• Santé - Idée, Concentration, Anticorps

[Biologie Cellulaire] Dosage protéines dans du glycérol ?

J'ai un problème. on m'a donné un tube d'anticorps (sérum immunopurifié) qui m'intéresse beaucoup mais je ne sais pas quelle est la concentration précise en anticorps (on m'a dit entre 100 et 500µg/mL, c'est large) et j'en ai besoin.  [...] Est-ce que tu as vraiment besoin de doser ton anticorps Si c'est pour faire un western, tu peux toujours faire une gamme avec plusieurs volumes d'anticorps pour avoir une idée de la quantité optimale. Ca ne va pas te donner la concentration mais tu pourras toujours faire des belles choses avec.  [...]

VIH : dépister le virus du Sida... avec un lecteur DVD

Les disques (en A) utilisés sont du même format que les DVD, mais disposent de réservoirs (visibles en B) dans lesquels on place les échantillons. Grâce à la photodiode, on peut observer le contenu dans le détail (en C) et obtenir une idée de la concentration en lymphocytes T CD4+, accrochés à un anticorps. Russom et al., Lab on a Chip.  [...] En revanche, si la concentration est très faible, les risques de souffrir d' immunodéficience sont bien réels. Ainsi, ces disques sont équipés d' anticorps reconnaissant spécifiquement ces cellules immunitaires.  [...]

[Immunologie] Cytotoxicité indépendante de l'antigène

Je travaille actuellement sur un anticorps bispécifique antiCD3 x anti antigène tumoral surexprimé dans certains types de cancers. Pour cela, je fais un ratio 10.1 de PBMC (10).cellules cibles(1) et je teste si mon anticorps est capable de lyser spécifiquement les cellules tumorales (=cellules cibles) possédant l'antigène surexprimé comparativement à un témoin neg (qui sont des cellules saines).  [...] cependant je retrouve une lyse sur des cellules saines. Je ne comprends pas pourquoi cette lyse semble dépendante de la concentration en anticorps bispécifique.  [...]

[Biochimie] Dilutions d'ELISA !

Une interférence observée en cas d'excès d'Ag entraînant une saturation des Ac. Par conséquent, un même signal pourra correspondre à deux concentrations en Ag différentes. Pour s'affranchir de cette interférence il faut diluer l'échantillon.  [...] Au delà d'un certain seuil, la concentration de l'anticorps est trop élevée par rapport à la concentration d'Antigène coaté, donc tu ne peux plus détecter de différence de concentration, tu es arrivé à saturation.  [...]

[Biochimie] Principe et manipulations générales pour le test ELISA indirect

À quoi cela sert-il de trouver une concentration optimal pour les anticorps Serait-ce pour l'intervalle d'efficacité de la lecture d'absorbance.  [...] Comment procède-t-on pour réaliser une courbe standard Utilise-t-on une concentration connue de profiline avec différentes dilutions d'anticorps.  [...]

[Immunologie] Mise au point d'ELISA Compétitive indirecte

Merci beaucoup pour votre réponse, j'ai essayé de varier les concentrations de l'anticorps de capture, et la molécules compétitive (Benzodiazepine-HRP) couplée à la hrp en même temps.  [...] Oui pour les concentration de 600, 700 et 750 ng/ml, qui donnaient une DO= 3 et les concentration de 800 ng/ml et 1µg/ml de bnzo-hrp qui donnaient successivement les DO= 1.2 et DO= 2.1 nous avons fixé la concentration de l'anticorps de capture à 6 µg/ml.  [...]

[Microbiologie] western blotting

Ensuite, si vous n'avez aucune idée du titre des anticorps, et de leur qualité, il va être difficile de faire autre chose que d'essayer d'autres dilutions. Les anticorps perox ne sont pas très stables (c'est l'enzyme qui se dégrade), vous pourriez utiliser un autre lot, neuf, ou tester ce secondaire avec un anticorps primaire dont vous être certain(e).  [...] Le rouge ponceau est aussi pratique pour vérifier qu'il y a bien des protéines sur la membrane, les étapes de blocages peuvent parfois etre problématiques. J'ai parfois observé qu'un blocage plus court améliorait les signaux.   [...]

[Microbiologie] MIC E. coli [Université]

Je fais actuellement une recherche sur les MIC (Minimum Inhibitory Concentration) de quelques anticorps pour notre grande amie Escherichia Coli.  [...] Cependant j'éprouve quelques difficultés à trouver en ligne une bonne documentation en ligne. Si certains d'entre-vous pouviez m'aiguillez dans mes recherches j'en serai reconnaissant.   [...]

[Biochimie] Creer un anticorps

je dois déterminer une séquence pour créer un anticorps (sous traitance) mais je ne sais pas quoi choisir. ma protéine est cytoplasmique. je n'ai pas une idée 3D de ma protéine (proteine peu étudiée) donc niveau conformation c'est au feeling. Une idée.  [...] Je suis tout à fait d'accord avec Kucing. Dans le cas où un peptide est absolument nécessaire, afin de déterminer la reconnaissance spécifique de ce peptide par un anticorps, le mieux est de faire un blastp du peptide. Ainsi la connaissance de la E-value te donneras une idée de la qualité de ce peptide pour cette application.  [...]

Sondage sur le sida

-Pour aidé les population africaine, il faudrait avoir la m^me démarche que pour les pupolations occidentales, la scolaristion, je ne dis pas l' information car croyé moi ce n' est que quand j' ai fais le chapitre du sida en terminale, que j' ai eu l' impression de comprendre un minimum la gravité de cette maladie et qu' il me restait encore bien des choses à découvrir.   [...] On dit souvent rapport sexuelles, mais c' est assez flous, parce qu' on pense seulement aux pénétrations anales ou vaginales, mais même la fellation est un comportement à risque. Et ça je ne l' ai su qu' en lisant les autres postes sur le sida.   [...]