• Santé - Intérêt, Cellules, Protéines

relation entre nombre de cellules \quantité de protéines

Telle que je lis votre question je comprends. si j'ai 10 n cellules qui donnent 1mg de protéines, combien aurais-je de protéines si j'ai k10 n cellules. La question est sans intérêt.  [...] En fait, j'ai besoin de ces calculs avant de commencer la culture cellulaire n l'intéret est de savoir combien de cellules j'aurais besoin pour avoir par exemple 270ug de protéines, je me suis dit peut étre il existe un rapport selon lequel on pourra savoir pour 10 n cellules...j'aurai x mg ou ug de protéines.  [...]

[Biologie Cellulaire] protocole d'adhesion cellulaire

je suis en stage dans un labo de cosmétologie et je dois faire un protocole d'adhésion cellulaire sur des cellules de l'épiderme.  [...] je dois stimuler les cellules avec des agents d'intérêt pour savoir si cela agit sur l'adhésion. le souci c'est que ces stimulations doivent durer au moins 24 h avant de récupérer les cellules pour les tester sur le kit d'adhésion. comment je peux récupérer les cellules sans endommager la membrane et surtout les protéines membranaires.  [...]

[Biochimie] Synthèse des protéines

Pour ma part je resterai plus dans la biochimie. Tu peut tout simplement amener le sujet en parlent de l'interet des proteines dans les cellules (canaux de transport manbranaire, enzyme...) et pour amener le sujet, mais d'ou viennent les proteines... Voila comment moi je mis prendrai.  [...] Pourquoi je procèderais ainsi Simplement parce que l'on va remonter la chaine du génome à la protéine. Du coup je pense que l'angle génétique est plus intéressant que l'angle fonctionnel.  [...]

[Biochimie] tampon de lyse

Qu'est ce qui te fait dire que tes protéines d'intérêt ne sont pas solubilisées par le tampon de lyse Les protéines que tu regardes sont-elles membranaires, localisées dans un sous-compartiment cellulaire particulier, les surexprimes-tu Comment lyses-tu tes cellules (composition tampon, étapes physiques de lyse (choc thermique, piston Dounce, vortex, sonication,...)).  [...] j'ai lysé mes cellules par un tampon de Karla au Bertin,le tampon renferme dees antiprotéase,PMSF,NAF,EAU,Napp.Je cherche aussi bien des protéines membranaire et du stress oxydative certaine sont cytosolique,c'est bisard j'ai fais un dosage BCA j'ai des concentrations trés faible en protéine entre é 2 et 5 mg/ml mais c'est jouable pour déposer en faisant l'éléctrophorése à la fin du transfert j'ai révéler au ponceau il n'ya pas eu de transfert sur ma membrane et effectivement à la révalation d'une protéine j'ai rien vu au chémidoc alors que les marqueurs ont transférer.  [...]

[Biochimie] Extraction et dosage des protéines

Ensuit je transfert le tout dans du Ripa et j'extrait les protéines. Je me retrouve encore avec plus ou moins de cellules sanguines dans ma solutions dues à la lyse. Je n'ose pas l'éliminer car se trouvent également mes protéines d'intêret. Ceci affecte mon dosage (méthode de Bradford).  [...] De plus, lorsque vous dosez au Bradford, vous dosez les protéines libres dans votre solution. Mais avant de déposer sur votre gel vous mélangez votre solution avec du dénaturant et chauffez un peu non Vous allez alors lyser les cellules sanguines présentes encore dans votre solution et libérer les protéines qu'elles contiennent et qui n'avaient pas été dosées au Bradford.  [...]

[Biologie Moléculaire] Lyse cellulaire

Je voudrais savoir s'il est possible de lyser des cellules pour récupérer par co-IP une protéine liée à un lipide. Parce que forcément la lyse cellulaire va entraîner une rupture des interaction lipides-protéines et donc du complexe que je cherche à récupérer.  [...] non, un crosslinker = un produit qui fait des liaisons covalentes entre tous les trucs qui passent à sa portée. C'est utilisé pour fixer des liaisons labiles le temps de purifier une interaction. Par exemple on l'utilise en ChIP pour fixer les protéines sur l'ADN, avant de lyser les cellules et de récupérer l'ADN lié aux protéines d'intérêt (formaldehyde par exemple).  [...]

Quel test statistique utiliser?

Je voudrais comparer le niveau d'expression d'une protéine entre des cellules transfectées et non transfectées. Pour cela j'ai réalisé un lysat cellulaire et fait migré mes protéines pour détecter ma protéine d'intérêt. J'ai par la suite quantifie l'intensité des bandes.  [...] Maintenant je voudrais savoir s'il existe une différence significative dans le niveau de la protéine d'intérêt entre les cellules transfectées et non transfectées.  [...]

Des nanorobots d'ADN pour des thérapies anticancéreuses plus ciblées

Ils n'ont rien d'électronique ni de mécanique mais leurs auteurs les appellent malgré tout nanorobots. Ces petites structures de 35 nanomètres sont capables de transporter un médicament et de le délivrer uniquement aux cellules malades. À l'instar des cellules du système immunitaire, ils reconnaissent leur cible grâce aux protéines présentes sur la surface de la membrane plasmique.  [...] Dans cette expérience, le nanorobot adopte plus ou moins la forme d'un tonneau contenant en son centre la molécule d'intérêt, un médicament. À l'une de ses extrémités, il possède deux anticorps complémentaires de protéines présentes sur la membrane de cellules malades.  [...]

Grippe : vers un vaccin à large spectre d'un nouveau genre

Cette performance est possible parce que les scientifiques ont pris soin de sélectionner des fragments d'hémagglutinine communs à de nombreuses formes virales. Il s'agit notamment d'une région de la tête de la protéine nécessaire au pathogène pour se lier à ses victimes, et d'une partie de la base, utilisée par le virus de la grippe pour pénétrer dans la cellule hôte.  [...] Quant à l'intensité élevée de la réponse immunitaire, les auteurs l'expliquent par la densité d'hémagglutinine. Dans le virus entier, celle-ci est plus élevée et associée à la neuraminidase, et ces protéines peuvent cacher aux cellules immunitaires l'accès aux régions d'intérêt.  [...]

[Biochimie] Comment désagréger des protéines recombinantes?

[Biochimie] Comment désagréger des protéines recombinantes.  [...] Comment désagréger des protéines recombinantes La protéine est produite dans E.coli puis je procède à une extraction protéique, une purification IMAC et un dessalage. Enfin, je la filtre à 0.2um avant de la tester sur cellules mais la protéine d'intêret forme des agrégats après quelques jours de conservations à 4°C ce qui m'oblige à relancer des campagnes de production.  [...]