• Santé - Levure, Rendement, Protéine, Question

levure s. POMBE

pombe, un organisme plutot haploide, plutot que S. cerevisiae (qui somme toute, reste quand même la levure par excellence, que ce soit dans l'industrie agroalimentaire, ou dans la pharmaceutique). J'aurai aussi ajouté une phrase ou deux, expliquant pourquoi avoir choisi une levure, plutot que une bactérie car finalement, cette dernière est tout autant capable de produire des protéines animales (peut etre pas forcément fonctionnelle une fois insérée dans un animal, mais capable quand meme ).  [...] Puis, pourriez vous m'expliquer plus sur la différence entre la bactérie et la levure de point vu de rendement de protéine en question Quand est ce que on favorise un espèce de procaryote à un espèce eukayote.  [...]

[Biologie Moléculaire] Purification d'un serum à partir d'une membrane de nitrocellulose

Une question me taraude. vous voulez purifier des Ac pour les utiliser dans une colonne d'affinité. Mais selon votre procédure utilisant une sélection sur SDS-PAGE ne risquez vous pas de sélectionner des anticorps qui ne reconnaitrons pas la structure 3D de votre protéine Ce qui risquerait de poser quelques problèmes quant au rendement de votre purif par affinité sur colonne.  [...] en fait pour repondre a ta question, j utilise l'electrophorése dénaturante car ma proteine precipite en gel natif c'est une question de pHi.  [...]

extraction et dosage des protéines totales

J'ai ensuite trouvé que 40% d'une cellule est constituée de protéines. Mais bon il me manque encore le poids d'une cellule et le rendement d'un extraction... hin hin... je sais pas si c'est la bonne direction pour répondre à ma question.  [...] Je crains que ca depende énormément du type cellulaire utilisé et des techniques d'extraction. Le plus simple me semble de faire toi meme l'essai pour voir.   [...]

[Biologie Moléculaire] Purification Protéines Tag 6His

1) Les protéines se fixent mal aux billes de nickel donnant un rendement très faible, je retrouve la majorité de la protéine dans le surnageant, malgré 4 heures d'incubation. Il est possible qu'elles aient perdu leur Tag, je vais vérifier avec un anticorps cet après midi, mais si tel est le cas à quoi cela peut-il être du.  [...] Ce qui arrive parfois avec le [His] 6 c'est qu'il se replie sur la protéine, du coup le rendement de fixation est moisi. Une petite dégradation de la protéine pourrait empêcher cela et augmenter l'affinité de cette version pour les billes. Ce phénomène est totalement protéine dépendant.  [...]

[Biotechnologie] Mutation petite

La mutation petite est appelé comme cela car elle provoque le phénotype petite colonie. C'est n'importe qu'elle mutation qui touche un gène qui code une protéine impliqué dans le métabolisme respiratoire et qui en abolie tout en parti la fonction. Les levures mutante produise donc leur ATP via la fementation qui à un rendement beaucoup faible que la respiration et ont donc une croissance plus lente d'ou le phénotype.  [...] Tout la mecanistique respiratoire se fait dans la mitochondrie mais le génome mitochondriale ne code pas toute les proteines necessaires à la respiration donc on peut être de phénotype petite soit parce que la mutation touche un génes mitochondriale OU un génes nucléaire impliqué dans la respiration.  [...]

[Biologie Moléculaire] extraction d'ADN

j'aime bien vous poser une question très précise en ce qui concerne l'extraction de l'ADN a partir des graines de soja. la quantité d'ADN extraite a partir de 100mg de poudre peut elle atteindre 900 ng /ul.  [...] Et tant qu'on y est sur les précisions, il est exact que le pic d'absorption des acides nucléiques, aussi bien ADN que ARN, est à la longueur d'onde 260nm, mais les protéines absorbent aussi à 260nm même si leur pic est à 280nm. C'est la raison pour laquelle on mesure les deux et que le ratio doit être proche de 2 pour indiquer une bonne pureté en protéines.  [...]

transformation levures

J'ai une petite question, j'a réalisé une transformation de levures avec la méthode du LiAc. A la fin il faut réaliser une choc thermique en passant les tubes 30 min à 30°C puis à nouveau 30 min à 42°C. Seulement ayant eu la tête en l'air j'ai d'abord mis mes tubes une demi-heure à 42°C.  [...] Sinon je dirais comme Yoyo, la transformations de levures par LiAC n'est pas compliquée et donne un bon rendement si tu tiens compte des conseils de Yoyo.  [...]

[Biologie Cellulaire] fermentation alcoolique

Ensuite, petite remarque sur la fermentation. Pour faire de la bière on utilise une levure particulière, Saccharomyces cerevisiae, qui fermente même en présence de l'oxygène, tant qu'elle a assez de sucre. En effet, elle doit en utiliser beaucoup plus que si elle respirait, vu le faible rendement.  [...] Ok pour la NAD, j'ai cherché sur internet. En revanche j'ai aussi cherché pour la fermentation en précision et notamment les enzymes mais je me vois malheureusement souvent présenté le cycle de Krebs comme La fermentation qui produit la majeure partie de l'alcool notamment dans le vin... La question reste donc en suspens.  [...]

[Biochimie] Expression et purification de protéines recombinante en milieu minimum

Expression et purification de protéines recombinante en milieu minimum.  [...] Je cherche à améliorer mon rendement dans la production d'une protéine recombinante (7000 Da) dans E.Coli, et dans un milieu minimum enrichis en 13C et 15N. Conditions de cultures, Milieu...etc.  [...]

Vaccin hépatite B - Page 4

2- Optimisation du rendement. c'est en g/l la quantité de protéine fabriquée par litre de fermenteur et par cycle de fabrication (un bioréacteur de 20 000 l peut réaliser 20 cycles/an).  [...] Ces rendements sont souvent de l'ordre de 1,5 à 2 g/l. les meilleurs espoirs s'orientent vers 5 g/l. On dit souvent qu'un bioréacteur de 20 000 l produit assez de protéines pour assurer $ 400 millions de chiffre d'affaires par an, dans le cas d'un monoclonal (le prix de revient d'une telle production est de l'ordre de $ 50 à 60 millions).  [...]