• Santé - Fragment, Protéine, Intérêt

[Biologie Cellulaire] Traduction d'une protéine avec codon stop prématuré

Or si je fais une immuno avec cet anticorps n'y a t il pas une risque que je détecte le fragment tronqué de ma protéine muté Sachant que le codon stop prématuré se situe au milieu du gène d'intérêt.  [...] TOn anticorps va détecter forcement la forme tronquée (sauf si elle est éliminée trop rapidement en effet). Mais ce que je n'arrive pas a comprends c'est comment tu peux espérer voir l'extinction de ta protéine par western.  [...]

[Biologie Moléculaire] pcr/clonage

Est ce qu'on fait la PCR apres avoir inseré les fragments d'intérets dans les vecteurs,ou est ce qu'on amplifie par PCR les fragments d'intérets qu'on insere ensuite dans le vecteurPour moi la PCR est une technique de clonage,donc si on connait la séquence qu'on veut cloner,une PCR est suffisante,il n'y a pas besoin d'utiliser de vecteurs apres.  [...] La PCR va permettre d'isoler et amplifier un fragment d'intérêt qui va ensuite être intégré dans un vecteur. Lorsqu'on fait un clonage ou un sous-clonage, on souhaite exprimer ce fragment qui dans la plupart des cas correspond à l'ADNc codant une protéine ou une partie de la protéine.  [...]

[Biologie Moléculaire] vecteur de clonage et le vecteur d'expression

Un vecteur d'expression est un vecteur dans lequel on va cloner le même fragment d'ADN après vérification du clonage dans le vecteur de clonage (taille de l'insert, séquence...) et grâce à son promoteur (constitutif ou inductible) ce vecteur va diriger la bactérie hôte d'expression pour produire la protéine d'intérêt.  [...] I) Définition des vecteurs. Petites molécules d'ADN possédant leur propre système de réplication. Ils servent de véhicule pour le clonage génique.   [...]

marqueurs de sélection

deuxièment, si il faut que la cellule hote soit mutée et qu'il faut utilisé un marqueur pour détecter qu'elle a une mutation et qu'elle a bien recu le fragment d'ADN puisqu'elle continue a vivre, celà veut dire qu'on ne peut pas inséré n'importe quel gène d'interet à une cellule hote.  [...] mais le gène d'intérêt ce n'est pas le gène qu'on veut obtenir en grande quantité Je pensais que dans ce fragment qu'on insérait il y aura ce qui code pour la protéine qu'on veut et puis un fragment de gène impliqué dans la reconnaissance avec le marqueur.. ce n'est pas le cas alors.  [...]

[Biologie Cellulaire] technique de retard sur gel et immunoprécipitation de chromatine

Le retard sur gel permet de déterminer si le fragment d'ADN intéragit avec une protéine ou un complexe protéique (d'ou un retard de migration si tel est le cas). Mais ne donne aucune info sur l'identité de la protéine et de la séquence (même si pour la sequence il y a moyen de bricoler pour en savoir plus).  [...] Je peux te detailler le protocole mais ce que tu dois retenir c'est qu'a la fin avec la chip on obtient carrément le fragment d'adn sur lequel la protéine s'est fixé. donc non seulement il y a eu interaction mais on peut aller plus loin en t'informant précisément du site de liaison de la protéine a l'ADN.  [...]

Phage display et banque d'ADNc

Le principe c'est de faire exprimer la protéine à la surface du bactériophage et puis d'isoler les bactériophages qui expriment la protéine d'intérêt à l'aide d'Ac (et pour réaliser ca, on fait des protéines de fusion).  [...] Le phage-display, c'est une méthode de criblage qui permet de selectionner un fragment d'ADN à partir des propriétés d'intéraction de la protéine qu'il code. Par exemple, dans ton cas, tu cherches un cDNA qui code pour un fragment peptidique reconnu par un anticorps spécifique.  [...]

Définition | Plasmide | Futura Santé

Dans la nature, les plasmides sont des morceaux d' ADN qui peuvent se transmettre par transfert horizontal, de cellule en cellule. S'il porte un gène d'intérêt ( résistance à un antibiotique par exemple), c'est un avantage certain pour les cellules qui le possèdent.  [...] Les chercheurs utilisent les plasmides pour y insérer un fragment d'ADN d'intérêt, grâce aux cassettes de clonage. Ils peuvent ainsi cloner des gènes, afin d'exprimer les protéines ou les ARN et les analyser.  [...]

[Biologie Moléculaire] mutation génétique

J'étudie un fragment de CDNA d'un patient X atteint d'une maladie X sur lequel je recherche des mutations génétiques. Ce fragment code pour une protéine importante, sa mutation provoquerait systématiquement la maladie. Phénotypiquement le patient présente le syndrome typique de la maladie donc on devrait retrouver une mutation sur cette protéine.  [...] Non tous mes segments ne font pas la même taille ils se situent entre 280 et 500pb. J'amplifie 11 segments de mon cDNA ce qui correspond à tout les exons ciblés sur l'ADNg qui code pour la protéine d'intérêt. 11 fois car le séquenceur ne permet pas de lire au dela de 700pb alors on segmente.  [...]

[Biologie Cellulaire] Anticorps WB ou ICC

Dernière chose, les résultats sont très différents selon qu'on produit des anticorps dirigés contre une protéine totale ( a l'ancienne ) ou contre un fragment synthétisé.  [...] Justement, étant donné que l'on dénature avant le dépôt sur gel, la protéine permet sa conformation 3D, le fragment devrait donc être plus accessible.  [...]

Une nouvelle piste pour un contraceptif masculin !

Ce fragment d' ADN code pour une protéine fondamentale dans les phases ultimes du développement des spermatozoïdes. Elle contrôle les microtubules, structures servant de squelette à la cellule et intervenant également dans le transport des nutriments et des cellules germinales au cours de leur différenciation dans le tube séminifère.  [...] Il ne faudra malgré tout pas se tromper et choisir une molécule très spécifique, qui n'agit qu'au niveau testiculaire et non pas à d'autres niveaux de l'organisme, pour éviter des effets secondaires dangereux. Les scientifiques pensent que la protéine KATNAL1 ne constitue pas la cible idéale, mais elle pourrait être utile dans un médicament qui agirait sur un composé qui collabore obligatoirement avec elle pour lui conférer son activité.  [...]