• Santé - Génome, Cellule, Plasmide

[Génétique] Questions à propos de la thérapie génique

Si j'ai bien compris, une cellule transcomplémentante est une cellule qu'on a préalablement modifiée pour qu'elle apporte les gènes manquants. Pourquoi trans parce que les gènes complémentants, c'est à dire ceux qui manquent, sont présents sur une autre molécule d'ADN (un plasmide ou le génome nucléaire/chromosomique) que la molécule introduite.  [...] Certains virus permettent juste d'introduire le transgène dans la cellule sans pour autant l'intégrer au génome. Ce qui implique une dilution du transgène au cours des divisions cellulaires.  [...]

Définition | Transfection | Futura Santé

La transfection est une technique de biologie moléculaire qui consiste à introduire un ADN étranger dans une cellule eucaryote cultivée in vitro. Chez les bactéries, on parle plutôt de transformation que de transfection.  [...] Une transfection peut être stable (le matériel génétique s'insère dans le génome ) ou transitoire. La transfection a en général pour but de faire exprimer à la cellule un gène donné. Avant d'entrer dans la cellule, le gène d'intérêt est inséré dans un vecteur qui est soit un plasmide (un ADN circulaire) soit un virus.  [...]

[Biologie Cellulaire] Stabilité de l'ARNm

Quand tu veux exprimer une protéine dans une cellule, tu peux transfecter les cellules de manière à ce que ton ADN (plasmide le plus souvent) reste longtemps dans ta cellule. c'est la transfection stable. Tu as alors 2 possibilités. soit tu peux intégrer ton gène dans le génome cellulaire par recombinaison homologue, soit tu utilises des plasmides auto-réplicatifs qui ne s'intègreront pas (on appelle ça des épisomes).  [...] soit tu peux intégrer ton gène dans le génome cellulaire par recombinaison homologue, soit tu utilises des plasmides auto-réplicatifs qui ne s'intègreront pas (on appelle ça des épisomes).  [...]

[Biologie Cellulaire] Virus

Un plasmide en revanche c'est légèrement tordu, cela reviendrai aussi à considérer qu'un chromosome est vivant, voir même qu'un simple gène est vivant, alors que ni le chromosome et encore moins le gène ne sont vivant en soit, la base de a vie c'est tout de même la compartimentation, d'ou le fait qu'une cellule (avec tout son contenu) puisse etre considéré comme vivant, mais un chromosome, un plasmide ou un gène, n'est pas l'ombre de quelque chose proche de vivant, c'est ni plus ni moins une molécule, et une molécule ne sera jamais considérée comme vivante (pas même les prions, qui sont les plus différentes des protéines).  [...] D'autant plus qu'un plasmide complet dans une cellule viable mais dépourvu de materiel génétique ne sera pas capable de faire survivre a cellule, tandis qu'un génome complet dans une cellule vide de materiel génétique mais viable, pourra reprendre le cours de sa vie de cellule, car il y a tout ce qu'il faut, contrairement au plasmide.  [...]

compter des cellules/marquer de l'ADN/transgenese

- lors de l'introduction du transgène dans le génome de ma cellule souche grace a un plasmide comment faire pour savoir sur quel chromosome s'est insérer le gène.  [...] Les cellules vont passer devant quelque chose que l'on va apeller grossièrement un récepteur (un peu comme les radars de la police si tu vois ce que je veux dire. ) qui va mesurer la taille de ta cellule, qui va compter le nombre de cellules et qui peut également mesurer une fluorescence sur ta cellule (si tu as fait une construction à la GFP par exemple.  [...]

[Biotechnologie] Clonage Eucaryote

Concernant le clonage de cellules eucaryotes, est ce possible qu'une cellule de mammifère accepte un plasmide et le réplique comme il faut ou ce plasmide (contenant le gène étranger) doit il absolument être intégré au génome cellulaires.  [...] En gros, si je met un plasmide dans une cellule de mammifaire, est ce que le plasmide sera pris en charge par la cellule, c'est à dire, est ce qu'il sera recopier etc.  [...]

[Biochimie] Clonage vecteur navette sur la levure

En fait, le passage en bactérie te sert à amplifier la quantité de plasmides, pour être certain que, lors de ta transformation, de l'ADN entrera effectivement dans la cellule.  [...] Dans le cas du plasmide, tu peux vouloir, ou non l'intégrer au génome ou bien le laisser autonome dans la cellule s'il dispose de sa propre origine de réplication.  [...]

[Biologie Moléculaire] si et shRNA

Voilà, j'ai une petite question à propos des siRNA et des shRNA, je ne vois pas bien leur différence... en fait, il m'a semblé comprendre que les siRNA étaient utilisés pour une transfection transitoire alors que les shRNA pour une transfection stable (du fait qu'ils sont introduits sous forme double brin) Et pour transfecter une cellule avec un sh ou un siRNA, faut-il les introduire dans un plasmide Et peut on utiliser les mêmes moyens de transfection pour les deux Enfin, c'est un peu confus dans ma tête.  [...] -les shRNA sont introduits via un vecteur (plasmide ou virus) donc introduction dans le génome de la cellule et ne se perd donc pas lors des divisions cellulaires.  [...]

[Microbiologie] Génomes segmentés et plasmides

On dit souvent que les plasmides sont des éléments facultatifs dans le génome des bactéries les dotant de facteurs de virulence, facteurs de résistance aux antibiotiques, cependant, considérons une cellule bactérienne normale avec un chromosome circulaire unique et un plasmide circulaire.  [...] Au cours de l'évolution, si ce plasmide acquiert par divers moyens (transferts latéraux, recombinaisons...) des gènes nécessaires à la survie de la bactérie, ce plasmide pourra-t-il devenir un second chromosome.  [...]

[Génétique] Conséquence de l'intégration d'un vecteur dans une bactérie

Donc pour un plasmide qui ferait disons 4,6kb cela représente donc 10 du génome. Si le plasmide code 4 protéines là aussi on est à 10. Cela me semble totalement négligeable pour une cellule. Mais bon peut etre que je me montre.  [...] Quand la bactérie se divise, un nombre aléatoire de plasmides va dans chaque cellule fille. Ensuite la bactérie re-multiplie les plasmides en même temps que son propre génome avant de se re-diviser.  [...]