• Santé - Intérêt, ADN, ARNm

[Biologie Moléculaire] PCR en temps réel ou Q-PCR

Si je devais mettre de la DNAse, je la mettrais avant la RT histoire de bien éliminer toute trace d'ADN dans ma fraction d'ARN totaux, ferait la RT des ARNm puis la qPCR de l'ARNm d'intérêt en dernier.  [...] Sinon, oui les produits des PCR de l'ADN génomique et ADNC devraient être différents... mais normalement, si tu as bien mis ta DNAse avant la RT, pas de contamination possible.  [...]

[Biologie Cellulaire] La cellule mystère.... - Page 3

Je ne comprend pas l'interet d'utiliser un ADNc avec un ARN pré-messager. Pourquoi on ne se contente pas de faire une hybridation entre ADN normal et ARN normal (maturé) (éventuellement après avoir isolé l'ADN pour effectivement avoir le morceau qui nous intéresse) Ca serait plus simple, plutot que de se taper une rétrotranscription à partir d'un ARNm.  [...] A attendez je crois que j'ai fait fausse route. En fait c'est pas de l'ARNm mais de l'ADNc (comme vous dites )issu de la retrotranscription d'ARNm ayant subit l'épissage. Donc en tout cas les boucles correspondent bien aux introns de l'ADN(normal).  [...]

[Biotechnologie] ADNc

Je ne suis pas sûre d'avoir bien compris l'intérêt d'obtenir de l'ADNc à partir de l'ARNm plutôt que d'utiliser de l'ADN chromosomique. Est-ce que c'est bien pour ne pas avoir les exons.  [...] L'ADNc est utilisé essentiellement pour la préparation de banque d'ADNc, constituée à partir d'ADN complémentaire (qui est obtenu par transcription inverse de l'ARNm d'un organe, d'un tissu ou de cellules en culture).  [...]

[Biologie Cellulaire] A quoi sert le co-transfert avec un vecteur de résistance à un antibiotique

C'est pour faire un transformant stable exprimant ton gène d'intérêt. L'idée est de transfecter avec un vecteur codant pour une protéine de resistance à un antibio. Ce vecteur va s'intégrer (évenement très rare), et les transformants (ayant intégré le vecteur de manière stable) seront resistants à une sélection à l'antibiotique.  [...] Il arrive que le vecteur contenant l'ADNc (dans ton cas l'ADNc (pas ARNc, les vecteurs sont a ADN en majorité (sauf certains vecteurs viraux)) codant les recepteurs de ta cellule, sous le controle d'un promoteur fort, permettant une forte synthèse de l'ARNm correspondant) pour le gène d'intérêt ne comporte pas de gène de resistance à des antibio eucaryotes.  [...]

schéma fonctionnel sur la synthèse d'une protéine

La transcription a lieu dans le noyau d'une cellule eucaryote et dans le cytoplasme d'une cellule procaryote. Cela consiste à traduire un gène de l' ADN en une molécule d'ARN messager (acide ribonucléique messager).Pour cela une enzyme appelée ARN polymérase effectue une copie de l'un des gènes.  [...] Afin d'établir clairement qu'il s'agit d'une copie, elle remplace la base T (thymine) par une base suppléante. U (uracile). Les bases (A, T, G, C) sur un brin de l'ADN spécifient l'ordre des bases sur le nouveau brin d'ARNm (A, U, G, C). L'ADN demeure à l'intérieur du noyau, pendant que l'ARNm se déplace du noyau au cytoplasme.  [...]

La couleur des yeux qui change - Page 2

Alors oui. je suis également d'accord pour dire que ce n'est pas possible que le changement de couleur des yeux soit dû à une intégration de gènes, puisqu'il faudrait que de l'ARNm du donneur soit déversé dans le sang avant transfusion puis que celui-ci intègre des cellules de l'iris (car c'est là où sont actives les enzymes d'intérêt) or je ne crois pas que ce soit possible comme dit ci-dessus, in-vitro on peut faire rentrer de l'ADN/ARN par transfection mais in-vivo.  [...] Comme je disais en MP, Je ne dis pas qu'aucun facteur de transcription n'a d'activité inhibitrice, (car les protéines peuvent etre impliqué dans plusieurs voies, plusieurs types d'interaction et avoir differents roles), mais ce n'est pas son aspect facteur de transcription qui en fait un inhibiteur, il peut etre les deux a la fois, mais l'activité facteur de transcription a pour but d'augmenter la synthèse d'ARNm, pas d'inhiber d'autres enzymes (ce que meiosis semblais interpréter de mes dires), mais la même protéines peut avoir d'autres roles que celui d'etre un facteur de transcription, je ne dis pas le contraire.  [...]

PCR et RT-PCR

Pour donner un exemple, si on veut amplifier des ARNm, on peut utiliser une amorce poly-T qui va venir s'hybrider sur la queue poly-A des ARNm. L'enzyme RT va ensuite allonger cette amorce et synthétiser l'ADNc (attention, il me semble qu'on parle d'ADNc uniquement quand il s'agit d'ADN obtenu par transcription inverse).  [...] On va ensuite pouvoir effectuer une PCR classique sur ces ADNc (c'est alors qu'on va cibler la région d'intérêt, puisqu'on a rétro-transcrit l'ensemble des ARNm).  [...]

Un vaccin contre la grippe qui protège à vie ?

L'idée de la vaccination par ARNm n'est pas nouvelle. Des scientifiques ont déjà pensé utiliser l'ADN du virus de la grippe pour stimuler le système immunitaire. Seulement, ces vaccins n'ont jamais été approuvés, de peur que ces fragments s'intercalent dans la molécule humaine et modifient l'expression des gènes.  [...] Mais on pourrait faire encore mieux. Dans Nature Biotechnology, les scientifiques allemands suivent la piste d'un vaccin à base d' ARNm. Cette structure est l'intermédiaire entre l' ADN et les protéines. Ainsi, au lieu d'injecter directement hémagglutinine et neuraminidase, les auteurs inoculent l'ARNm qui, une fois traduit par la machinerie cellulaire, aboutit à ces deux antigènes.  [...]

[Biochimie] La synthèse des protéines !

Bah, je voulais essayer de lui faire trouver tout seul, car c'est assez frustrant quand on nous donne une interprétation tout de suite. ^^.  [...] D'ailleurs, si l'on s'en tient à l'expérience, on ne peut rigoureusement rien dire sur la présence ou l'absence d'ARNm, simplement supposer l'existence d'un intermédiaire entre ADN et protéine dans la mesure où l'on sait qu'il n'y a pas d'ADN dans le hyaloplasme.  [...]

[Biologie Cellulaire] transfection

et j'aurais besoin d'une confirmation (et promis après j'arrete.xD), la transfection permet d'étudier la protéine synthétisé à partir de l'adn c transfecté ou d'étudier les conséquences de la présence de cet ADN.  [...] Transfecter un ADNc dans une cellule n'a d'interêt que s'il est équipé d'un promoteur qui permettra d'initier sa re transcription en ARNm, ce qui est rare (si tant est que ça existe).  [...]