV couples a des lipides pour declencher une réponse immunitaire contre le virus. La phase II consiste à tester l'efficacité de cette réponse (sur une centaine de personne) et d'en déterminer les meilleures conditions.  [...]

Real Time -RT-PCR

Comme il y a beaucoup de cycles il faut que tu fasses attention à definir des conditions dans lesquelles la spécificité de ton amplification est maximale, faute de quoi des bandes parasites vont perturber ta quantification.  [...] Ensuite il faut que tu definisses deux trois paires d'oligos dans la region 3' de tes RNAs cibles (le site primer3 est pas mal) et que tu testes les couples pour voir celui qui va le mieux sur une machine PCR classique. Tu optimises les conditions et hop. c'est parti.  [...]

[Biologie Moléculaire] QPCR, courbe Tm?

As tu vérifié que rien n'a été modifié dans le programme du Lightcycler concernant le nombre de cycles de PCR, l'étape de fusion (en particulier la vitesse de variation de température en °/s ou le nombre d'acquisition par seconde (sur LC480)) par rapport aux manips où les courbes de fusion étaient OK.   [...] Sinon, nous avons observé qu'un doublement de la concentration de primer peut influer dans certains cas sur l'efficacité de PCR. Et comme dit plus haut, en fonction des conditions réactionnelles (quantité de matrice, quantité d'amorces, température), cela peut suffire à créer des dimères, mais ce n'est pas systématique pour tous les couples d'amorces/gènes testés.  [...]