• Santé - Kits, Commerciaux, Principe, Amplification

[Biologie Moléculaire] RT-PCR spécifique

Tu peux toujours utiliser les même primer que la PCR classique mais vérifie s'ils sont dessinés sur la phase codante. Autre chose je ne crois pas qu'il existe de primer moitié poly d(T) car justement ces primer amplifie tout les ARNm.   [...] oui entre temps j'ai remarqué que les kits commerciaux one-step qRT-PCR se basent sur le principe d'utiliser les mêmes primers pour la retro-transcription et pour l'amplification, donc ça doit marcher. Par contre, je devine ça doit être moins spécifique vu que la retrotranscriptase fonctionne entre 40-50°C selon le type.  [...]

[Divers] utilisation de imageJ

je suis en train de mettre au point un protocole de migration,mais avant d'utiliser des kits commerciaux, j'aimerais pouvoir mesurer la migration observée (images prises sur vidéo-microscopie) en utilisant image J.le souci c'est que je ne connais pas du tout le logiciel.  [...] combien d'images dois-tu traiter, as-tu des connaissances en programmation (saurais-tu écrire un programme qui récupère un tableau de nombres et calcule la distance de migration à partir des coordonnées des points), as-tu des connaissances en java Pourrais-tu m'indiquer un lien ou pourrais-tu poster une image du même type que celles que tu veux analyser.   [...]

[Biologie Moléculaire] Extraction ARN plaquettaire

Merci pour ta réponse. Non je n'ai pas essayé d'autres méthodes pour l'instant, je vais étudier la solution du phénol/chloroforme. Tu penses qu'elle a de meilleurs rendements que les kits commerciaux.  [...] Oui le phénol chloroforme a toujours de meilleurs rendements principalement à cause des élutions dans les kits. Les colonnes ont un pouvoir limité de rétention des acides nucléiques. Donc ils en retiendront une quantité x et leur reste passera.  [...]

Immuno IL2

Trèves de plaisanterie à 0.12 euros. Pour les dosages d'interleukines, il existe des solutions ELISA. As-tu recherché de ce côté.   [...] Il y a des kits commerciaux (Quiagen...) qui sont utilisés pour le dosage de l'IL2. si t'es un as de la cuisine tu pourras utiliser la technique de dosage ELISA.  [...]

[Biologie Moléculaire] Calcul d'efficacité nécessaire en TaqMan ?

Là, je ne cherche pas midi à 14 h, j'utilise les kits commerciaux prévus à cet usage de A à Z. En revanche, une technicienne de mon labo qui a l'habitude de la PCR quantitative m'affirme qu'en TaqMan, contrairement au SYBR Green, on n'a pas besoin de faire de test d'efficacité.  [...] En fait, je vais utiliser un kit commercial (amorce de RT, amorce sens et anti-sens, sonde) désigné entièrement par le fabricant. Du coup, la représentante commerciale m'ont assuré que le calcul d'eff. n'était pas nécessaire, tant que je restais dans les fourchettes de sample indiquées (en l'occurence, 1 à 10 ng d'ARN total par réaction de RT).  [...]

[Biologie Moléculaire] Meilleur technique de séquençage

Le principe moléculaire, c'est toujours du Sanger je crois bien. Ensuite, le shotgun ou le pyroséquençage, ce sont des stratégies pour séquencer plus rapidement de longs génomes, basés sur des stats qui optimisent le nombre et la taille des fragments à séquencer pour être exhaustif.  [...] Pour connaître le principe de ces méthodes de séquençage, les sites (commerciaux) des entreprises qui ont automatisé ces techniques, proposent des animations et des explications très accessibles.  [...]

[Biologie Moléculaire] Elution ADN gel agarose

J'ai surtout utilisé des kits commerciaux qui ne parlaient que du Sybr car... ben le GelRed existait pas vraiment à l'époque de la rédaction, ou du moins était utilisé par une part marginale de labo. Maintenant ce produit devient de plus en plus populaire, donc je pense que les fournisseurs ont du faire des tests et pourront te répondre si tu utilises ça.  [...] il y a plusieurs solutions. La micro élution en boudins de dialyse, les techniques a l'agarase, ou encore des kits de purif comme le http.//www.qiagen.com/products/dnacl...actionkit.aspx.  [...]

Le diagnostic de la grippe aviaire | Dossier

L'identification du sous-type par les kits commerciaux a montré ses limites, les anticorps monoclonaux dirigés contre l'influenza A/H1 donnent une réaction croisée avec le sous-type H5. Les résultats doivent donc être confirmés par le kit OMS qui contient un pool d'anticorps monoclonaux spécifiques du type A/H5, un pool dirigé contre le type A et B et un pool spécifique de A/H1 et A/H3.  [...] Technique de RT-PCR ou technique d'amplification en chaîne par polymérisation après transcription inverse. Elle permet d'amplifier le génome viral, de détecter spécifiquement un ARN viral et donc d'identifier le type et le sous-type viral (Coiras, Aguilar et al.  [...]

L'antirides Botox inquiète les autorités américaines

Aux Etats-Unis, la toxine botulique, en usage médical à haute dose, aurait provoqué 16 morts. Or, il s'agit du principe actif du Botox et d'autres produits commerciaux utilisés comme antirides. Aucun accident n'est survenu après une utilisation en cosmétique, donc à faible dose, et cette molécule n'a pas été interdite par les autorités, qui ne valident d'ailleurs pas les chiffres d'accidents mortels.  [...] la réduction des rides de la peau, par effet paralysant des muscles faciaux. L'industrie cosmétique s'en est emparée. La méthode d' application est la même (une injection sous-cutanée) mais les doses restent bien plus faibles.   [...]

princeps et médicaments génériques

Ceci illustre bien à quel point les commerciaux des labos sont prêts à tout pour limiter la progression de leurs concurrents génériques, y compris donner de fausses informations aux médecins ( il y en a même qui leur expliquent que les génériques contiennent des énantiomères du princeps moins actifs et du barratin de ce genre.  [...] Tous les médicaments vendus en France ont une AMM. la composition est soigneusement codifiée (principe actif, excipients). Donc la tolérance de 20%... je n'y crois pas du tout. La biodisponibilité est également codifiée.  [...]