• Santé - Génétique, Sondes, Marquage, Séquences

[Génétique] comment obtenir des sondes spécifiques pour un marquage chromosomique avec les séquences alu?

Si j'ai bien saisie les bases. les séquences alu sont des marqueurs de répétition du génome utilisés dans ce cas. Ce qui permet l'identification lors d'un marquage basé sur les sites alu c'est leur nombre de répétition et leur répartition sur les télomères qui diffèrent d'un chromosome à l'autre.  [...] Je vois bien comment avec un simple marquage de ces séquences on peu obtenir un résultat dont l'analyse serait proche de celle d'un marquage bande sombres/bandes clairs. En revanche je ne comprend pas comment en se basant sur l'hybridation de ces séquences universelles on puisse arriver a un marquage spécifique in situ du chromosome 8 en vert,du 7 en bleu.  [...]

génétique inverse

En génétique classique, on part d'une protéine connue, depuis laquelle on synthétise des sondes ADN dégénérées (c'est-à-dire incluant toutes les séquences d'ADN pouvant coder pour une même partie de la protéine) et on retrouve ainsi le gène originel par hybridation.  [...] En génétique inverse, on repère par l'analyse de liaison ou linkage une zone dans laquelle se trouverait le gène dont la mutation est responsable d'une maladie, puis on séquence cette zone et on tente de faire exprimer tout ce qui pourrait ressembler à un gène.  [...]

[génétique] questionnaire de génétique

C'est essayer de soigner une maladie par l'introduction de matériel génétique (je crois), pour rétablir un génome fonctionnel dans des cellules malades.  [...] PCR pour amplifier le matériel génétique qui est souvent récupéré à l'état de trace. Puis Southern avec comme sondes des séquences microsatellites. Les tailles différentielles des fragments repérés forment un ensemble spécifique de chaque individu. Même expérience en parallèle sur l'individu en question et comparaison de son profil de Southern avec celui trouvé sur les lieux du crime.  [...]

[Biologie Moléculaire] Un anticorps marqué par un fluorochrome peut-il se fixer à un acide nucléique?

l'ADN et l'ARN c'est des acides nucléiques donc ils sont plutot marqués par des sondes fabriquées avec des sequences complémentaires à celle qu'on veut regarder.  [...] le contact puce-cible entraine donc l'hybridation de la double hélice d'adn, cela peut être mis en evidence par des techniques optique sous eclairage fluorecent ou par radioactivité. Un systeme de marquage via des traceurs fluorescent ayant été realisé prealablement.  [...]

Archéologie : une nouvelle technique rend l'ADN plus bavard

Les scientifiques expliquent avoir utilisé de l' ARN plutôt que de l'ADN. Leurs sondes, c'est-à-dire des séquences d' acides nucléiques marquées se liant à des séquences complémentaires, sont capables de couvrir l'ensemble du génome d'un Homme moderne. Elles ont, de plus, été équipées d'un groupe chimique qui leur permet de se fixer à des billes microscopiques.  [...] Les auteurs ont éprouvé leur méthode sur une douzaine de restes humains datés de -3.500 à -500 ans. Les résultats sont épatants. ils ont pu séquencer 13 fois plus de matériel génétique qu'avec les techniques actuelles en moins de manipulations, ce qui permet d'en découvrir davantage sur les squelettes.  [...]

[Biologie Moléculaire] Southern blot !!!

Par ailleurs, ne peut-on pas imaginer que lorsque l'on utilise des sondes courtes, on puisse trouver aussi des séquences exactement complémentaire de la sonde avec une probabilité élevée.  [...] Comme la sonde est utilisé de manière saturante (on met une grande quantité de sonde), la seule chose que tu risque de voir en procédant ainsi c'est... un marquage uniforme, du noir partout.  [...]

[Biologie Cellulaire] marquages "anormaux" lysotracker et dansylacadaverine

Nous observons dans notre etude une fusion de compartiments marqués au lysotracker-red (lysosomes) avec des inclusions de bactéries pathogenes intracellulaires. Les corps bacteriens (. 4µm) deviennent positifs au lysotraker et au monodansylcadaverine. Le soucis c'est que ces deux marqueurs acidophiles devraient etre solubles et en fait ils marquent tres specifiquement les membranes de ces corps bacteriens anormaux et pas l'interieur.  [...] Est ceque quelqu'un a une experience de ce type de marquage avec ces sondes.  [...]

qu'est-ce qu'un BAC (chromosome artificiel bactérien) ?

Dans mon cours (sur la cytogénétique moléculaire), on parle successivement des sondes centromériques, puis des sondes locus spécifiques, puis de whole chromosome painting... et ensuite on parle des BACs... mais que vient faire BAC là dedans quel est le lien entre le fait de parler d'une bactérie qui peut cloner une séquence et les techniques de repérage de séquences nucléiques par des sondes je suis perdue.  [...] L'avantage c'est qu'on peut y mettre la séquence qu'on veut et la dupliquer dans des microorganismes (tout comme pour les plasmides). Les BAC sont maintenant commercialisés.  [...]

Biotinylation dans l'hybridation inverse

donc si on considère que mettre en gras=biotinyler, pour une séquence double brin on aurait quelque chose comme ça, non (N= A ou C ou T ou G...mais de façon complémentaire pour que ça marche^^).  [...] comme ça, aps l'amplification on obtiendra uniquement des séquences A biotinylées (+ des séquences B non biotinylées), que l'on pourra mettre en évidence par hybridation avec des sondes complémentaires fixées sur une membrane grace à phosphatase alcaline+ streptavidine (on aura un précipité brun).  [...]

[Biologie Moléculaire] Sondes et polymérases

Il existe des tas de sondes différentes utilisables en biologie, mais vu que vous parlez de polymérase, j'en déduis que vous pensez aux sondes ARN ou ADN. Ces sondes sont des séquences de nucléotides monocaténaires qui sont exactement l'inverse de la séquence qu'on souhaite détecter (ADN, ARNm,  [...] ..). Elle vont donc se fixer à la séquence voulue par complémentarité. Sur ces sondes, on ajoute un marqueur (radio-actif, fluorescent, ou autre) qui nous permettra de localiser la sonde.  [...]