• Santé - Lactose, Protéine, Site

Le gène SRY

Le gène comprend souvent plusieurs sites situés avant et après lui qui ont diverses fonctions. La plupart du temps ces régions servent à réguler l'expression de ce gène en fonction des besoins de l'organisme, par exemple l'opéron lactose (qui est un complexe de plusieurs gènes étroitement liés présent chez des bactéries) est un exemple célèbre où il existe un site de fixation où une protéine répresseur peut se fixer et aini inhiber la transcription de l'opéron.  [...] Les régions promotrices en revanche sont en général considérées comme faisant partie intégrante du gène car gène ne signifie pas seulement séqauence codante mais ce terme comprend normalement toute la séquence nécessaire à la synthèse d'une protéine. Il y a parfois des ambiguités sur ce qu'on entend par gène.  [...]

operon

En absence de lactose la protéine répresseur lac se lie spécifiquement au site de contrôle (operateur) dans l'opéron lac, ceci empêche l'ARN poly d'initier la transcription des gènes de l'opéron lac ce qui arrête la synthèse des protéines.  [...] La synthèse de la beta gal peut être induite par l'IPTG (isopropylthiogalactoside), en effet l'IPTG est un inducteur de l'opéron lactose. L'IPTG permet la complémentation alpha intra allélique d'une forme déficiente de la beta galactosidase, il induit donc la production de beta gal.  [...]

Le récepteur de l'élastine-laminine, son rôle dans le vieillisement vasculaire | Dossier

Figure 1. Représentation schématique du récepteur de l'élastine-laminine avec ses trois sous-unités, dont, au centre,celui de 67kD reconnaissant l'élastine, la laminine et ayant un site lectinique pour des séquences de type lactose. Indication de la voie de transmission du message vers l'intérieur de la cellule et certaines des réactions déclenchées. libération d'élastase et de radicaux libres.  [...] Des oligosaccharides avec un résidu de galactose en position terminale non réducteur, comme le lactose, en particulier, le mélibiose inhibent fortement la mort cellulaire (33). Cette inhibition est attribuée à une modification conformationnelle de la sous-unité 67 kD du récepteur quand son site lectinique est occupé, abolissant affinité de son site d'agoniste pour les peptides d'élastine.  [...]

[Biochimie] Tag His en N Ter???

J'utilisais jusque là le vecteur pET-21a et me suis rendue compte que le tag se trouvait en C ter. Malheureusement, la structure 3D de ma protéine fait qu'il se retrouve ensuite à l'intérieur et n'est donc pas accessible pour la purification sur colonne de nickel.  [...] Existe-t-il des plasmides permettant d'avoir une protéine taguée en N-Ter. Sachant que j'utilise l'IPTG pour exprimer et produire ma protéine dans des bactéries E.Coli. J'ai donc besoin d'un opéron lactose (lac).  [...]

[Biochimie] Induction d'une protéine

Non l'IPTG est un inducteur. rien a voir avec la fonctionalite de ta proteine. C'est un analogue non metabolisable du lactose. cherche sur l'operon lactose sur le net, tu trouveras tout ce qu'il te faut.  [...] L'IPTG est donc une molécule qui va stimuler un opéron ( ici l'opéron lactose) et qui va donc augmenter l'activité transcriptionnelle de la bactérie, d'où une augmentation de la synthèse de ma protéine.  [...]

Pourquoi la cellule ressemble t-elle à une usine ?

Les organites dans leur grande majorité sont maintenus voire structurés par des protéines cytosquelettiques. C'est un peu comme des Légos qui peuvent s'assembler et se désassembler à l'envie, sorte de toile tridimensionnelle qui sert autant de poutres que de rails aux différentes sous-unités cellulaires.  [...] D'autres protéines permettent l'ancrage des organismes à ce cytosquelette, soit de façon motile (la fixation peut ou non glisser le long d'un rail ), soit de façon terminale (le bout d'un filament protéique s'accroche fermement et c'est la polymérisation/dépolymérisation éventuelle à l'autre bout qui va tirer ou pousser le bastringue).  [...]

L'influence de l'environnement sur le phénotype : besoin de conseils de méthode !

- Si le milieu est uniquement constitué de glucose, alors la bactérie consomme cette substance et la transcription du gène lacZ correspondant à la protéine impliquées dans le métabolisme du lactose est très faible.  [...] - Si le milieu contient du glocuse et du lactose, alors, la bactérie consomme le glucose, puis le lactose. On a donc une répercution sur la transcription du gène lacZ de la protéine évoqué précédement. le glucose étant consommé en premier, la transcription est donc très faible dans un premier temps, puis forte dans un second temps puisque la bactérie consomme le lactose.  [...]

clonage insert

On dispose d'un ADNc de 2825pb obtenu à partir d'une lignée cellulaire humaine et cloné dans le vecteur lambda gt11 au site EcoR1, au sein de l'opéron lactose.  [...] Le vecteur recombinant est linéarisé puis incubé avec une ARNpol reconnaissant le promoteur Psp6 qui se trouve également sur ton vecteur et si tu met ça avec des DNTPs j'imagine qu'il se passe une reverse transcription.   [...]

Bactéries : les mécanismes de la régulation | Dossier

En absence de lactose dans le milieu, les gènes codant ces protéines ne sont pas exprimés, parce qu'une protéine régulatrice est fixée sur l' ADN au niveau de la région où se trouvent ces deux gènes et en empêche l'expression (le processus qui mène du gène à la protéine qu'il encode ).  [...] Lorsqu'une culture de ces bactéries ne dispose que de lactose comme source de carbone et d'énergie, cette petite molécule, si elle est en concentration suffisante, pénètre un peu dans les bactéries par diffusion, et se lie à la protéine régulatrice en la modifiant de telle sorte qu'elle se détache de l'ADN, où les deux gènes précédemment réprimés peuvent être exprimés.  [...]

[Génétique] Analyse plasmides recombinants/non recombinants

Alors voilà. On a le plasmide pBSK qui fait 3 kb. Le technicien de laboratoire a dans un premier temps clivé ce plasmide grâce à une enzyme de restriction (EcoRI) au niveau d'un site multiple de clonage situé au niveau de l'opérons lactose puis l'a transféré dans une bactérie d'E.  [...] . lors de la lyse de mes bactéries, un grand nombre étaient bleues dans mon tube A contrairement à mon tube B ou elles étaient toutes visiblement blanches… De plus, la bande à 3000 est beaucoup plus prononcée que la bande à 6000, à peine visible….   [...]